新疆加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病復(fù)合侵染鑒定及防治建議

康華軍溫智浩袁軍海柴阿麗許建軍何 偉李寶聚

（1河北北方學(xué)院，河北張家口 075061；2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所，北京 100081；3山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山西太谷 030801；4新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，新疆烏魯木齊 830091）

近幾年新疆加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病發(fā)生嚴(yán)重，且兩種病害復(fù)合發(fā)生，均可在番茄葉片、莖稈、果實(shí)上顯癥，在進(jìn)行防治時(shí)應(yīng)綜合分析病害發(fā)生的原因，做到預(yù)防為主，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)結(jié)合多種方法進(jìn)行綜合防治。

新疆地處北緯37～47°之間，常年干燥少雨，日照時(shí)間長(zhǎng)，晝夜溫差大，是我國(guó)面積最大的加工番茄種植基地，與美國(guó)加州、地中海并列為世界三大番茄醬產(chǎn)區(qū)。據(jù)新疆統(tǒng)計(jì)年鑒記載，2015年新疆加工番茄種植面積6.9萬hm2（103.5萬畝），總產(chǎn)量761.3萬t。近年來，由于加工番茄種植面積的不斷擴(kuò)大以及頻繁的從國(guó)內(nèi)外引種，病害發(fā)生逐年加重，導(dǎo)致加工番茄的品質(zhì)和產(chǎn)量降低，造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。2013～2017年，筆者連續(xù)5 a （年）對(duì)新疆昌吉回族自治州阜康市、呼圖壁縣、瑪納斯縣、奇臺(tái)縣、吉木薩爾縣，巴音郭楞蒙古自治州輪臺(tái)縣、焉耆回族自治縣、和靜縣、和碩縣、博湖縣，石河子市等加工番茄主產(chǎn)區(qū)的病害發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病嚴(yán)重發(fā)生，是造成番茄產(chǎn)量降低的主要原因之一，而且兩種病害復(fù)合發(fā)生現(xiàn)象嚴(yán)重。由于兩種細(xì)菌性病害均可在番茄葉片、莖稈、果實(shí)上顯癥，導(dǎo)致生產(chǎn)上難以區(qū)分，給防治帶來一定的困難。

1 新疆加工番茄細(xì)菌性病害發(fā)生情況

2013～2017年筆者對(duì)新疆加工番茄主產(chǎn)區(qū)病害發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)南疆和北疆氣候差異大，病害種類有所不同。在北疆的石河子市、昌吉回族自治州阜康市、呼圖壁縣、瑪納斯縣、奇臺(tái)縣、吉木薩爾縣等地區(qū)，由于加工番茄種植面積不斷擴(kuò)大、主栽品種單一以及連作種植等原因，加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)?。≒seudomonas syringae pv. tomato）和潰瘍病（Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis）發(fā)生異常嚴(yán)重，病株率一般為30%～40%，嚴(yán)重時(shí)病株率高達(dá)60%，且同一地塊兩種病害復(fù)合發(fā)生現(xiàn)象普遍。與北疆相比，南疆巴音郭楞蒙古自治州輪臺(tái)縣、焉耆回族自治縣、和靜縣、和碩縣、博湖縣等地區(qū)，早疫病（Alternaria solani）危害嚴(yán)重，細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病發(fā)生相對(duì)較輕。

2 加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病田間癥狀

2.1 加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病 病原菌為丁香假單胞菌番茄致病變種（Pseudomonas syringae pv.tomato，Pst）。番茄幼苗期與成株期均可染病。幼苗期發(fā)病主要侵染葉片，成株期可侵染葉片、葉柄、莖稈、花和果實(shí)。發(fā)病初期，葉片中部或葉緣產(chǎn)生近圓形或不規(guī)則形褐色、油漬狀小斑點(diǎn)，病斑直徑1～3 mm，周圍有或無黃色暈圈（彩色圖版1、2）；發(fā)病后期，葉片上的病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚?，干枯易折碎且易連成片；葉柄和莖稈感病，初期產(chǎn)生圓形或近圓形褐色小斑點(diǎn)，病斑周圍無黃色暈圈，隨著病情發(fā)展，病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚⒖v向和橫向擴(kuò)展，嚴(yán)重時(shí)可環(huán)繞莖稈或葉柄（彩色圖版3）；病原菌侵染花時(shí)，花蕾上產(chǎn)生油墨狀褐色病斑，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)病斑易連成片（彩色圖版4），萼片表面產(chǎn)生邊緣褐色中央灰白色病斑，周圍無黃色暈圈（彩色圖版5）；果實(shí)感病，初期產(chǎn)生圓形或近圓形褐色油漬狀小斑點(diǎn)，直徑約3 mm，后期病斑逐漸變?yōu)楹谏蚝诤稚走B成片，中央形成木栓化瘡痂（彩色圖版6）。

