德國(guó)洋甘菊對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂癥大鼠的降脂作用

蘭 衛(wèi)， 王 瑩， 郝宇薇， 劉婧怡， 安冬青

(新疆醫(yī)科大學(xué)1中醫(yī)學(xué)院， 烏魯木齊 830011； 2附屬中醫(yī)醫(yī)院， 烏魯木齊 830002)

高脂血癥(hyper lipidemia，HLP)是指以血漿中一種或多種脂質(zhì)成分[主要指甘油三酯(TG)和膽固醇(TC)]異常增高為特征的代謝紊亂綜合病癥[1]。因發(fā)病比較隱匿，患者幾乎沒(méi)有特異的癥狀，偶爾會(huì)出現(xiàn)胸悶、頭暈、失眠等癥狀，如不及時(shí)治療，則會(huì)引發(fā)冠心病、心肌梗死、腦卒中等嚴(yán)重的疾病，因此血脂水平的控制是從源頭上防治心腦血管疾病的關(guān)鍵[2]。目前臨床中使用的降血脂藥物主要有他汀類(lèi)、貝特類(lèi)、膽汁酸螯合劑以及煙酸等，這些藥物均通過(guò)不同的途徑發(fā)揮降血脂作用，但部分患者出現(xiàn)橫紋肌溶解、肝臟損害、精神抑郁等一系列不良反應(yīng)[3-4]。中藥降脂藥物具有療效持久、副作用小等特點(diǎn)[5]。有學(xué)者對(duì)中藥中具有降脂作用的活性成分進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)中藥降脂作用主要通過(guò)抑制膽固醇吸收、調(diào)節(jié)血脂代謝、促進(jìn)膽固醇排泄來(lái)實(shí)現(xiàn)[6]。本研究采用大鼠高脂飼料灌胃造模，給予藥物干預(yù)，評(píng)價(jià)德國(guó)洋甘菊提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血脂大鼠的降脂作用，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1.1儀器AL204型電子天平(梅特勒-托利多儀器上海有限公司)，DK-S24型電熱恒溫水浴鍋 (上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)，Centrifuge 5804型全高速冷凍離心機(jī) (德國(guó) Eppendorf)，AO86A0182型全自動(dòng)生化分析儀(邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)，BCD-238WF型冰箱 (中國(guó)海爾集團(tuán))，一次性普通真空采血管(江蘇康健醫(yī)療用品有限公司，批號(hào)151201)，一次性使用采血針(江西豐臨醫(yī)用器械有限公司，批號(hào) 20140099)。

1.2試藥辛伐他丁片(杭州默沙東制藥有限公司，批號(hào) J20130068)，水合氯醛(武漢市和盛化工有限公司，批號(hào)1005412)，復(fù)方氯化鈉注射液(新疆制藥有限公司，批號(hào)H65020068)，膽固醇(北京博奧拓達(dá)科技有限公司，批號(hào)201312)，普通鼠粉末飼料(購(gòu)自新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物中心)。

1.3藥材德國(guó)洋甘菊樣品2016年6月采于和田地區(qū)策勒縣博斯坦鄉(xiāng)，經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院李永和主任藥師鑒定為德國(guó)洋甘菊(Matricariachamomilia)的全草。

1.4動(dòng)物Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量(200±20)g，批號(hào)：20160126，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK(新)2011-0003，由新疆醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2 方法

2.1樣品的制備德國(guó)洋甘菊醇提取物：德國(guó)洋甘菊藥材，12倍，70%乙醇，回流提取，提取3次，每次2 h，冷凍干燥，得干膏粉，出膏率為32.0%；德國(guó)洋甘菊水提取物：德國(guó)洋甘菊藥材，20倍水提取，提取3次，每次2 h，冷凍干燥，得干膏粉，出膏率45.0%。

2.2高脂飼料的制備[7-10]將豬油加熱融化，按豬油-膽固醇粉末-蔗糖-普通鼠粉末飼料(10∶2∶6∶82)混合均勻，制粒，晾曬1～2 d，即得。

2.3高脂模型的建立大鼠給予普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w，按體質(zhì)量隨機(jī)分成2組，其中10只大鼠給予基礎(chǔ)飼料為正常對(duì)照組，其余92只大鼠給予高脂飼料建立高血脂模型。每周稱(chēng)重1次，造模30 d后，期間大鼠不禁食，斷尾采血，血樣經(jīng)3 500 r/min離心20 min后，取血清測(cè)定大鼠血清中總膽固醇TC、低密度脂蛋白水平(LDL-C)、TG，正常對(duì)照組大鼠同樣處理。

2.4動(dòng)物分組及給藥選取造模成功的大鼠70只，隨機(jī)分為7組(n=10)，分別為正常對(duì)照組(蒸餾水1 mL/kg)，模型對(duì)照組(蒸餾水1 mL/kg)，陽(yáng)性對(duì)照組(辛伐他丁7 mg/kg)，德國(guó)洋甘菊醇提物高、中、低劑量組(971、485、243 mg/kg)，德國(guó)洋甘菊水提物組(1 366 mg /kg)。將大鼠固定，口腔與食道成直線(xiàn)，灌胃，連續(xù)灌胃4 w。正常對(duì)照組大鼠喂養(yǎng)普通飼料，其余各組大鼠均喂養(yǎng)高脂飼料，自由飲水。

2.5指標(biāo)的測(cè)定方法末次給藥后禁食不禁水12 h，稱(chēng)取體質(zhì)量，將大鼠腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg以麻醉，仰臥固定于大鼠臺(tái)上，剪開(kāi)腹腔，分離出血管，手固定血管以及血管兩旁的脂肪和其他臟器，右手持一次性采血針，針尖斜面朝下，朝向心端方向入針，進(jìn)針后迅速將采血針另一端插入真空采血管中，收集全血。在收集大鼠全血后3 500 r/min離心20 min，使用移液槍精密吸取上層淡黃色澄明血清，分裝，存入-80℃冰箱備用。使用全自動(dòng)生化分析儀對(duì)大鼠血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平進(jìn)行測(cè)定。

