老年糖尿病患者補(bǔ)體C1q/腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9及抗氧化應(yīng)激水平的相關(guān)性研究

胡月亮 楊 暉 沈琳輝 趙雅潔 梁 偉※

補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白(C1qtumornecrosisfact-orrelatedproteins，CTRPs)家族是最新發(fā)現(xiàn)的與脂聯(lián)素(adiponectin，APN)結(jié)構(gòu)類似的一組蛋白。腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(CTRP9)是CTRP家族成員中與脂聯(lián)素結(jié)構(gòu)最相近的分子。目前已有研究表明其可影響大鼠血糖[1]，這提示CTRP9可能在糖脂代謝中發(fā)揮了作用。證據(jù)[2]顯示，糖尿病患者體內(nèi)的自由基生成增加而清除能力受損，且老年糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展與人體內(nèi)抗氧化力與自由基之間的失衡有關(guān)。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于患者體內(nèi)氧化應(yīng)激(OS)狀態(tài)與CTRP9關(guān)系的研究不多，對(duì)老年人群的研究更有限。本研究通過測(cè)定老年糖尿病患者血清CTRP9，過氧化氫酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)水平，旨在了解它們?cè)诶夏晏悄虿〔∽冞^程中發(fā)揮的作用。

1.資料和方法

1.1 資料 根據(jù)1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，2016年1月～2017年5月在上海瑞金醫(yī)院北院內(nèi)科病房住院患者中收集2型糖尿病患者(DM組)89例，年齡60～89歲，平均年齡72.36±6.54歲，同時(shí)選取正常糖耐量者62名(NGR組)，年齡62～88歲，平均年齡71.51±13.65歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：1型糖尿病及合并嚴(yán)重的糖尿病急、慢性并發(fā)癥；急慢性感染、腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病及肝腎功能不全、風(fēng)濕性疾病及其他內(nèi)分泌代謝疾病及其他任何對(duì)糖、脂代謝造成影響的藥物。近3個(gè)月來未發(fā)生糖尿病酮癥酸中毒等急性并發(fā)癥。

1.2 方法

1.2.1 臨床指標(biāo)測(cè)定：測(cè)量體重、身高。計(jì)算BMI、穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)(HOMA-IR=FINS×FPG/22.5)。

1.2.2 相關(guān)生化指標(biāo)測(cè)定：受試者禁食8～10小時(shí)后于清晨抽取空腹肘靜脈血測(cè)空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS)、血脂[總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)]、糖化血紅蛋白(HbA1C)。

1.2.3 血清CTRP9,CAT及SOD測(cè)定:靜脈血抽取放至普通玻璃管，待血液凝集后，放置高速離心機(jī)內(nèi)離心，溫度設(shè)為4℃，離心轉(zhuǎn)速設(shè)為3500r/min，半徑17.3cm,10分鐘后提取上清液，放入EP試管，放置在-80℃冰箱。然后集中送檢實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行CTRP9,CAT及SOD的測(cè)定。使用酶標(biāo)記免疫(ELISA)吸附測(cè)定法，ELISA試劑盒由上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司提供。

2.結(jié)果

2.1 兩組基本資料比較 兩組在性別、年齡上無顯著性差異。與正常糖耐量組比較，糖尿病組BMI，TG，TC，LDL-C，F(xiàn)BG，F(xiàn)INS，HOMA-IR，HbA1c顯著升高，HDL-C，CTRP9水平顯著降低(P<0.05)。見表1。

2.2 正常糖耐量組與糖尿病組CAT和SOD的比較 與正常糖耐量組比較，糖尿病組CAT及SOD水平均較低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

2.3 CTRP9與代謝相關(guān)因素的分析 校正年齡、性別后，CTRP9與空腹血糖(r=-0.281)、胰島素(r=-0.253)、HOMA-IR(r=-0.277)、糖化血紅蛋白(r=-0.423)呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表3。

2.4 老年糖尿病組CTRP9水平與SOD活性和CAT水平的相關(guān)性分析 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，糖尿病組CTRP9水平與SOD水平呈正相關(guān)(r=0.351，P=0.032<0.05)，與CAT活性呈正相關(guān)(r=0.214，P=0.017<0.05)。