2.2 加工番茄細(xì)菌性潰瘍病 病原菌為密執(zhí)安棒形桿菌密執(zhí)安亞種（Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis，Cmm）。加工番茄細(xì)菌性潰瘍病菌主要侵染葉片、莖稈和果實(shí)。幼苗期和成株期均可發(fā)病，幼苗期染病，可造成番茄植株死亡，減產(chǎn)嚴(yán)重。成株期發(fā)病，一般是下部葉片先表現(xiàn)癥狀，葉緣變?yōu)楹稚⑾蛏暇砬ú噬珗D版7），似火燒狀，病健交界處變黃褪綠；莖部感病，病原菌從莖部傷口侵入，然后沿維管束向上向下擴(kuò)展，致使髓部中空，維管束變褐腐爛，莖表皮變褐并生出許多不定根（彩色圖版8）；果實(shí)感病，表面產(chǎn)生邊緣乳白色中央粉色的圓形病斑，似鳥眼狀，隨病情加重，病斑中央木栓化突起且易連成片，表皮粗糙（彩色圖版9）。

2.3 加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病復(fù)合侵染癥狀 細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病復(fù)合侵染后，主要是葉片和果實(shí)表現(xiàn)癥狀。葉片感病初期，葉脈和葉肉均可產(chǎn)生近圓形或不規(guī)則形褐色小斑點(diǎn)，周圍有或無黃色暈圈，隨發(fā)病程度加重，病斑變?yōu)楹谏蚝诤稚?，易連成片，葉緣變?yōu)楹诤稚珘乃罓睿〗〗唤缣幫示G變黃（彩色圖版10、11）；果實(shí)感病，產(chǎn)生兩種病斑：一種是邊緣乳白色中央褐色的圓形病斑，病斑中央木栓化，似鳥眼狀；另一種是邊緣褐色中央灰白色的不規(guī)則形、油漬狀病斑，稍大的病斑邊緣變?yōu)楹谏蚝诤稚?，中央木栓化；隨著病情加重，兩種病斑都易連成片，造成果實(shí)表面粗糙不平（彩色圖版12）。

復(fù)合侵染與單一侵染田間癥狀主要區(qū)別在番茄葉片和果實(shí)上：當(dāng)發(fā)生單一侵染時(shí)，番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病是在葉片中間產(chǎn)生褐色、圓形或近圓形斑點(diǎn)，周圍有或無黃色暈圈；番茄潰瘍病是在葉緣產(chǎn)生黃褐色的干邊，似火燒狀；當(dāng)發(fā)生復(fù)合侵染時(shí)，番茄葉片邊緣為褐色、枯死狀，葉片中間形成潰瘍狀穿孔。果實(shí)上發(fā)生單一侵染時(shí)，番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病是在果實(shí)表面產(chǎn)生褐色或黑褐色的病斑，潰瘍病形成的是邊緣乳白色中央粉紅色的病斑；當(dāng)兩種病害復(fù)合侵染時(shí)，會(huì)在果實(shí)表面同時(shí)產(chǎn)生細(xì)菌性斑點(diǎn)病（褐色或黑褐色）與潰瘍病（鳥眼狀）的病斑。

3 加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病病菌復(fù)合侵染鑒定

2013～2017年，筆者從新疆昌吉、瑪納斯等加工番茄生產(chǎn)基地采集了35份疑似番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌復(fù)合侵染的病害樣本，分別進(jìn)行了葉片組織病原菌分子檢測(cè)、分離培養(yǎng)以及致病性測(cè)定。

