分析沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法在食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值

朱根忠

（江蘇省建湖縣疾病預(yù)防控制中心，江蘇 鹽城 224700）

食品安全檢查屬于衛(wèi)生檢測工作中較為重要內(nèi)容，且在生活質(zhì)量持續(xù)提升的情況下，居民對于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作也越發(fā)重視。在常見細(xì)菌性食物中毒中，沙門菌屬屬于最為主要的病原體，屬于食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作的重點(diǎn)[1]。在以往分離培養(yǎng)法檢測過程中，其操作流程較為復(fù)雜，且中間環(huán)節(jié)技術(shù)要求較高，檢查缺乏時(shí)效性以及準(zhǔn)確性。借助沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法進(jìn)行檢測已經(jīng)逐步得到推行。本研究就對該檢測技術(shù)的具體效果進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月-2018年11月500例食品樣本，均借助沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法以及常規(guī)分離培養(yǎng)法檢測。樣本食品中豆制品167例，速凍面粉制品33例，88例凍肉食品，112例蔬菜，其余為水產(chǎn)品。

1.2 方法 500份檢測樣品均借助分離培養(yǎng)法進(jìn)行檢測，采集各檢測樣品各20 g分別放置在BPW 225 mL無菌袋中，持續(xù)拍打2 min，隨后將其放置在恒溫培養(yǎng)箱中持續(xù)培養(yǎng)18 h，溫度設(shè)定為37oC。取培養(yǎng)后的增菌液約1 mL，加入10 mL TTB增菌液中，培養(yǎng)12 h，溫度控制為42oC，再取1 mL加入到10 mL ISC增菌液中，同樣培養(yǎng)12 h，溫度控制為37oC。隨后將其接種到BS平板中，培養(yǎng)12 h，取可疑菌落接種到營養(yǎng)瓊脂平板中，借助全自動微生物鑒定系統(tǒng)進(jìn)行檢查。而在沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法檢測中，取樣本前增菌液1 mL進(jìn)行離心處理，得到核算。另取1 μL作為DNA檢測模板，按照2010版標(biāo)準(zhǔn)對引物進(jìn)行設(shè)計(jì)，后續(xù)檢測按照常規(guī)方案進(jìn)行，評定反應(yīng)體系混濁情況。未出現(xiàn)渾濁，即視為陰性。

1.3 觀察指標(biāo) 對兩種檢測方式下陽性率以及檢測用時(shí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 研究中與兩組有關(guān)各數(shù)據(jù)都以SPSS 19.0進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)合本次檢測可知，在沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法中，18份樣本表現(xiàn)為陽性，而分離培養(yǎng)中，僅4份表現(xiàn)為陽性，對比可知χ2=7.099，P=0.001。在檢測用時(shí)上，沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法檢測完成時(shí)間為（24.12±1.08）d，而分離培養(yǎng)為（5.82±1.22）d，對比可知t=19.082，P=0.001。

3 討論

食品衛(wèi)生安全歷來為社會所關(guān)注，在食品中毒事件發(fā)生率持續(xù)增加的情況下，食品衛(wèi)生問題更受到檢測人員以及社會居民的關(guān)注。為保障居民食品安全，更需要對食品衛(wèi)生檢測工作加以重視，及時(shí)對不合格食品進(jìn)行發(fā)現(xiàn)與處理。結(jié)合有關(guān)統(tǒng)計(jì)可知，沙門菌屬為誘發(fā)食物中毒的主要細(xì)菌，對于該類細(xì)菌的檢測為食品檢測部門的重點(diǎn)。在以往分離培養(yǎng)檢測過程中，雖然可在一定程度上對食品中沙門菌屬含量情況進(jìn)行有效檢測，但該技術(shù)檢測周期較長，且操作較為復(fù)雜，受外界干擾的因素較大，促使其整體檢測效果欠佳[2]。此外，在該檢測技術(shù)中需要借助全自動微生物鑒定系統(tǒng)輔助進(jìn)行檢測，所需費(fèi)用較大。

借助沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法進(jìn)行檢測屬于新型檢測技術(shù)，該檢測技術(shù)建立在核算擴(kuò)增的層面上，通過對靶基因中特定區(qū)域進(jìn)行4種特異引物進(jìn)行確定，隨后在DNA聚合酶的作用下并進(jìn)行恒溫?cái)U(kuò)增，可對食物中是否存在沙門菌屬進(jìn)行有效鑒定[3]。該檢測技術(shù)操作較為簡單，且擴(kuò)增產(chǎn)物的辨別較為容易，通過肉眼觀察是否存在白色渾濁沉淀，即可達(dá)到對擴(kuò)增情況進(jìn)行判定的效果。

早在劉寧偉等[4]研究中已經(jīng)指出，借助沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法對食品中沙門菌屬進(jìn)行檢測，可有效提升該方面檢測工作的整體效率。在本次研究中，我檢測中心就側(cè)重對沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法以及常規(guī)分離培養(yǎng)法的具體效果進(jìn)行對比。結(jié)合檢測結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，在檢測陽性率上，沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法明顯較高，可見該技術(shù)在檢測食品沙門菌屬中存在有較高的準(zhǔn)確性，同時(shí)，在檢測用時(shí)層面，該檢測技術(shù)用時(shí)明顯較短，一般在24 h左右，進(jìn)一步證實(shí)該檢測技術(shù)的具備極高的時(shí)效性。

總之，基于沙門菌屬環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增方法在食品衛(wèi)生檢測工作中的多方面優(yōu)勢，可將該檢測技術(shù)在實(shí)際檢測過程中持續(xù)進(jìn)行推行與使用，提升該環(huán)節(jié)綜合檢測效率，為食品安全提供保障。