3 結(jié)果

3.1實(shí)驗(yàn)前后大鼠體質(zhì)量變化情況在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，7組大鼠體質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P>0.05)，但在造模成功實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，與對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組、德國(guó)洋甘菊醇提物高劑量組大鼠體質(zhì)量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與正常組比較，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠體質(zhì)量下降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

3.2德國(guó)洋甘菊提取物對(duì)高血脂大鼠體內(nèi)TC、TG、LDL-C、HDL-C的影響與模型組大鼠相比，德國(guó)洋甘菊醇提物高劑量組大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；德國(guó)洋甘菊醇提物中劑量組大鼠血液TC、TG、LDL-C值降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，德國(guó)洋甘菊醇提物高劑量組和中劑量組的HDL-C值升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表1 實(shí)驗(yàn)前、后大鼠體質(zhì)量變化情況

注：與模型對(duì)照組比較，*P<0.05；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，**P<0.05。

表2 德國(guó)洋甘菊對(duì)高血脂大鼠體內(nèi)TC、TG、LDL-C、HDL-C的影響

注：與正常對(duì)照組比較，aP<0.01；與模型對(duì)照組比較，bP<0.05，cP<0.01。

4 討論

血脂異常表現(xiàn)為血液中TC、TG、LDL-C一種或者幾種升高，或者HDL-C水平降低。其中HDL-C的缺乏和LDL-C的升高是導(dǎo)致高脂血癥的重要原因之一。從中草藥中提取的多種天然黃酮類(lèi)成分具有良好的降血脂作用。天然黃酮類(lèi)成分在抗低密度脂蛋白的氧化作用、清除體內(nèi)自由基及抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)生等多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮降血脂作用。研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)方山楂黃酮提取物具有抑制 TC、TG 升高的作用。在治療過(guò)程中給藥高劑量組與高血脂模型陽(yáng)性對(duì)照組相比，膽固醇水平降低，高密度脂蛋白水平提高[11]。松針黃酮能降低高脂飲食誘導(dǎo)的高脂血癥大鼠模型的血清甘油三酯和膽固醇水平，說(shuō)明松針黃酮有一定的降血脂作用[12]。木槿花總黃酮通過(guò)降低高脂血癥大鼠血清中甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白水平，升高高密度脂蛋白、載脂蛋白A的水平而發(fā)揮降血脂作用[13]。三七總黃酮能夠降低Wistar大鼠建立的高脂血癥模型血清中甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白水平，同時(shí)升高高密度脂蛋白水。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，三七總黃酮抑制細(xì)胞中二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶、羥甲基戊二酸單酰輔酶還原酶水平，升高膽固醇 7α-羥化酶、肝臟甘油三脂脂肪酶的活性[14]。本研究發(fā)現(xiàn)德國(guó)洋甘菊醇提取物具有較好地降脂作用，而德國(guó)洋甘菊水提取物的降脂作用不明顯，德國(guó)洋甘菊醇提取物降脂作用的原因及機(jī)制還需進(jìn)一步深入研究。

[1] 黃曉飛. 絞股藍(lán)復(fù)方降糖、降脂作用的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 武漢:湖北中醫(yī)藥大學(xué), 2014.

[2] 劉晶晶, 賈連群, 呂美君,等.高脂血癥中西醫(yī)結(jié)合研究進(jìn)展[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2017，35(4)：1673-1677.

[3] ARMITAGE J. The safety of statins inclinical practice[J].Lancet, 2007, 9(24): 1781-1790.

[4] BROWN W. Safety of statins[J]. Curr Opin Lipidol, 2008, 19(6): 558-562.

[5] 馬明麗,陳民.中醫(yī)藥降血脂實(shí)驗(yàn)研究的最新進(jìn)展[J].遼寧中醫(yī)雜志, 2007, 34(4): 540-541.

[6] 劉暢, 柴逸峰, 劉峰群, 等.中藥有效成分降血脂作用和機(jī)制研究進(jìn)展[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志, 2010, 28(3): 167-169, 195.

[7] 錢(qián)俊青,戴承恩,李尚謙,等.竹葉黃酮降血脂活性研究[J].浙江工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2014, 42(5): 496-498.

[8] 趙文萃,張寧,周慧琴,等.三七總黃酮對(duì)高血脂大鼠血脂的影響[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2016，22(8):143-148.

[9] 雷燕妮.黃芩總黃酮對(duì)高血脂大鼠的降血脂作用研究[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014 35(7):64-68.

[10] 張海,單麗娟.化濁降脂湯對(duì)高脂血癥大鼠降血脂及抗氧化能力的實(shí)驗(yàn)研究[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2009,32(4):418-419,422.

[11] 李久長(zhǎng),馬挺軍,劉誠(chéng).復(fù)方山楂黃酮的提取及調(diào)脂研究[J].食品科學(xué)，2006，27(3)：216-218．

[12] 彭欣莉,鄭鴻雁,昌友權(quán).松針黃酮抗氧化和降血脂作用研究[J].食品工業(yè)科技,2005,26(12):165-176．

[13] 盧秋玉,陳曉宇,申慶榮,等.木棉花總黃酮降血脂作用及其機(jī)制研究[J].中藥藥理與臨床，2016，32(1)：88-91.

[14] 董桂芝,張慧琴.化濁合劑治療高脂血癥62例[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2001,29(2):6-7.