西藏藏豬血液生化指標(biāo)及宰后肌肉抗氧化性能研究

徐海鵬 張 建 阿旺尼瑪 加 布 格桑卓瑪 李川皓 陳 偉,*曾勇慶,*

（1山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院/山東省動物生物工程與疾病防治重點實驗室，山東泰安 271000；2西藏工布江達(dá)縣畜牧獸醫(yī)站，西藏工布江達(dá) 860200）

藏豬是我國特有的高原型地方豬種，主要有西藏藏豬、甘孜藏豬、迪慶藏豬和合作藏豬等類群[1]；養(yǎng)殖區(qū)域大多位于海拔2 500 m以上的中國西藏青藏高原上的農(nóng)區(qū)以及半農(nóng)半林半牧區(qū)[2]。當(dāng)今，因其所生長的環(huán)境以及人們的選育有所不同，藏豬的性能也有所差異；當(dāng)中，西藏藏豬作為高原型原始藏豬主要分布于西藏工布江達(dá)縣，其中巴河鎮(zhèn)、朱拉鄉(xiāng)和錯高鄉(xiāng)是西藏藏豬的中心產(chǎn)區(qū)[3]。因青藏高原特殊的放牧環(huán)境，適應(yīng)了嚴(yán)酷的低溫氣候的藏豬具有了耐低氧、耐高寒、耐粗飼等很強(qiáng)的抗逆、抗氧化性能[1,4]。

動物的長期進(jìn)化形成了其特別的血液生理特性，這些特性可反映其所適應(yīng)的長期生長的環(huán)境，具備物種以及品種特點[2,5]。經(jīng)過很長時間進(jìn)化與自然選擇后的高原動物具備了適應(yīng)低氧的能力，在血液學(xué)上體現(xiàn)出的特性是氧與血紅蛋白釋放和結(jié)合的能力可顯著加強(qiáng)。研究發(fā)現(xiàn)，為適應(yīng)高原低氧環(huán)境，藏豬血液中的紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積顯著高于平原豬種，并且血液黏度增高[6-8]。

動物機(jī)體防御體系中抗氧化能力的強(qiáng)弱與其健康程度存在著密切的聯(lián)系。在動物防御體系中，超氧化物歧化酶（SOD）等各成分之間相互起到了協(xié)同的作用，以及代償與依賴作用[9]。同樣，宰后肌肉的脂質(zhì)氧化速度和程度取決于動物機(jī)體的抗氧化能力；因其體內(nèi)具有防護(hù)作用的抗氧化酶例如SOD等活性的降低，導(dǎo)致其中不飽和脂肪酸的快速氧化，破壞正常生物膜功能和結(jié)構(gòu)，致使肉品滴水損失的升高。因此，SOD能終止脂質(zhì)氧化反應(yīng)，提高肉品質(zhì)，延長肉類食品的貨架期[10-12]。目前，對西藏藏豬保護(hù)區(qū)內(nèi)藏豬抗氧化性能的研究尚鮮見報道。為此，本文以西藏藏豬為研究內(nèi)容，深入研究藏豬屠宰后肌肉與血液的總抗氧化性能、SOD活性與MDA含量的變化，目的在于研究西藏藏豬優(yōu)良抗逆性的形成過程和調(diào)控機(jī)理，為藏豬遺傳資源的保護(hù)和開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗豬與樣品采集

試驗藏豬樣品來自國家級藏豬遺傳資源保護(hù)區(qū)工布江達(dá)縣的3個藏豬群體，分別為錯高鄉(xiāng)、巴河鎮(zhèn)與朱拉鄉(xiāng)，每個群體隨機(jī)選取6頭12月齡、體況良好、體重在25 kg左右的肥育豬進(jìn)行屠宰。屠宰后采集血液15 mL（非抗凝血），4500 r/min離心20 min分離血清，于-20℃存放，用于檢測血液抗氧化性能和生化指標(biāo)。在試驗豬屠宰后1 h內(nèi)，于胸腰椎連接部位分離背最長肌，取胸段背最長肌樣肉樣50 g左右，0～4℃保存，每隔24 h取樣2～5 g，測定總抗氧化性能、SOD活性和MDA含量。

1.2 血液生化指標(biāo)分析

采用日立7020型全自動生化分析儀對血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白 （TP）、白蛋白 （ALB）、肌酸激酶（CK）、血糖（GLU）、總膽固醇（TCHO）、高密度脂蛋白 （HDL）、低密度脂蛋白 （LDL）、乳酸脫氫酶（LDH）、血清鈣（CA）、血清鎂（MG）、血清磷（IP）進(jìn)行測定。

1.3 抗氧化性能分析

根據(jù)南京建成生物工程研究所試劑盒的使用說明，測定血液及宰后1～6 d的肌肉SOD活性、總抗氧化性能（T-AOC）和MDA的含量。SOD是經(jīng)過黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)所生成的超氧陰離子自由基（O2-），O2-氧化羥胺生成亞硝酸鹽，在顯色劑的效果下顯現(xiàn)紫紅色，用可見分光光度計測定吸光度。MDA含量檢測是通過其與硫代巴比妥酸縮合生成紅色產(chǎn)物，在532 nm波長處有最大吸收峰。T-AOC測定是因機(jī)體內(nèi)的抗氧化物質(zhì)，可使Fe3+還原成Fe2+，后者能與菲啉類物質(zhì)形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，比色可檢測出其抗氧化能力的強(qiáng)弱。

1.4 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)使用SAS（8.2）統(tǒng)計軟件處理，使用ANOVA程序進(jìn)行方差分析，使用Duncan’s方法進(jìn)行多重比較，試驗數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 西藏藏豬血液生化指標(biāo)分析