表1 患者臨床資料的比較

注：與正常糖耐量組比較，*P<0.05。

表2 正常糖耐量組與糖尿病組CAT與SOD的比較

表3 校正年齡、性別后CTRP9與代謝相關(guān)因素的分析

表4 CTRP9水平與SOD活性和CAT水平的相關(guān)性分析

3.討論

最近研究發(fā)現(xiàn)：脂肪細(xì)胞分泌的與APN結(jié)構(gòu)類似的CTRP具有調(diào)節(jié)糖、脂代謝的作用[3]。CTRP9是2009年被Wong發(fā)現(xiàn)的CTRP家族中與APN最高度同源的脂肪細(xì)胞因子，并與血管內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞的APN共用脂聯(lián)素受體(Adiponectin receptor，AdipoR)1及AdipoR2[4]。研究發(fā)現(xiàn)過表達(dá)CTRP9基因的轉(zhuǎn)基因小鼠胰島素抵抗得到改善，血清胰島素水平下降，而敲除此基因的小鼠胰島素抵抗增加，血清胰島素水平上升[5，6]。這些說明CTRP9可能增加胰島素敏感性，其參與了糖脂代謝紊亂的發(fā)生。本研究發(fā)現(xiàn)老年2型糖尿病患者血清CTRP9水平降低，這與國(guó)外類似研究[7]結(jié)果一致，同時(shí)本研究也顯示CTRP9與FBG，HbA1C，HOMA-IR具有顯著負(fù)相關(guān)性，提示低水平的CTRP9參與了老年2型糖尿病的發(fā)生。

相關(guān)資料[8]表明，由于糖尿病患者血糖升高，糖化血紅蛋白生成增多，氧合血紅蛋白減少，紅細(xì)胞攜氧能力下降，加之血糖升高致血液黏稠度升高，微血管灌注不良，均可致組織細(xì)胞缺氧，促進(jìn)了自由基的形成。當(dāng)患者的抗過氧化能力降低不能及時(shí)清除時(shí)，導(dǎo)致自由基在體內(nèi)的大量堆積，加重了組織細(xì)胞的損害致功能受損。在活性氧自由基有氧代謝過程中，機(jī)體內(nèi)亦存在完善的抗氧化防御酶系，包括SOD和CAT等。SOD是岐化超氧陰離子的專一性酶，是重要的氧自由基清除劑，并與機(jī)體的急慢性炎癥反應(yīng)、抗衰老等均存在密切關(guān)系。CAT是過氧化氫酶體的標(biāo)志酶，其主要作用是催化H2O2，防止O2在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成有害的羥自由基，清除體內(nèi)的過氧化氫，減輕和阻斷脂質(zhì)過氧化作用的一級(jí)引發(fā)作用。自由基的清除能力異常會(huì)對(duì)細(xì)胞造成損害。隨著年齡增長(zhǎng)，機(jī)體清除自由基能力必然減退，人體內(nèi)抗氧化能力有所下降。毛達(dá)勇等[9]認(rèn)為，T2DM患者體內(nèi)存在氧化與抗氧化力的失衡，這與糖尿病血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；陳暉等[10]研究認(rèn)為，SOD的減少與T2DM胰島細(xì)胞分泌功能下降有關(guān)。以上研究均說明T2DM患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激，從而導(dǎo)致SOD水平的降低。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，老年糖尿病患者體內(nèi)的抗氧化酶類SOD，CAT的含量明顯降低(P<0.05)，提示SOD及CAT水平變化與血糖水平密切相關(guān)。

已有研究發(fā)現(xiàn)CTRP9有抑制氧化應(yīng)激的作用[11]。Kambara等發(fā)現(xiàn)小鼠心肌缺血后，較高的氧化應(yīng)激狀態(tài)導(dǎo)致脂肪組織CTRP9表達(dá)下降進(jìn)而降低血清CTRP9水平。Su等發(fā)現(xiàn)TNFα通過增強(qiáng)氧化應(yīng)激及抑制PPARγ下調(diào)糖尿病小鼠心肌組織中CTRP9的表達(dá)，加重缺血再灌注后的心肌損傷[11]。本研究也發(fā)現(xiàn)老年糖尿病患者CTRP9與SOD，CAT呈顯著正相關(guān)，進(jìn)一步證實(shí)其在氧化應(yīng)激中發(fā)揮了重要作用。事實(shí)上，氧化應(yīng)激損害只是多種造成生物老化損傷因素中的一種，它所造成的生物大分子的病理性損傷和修飾的累積是生物體病變和衰老的一類最常見的生化反應(yīng)。

綜上所述，氧化應(yīng)激作為糖尿病發(fā)病機(jī)制之一，與其發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸關(guān)系密切。改善機(jī)體的氧化應(yīng)激能力對(duì)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定有重要意義。低水平的CTRP9參與了T2DM的發(fā)生。目前我國(guó)老齡化加劇,糖尿病發(fā)生率逐年升高，其并發(fā)癥大大降低了患者的生活質(zhì)量。因此，進(jìn)一步在老年人群中深入探討CTRP9的確切機(jī)制及作用，可為老年糖尿病的治療提供新的切入點(diǎn)，為老年患者帶來福音。

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