在3個西藏藏豬群體中，只有AST、ALP、TP、CK、GLU和LDH存在極顯著差異（＜0.01），而其他指標(biāo)均差異不顯著（＞0.05） （表1）。其中，錯高鄉(xiāng)藏豬和巴河鎮(zhèn)藏豬的AST、ALP和LDH含量均顯著低于朱拉鄉(xiāng)藏豬（＜0.01）；而錯高鄉(xiāng)藏豬和巴河鎮(zhèn)藏豬TP和GLU均顯著高于朱拉鄉(xiāng)藏豬（＜0.01）。另外，巴河鎮(zhèn)藏豬與朱拉鄉(xiāng)藏豬CK均顯著高于錯高鄉(xiāng)藏豬（＜0.01）。

2.2 西藏藏豬血液抗氧化性能分析

所測3個西藏藏豬群體的血液SOD活性（圖1A）、MDA含量（圖1B）和T-AOC（圖1C）活性均差異不顯著 （＞0.05）。但是，3個藏豬群體的 SOD和T-AOC活性均高于已報道的長大雜交豬（66.8 U/mL和0.26 U/mL）；相反，MDA含量低于長大雜交豬（9.70nmol/mL）[13]。研究結(jié)果表明，該保護(hù)區(qū)內(nèi)3個西藏藏豬群體在血液抗逆性方面存在一致性。

2.3 西藏藏豬肌肉抗氧化性能變化

盡管3個群體的西藏藏豬宰后肌肉SOD活性（圖2A）、T-AOC活性（圖 2B）和MDA含量（圖 2C）均差異不顯著（＞0.05）。但是，3個群體的西藏藏豬SOD活性均顯著性高于已報道的萊蕪豬、魯萊黑豬和大白豬，而MDA含量卻顯著性低于萊蕪豬、魯萊黑豬和大白豬[10]。另外，隨保存時間的延長，西藏藏豬3個群體的屠宰后肌肉SOD活性和T-AOC活性逐漸下降，但是，肌肉中MDA的含量則呈逐漸上升趨勢。

表1 西藏藏豬血液生化指標(biāo)分析

圖1 西藏藏豬血液抗氧化性能分析

3 討論

動物的血液生化指標(biāo)不但反映出種質(zhì)的代謝特性和遺傳的特殊性，而且還可評價動物的生長和生產(chǎn)性能；因此，充分挖掘畜禽血液生化指標(biāo)及其與生產(chǎn)性能的相關(guān)程度可以預(yù)測畜禽的生產(chǎn)力，進(jìn)行早期階段的選種[14,15]。本研究發(fā)現(xiàn)，西藏藏豬各項血液生化指標(biāo)均在合理的范圍之內(nèi)，但是有些指標(biāo)高于其他地方豬種；其中ALT、AST和LDH均高于魯西地方黑豬[16]。有研究證明，提高血液中ALT、AST、LDH和AKP活性，可降低背膘厚，提高瘦肉率[17]。血液中的蛋白含量及各種蛋白的比例組成具有多種用途，血液總蛋白與白蛋白含量可反映體內(nèi)蛋白質(zhì)的吸收、合成和分解狀況以及機(jī)體免疫力的高低[18]。本研究發(fā)現(xiàn)血液總蛋白和白蛋白含量高于榮昌豬[19]、魯西黑豬[16]，這表明西藏藏豬可能存在高血氧親和力或高血流速度等適應(yīng)方式，屬于較高水平的低氧適應(yīng)途徑。

圖2 西藏藏豬肌肉抗氧化性能變化

機(jī)體抗氧化防御體系通過各組分間相互反應(yīng)可清除體內(nèi)自由基，阻斷其中的過氧化的途徑到實現(xiàn)抗氧化的目的[20]?？偪寡趸芰Φ木S持包括酶促和非酶促兩個抗氧化體系，能夠準(zhǔn)確地反映出機(jī)體清除氧自由基的總體能力，也反映了機(jī)體清除掉活性氧的能力。研究發(fā)現(xiàn)，3個藏豬群體血液的T-AOC和SOD活性均高于長大二元雜交豬，MDA含量低于長大二元雜交豬。結(jié)果也證明了西藏藏豬具有較強(qiáng)的抗逆性能[13]。

豬屠宰后肌肉的抗氧化性能反映了豬肉保存的貨架期，同樣抗氧化性能越強(qiáng)，其保存的時間也越長。因此研究宰后肌肉的抗氧化性能變化對了解西藏藏豬豬肉品質(zhì)具有重要作用。研究結(jié)果中，3個群體藏豬24 h的SOD活力分別比張?zhí)礻柕萚21]測定的杜長大育肥豬數(shù)據(jù)高42.93%、41.36%和43.01%，MDA含量分別比杜長大育肥豬數(shù)據(jù)低15.79%、10.51%和21.05%；因此，西藏藏豬肌肉具有較好的抗氧化性。

總之，本研究系統(tǒng)分析了西藏藏豬血液生化指標(biāo)、血液抗氧化性能和宰后肌肉抗氧化性能隨儲存時間的變化。這些指標(biāo)不僅反映了西藏藏豬血液和肌肉的獨特抗氧化性，而且也為西藏藏豬遺傳資源的保護(hù)和開發(fā)利用提供了理論依據(jù)，同時，為進(jìn)一步挖掘西藏藏豬對高海拔低氧的適應(yīng)特性及抗逆性能奠定了基礎(chǔ)。

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此外，作者不超過3名需全部寫出，超過3名則只寫前3名，后加“,等.”，英文為“,et al.”。英文作者表示方法：Hosono T，Lee KK，Barford CC。

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