分子檢測(cè)：取番茄疑似發(fā)病樣本的葉片和莖稈組織，采用植物基因組DNA提取試劑盒，提取發(fā)病組織基因組DNA。然后分別使用根據(jù)Cmm的pat-1基因設(shè)計(jì)的特異性引物CMM5/CMM6（CMM5：5′-GCGAATAAGCCCATATCAA-3′，CMM6：5′-CGTCAGGAGGTTCGCTAATA-3′）（Dreier et al.，1995） 與 根 據(jù) hrpZPst基 因 設(shè)計(jì) 的Pst特 異 性 引 物 MM5F/MM5R（MM5F：5′-GAACGAGCTGAAGGAAGACA-3′，MM5R：5′-CAGCCTGGTTAGTCTGGTTA-3′）（Zaccardelli et al.，2005）對(duì)基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增和測(cè)序。瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示，35份疑似病害樣本均分別擴(kuò)增出預(yù)期大小為614 bp與532 bp的特異性片段。從NCBI網(wǎng)站對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行BLAST比對(duì)，結(jié)果顯示，與Pst（Genbank登錄號(hào)：EU296548.1）和Cmm（Genbank登錄號(hào)：MF409285.1）序列同源性達(dá)到99%～100%。

細(xì)菌分離培養(yǎng)：對(duì)采集的35個(gè)番茄發(fā)病組織進(jìn)行細(xì)菌劃線分離，共分離出Pst菌株38株，Cmm菌株40株，并對(duì)分離出的所有Pst和Cmm菌株分別進(jìn)行致病性測(cè)定。采用噴霧法接種Pst后，葉片發(fā)病初期產(chǎn)生近圓形褐色小斑點(diǎn)，周圍有或無黃色暈圈，產(chǎn)生番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病的典型癥狀；采用剪葉法（將手術(shù)剪前端1 cm蘸取菌懸液后，在幼苗頂端新葉處將主莖剪斷）接種Cmm后，植株出現(xiàn)葉片萎蔫，莖部壞死癥狀。從接種發(fā)病植株上再次進(jìn)行細(xì)菌分離，經(jīng)分子檢測(cè)為Pst與Cmm。結(jié)果表明，從新疆采集的疑似病害樣本由番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌和潰瘍病菌復(fù)合侵染引起。

分子檢測(cè)與細(xì)菌的分離培養(yǎng)以及致病性測(cè)定等結(jié)果表明，從新疆采集的加工番茄樣本確實(shí)發(fā)生了番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌的復(fù)合侵染。

4 加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病發(fā)生規(guī)律

4.1 發(fā)病條件

4.1.1 種子帶菌 細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌既可以附著在種子表面，同時(shí)也可以侵入到果實(shí)內(nèi)部而導(dǎo)致種子內(nèi)部帶菌（李煥玲 等，2011；宋加偉 等，2016）。潰瘍病菌種子帶菌率為1%～5%，從病果上收集的種子播種到大田中可造成高達(dá)53.4%的幼苗發(fā)?。▌A和張樂，1989）。少量帶有細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌的種子播種到土壤中，在苗期即可表現(xiàn)癥狀，條件適宜時(shí)全田大面積發(fā)生。種子帶菌可能是新疆加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病和潰瘍病大發(fā)生的原因之一。

4.1.2 土壤及病殘?bào)w帶菌 細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌可在土壤中存活210 d（天）以上（Blancard，2012），潰瘍病菌可在病殘?bào)w及土壤中存活至少2 a（年）（Gleason et al.，1991）。當(dāng)土壤濕度大、溫度較高時(shí)，病原菌易大量繁殖，播種后會(huì)粘附在種子表面，成為當(dāng)年的初侵染源。另外，病原菌也可在田塊周圍的雜草上越冬，成為翌年的初侵染源。

4.1.3 氣候條件 細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病均屬于溫暖高濕型病害，溫度25 ℃左右、濕度90%以上時(shí)容易導(dǎo)致這兩種病害的流行（李煥玲 等，2011；王瑩瑩 等，2015）。新疆的氣候?qū)儆跍貛Т箨懶詺夂颍磕甑?～8月是新疆氣溫最高、降雨量最多的時(shí)期，氣候條件適宜，非常有利于細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病的流行。

4.1.4 田間管理 種植密度過大、地勢(shì)低洼、大水漫灌、排水不良等都容易導(dǎo)致田間濕度過大而引起病害流行；偏施氮肥、不及時(shí)拔除發(fā)病植株、隨意堆放病殘?bào)w等都給病原菌的侵入提供了機(jī)會(huì)。

4.2 傳播方式

4.2.1 帶菌種子、種苗調(diào)運(yùn) 帶菌種子與種苗遠(yuǎn)距離調(diào)運(yùn)是病原菌遠(yuǎn)距離傳播的重要原因。檢驗(yàn)檢疫部門對(duì)種子檢驗(yàn)不及時(shí)、檢驗(yàn)檢疫方法不規(guī)范都會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌傳播到新的無病田塊。帶有細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌的種子播種到土壤中，番茄幼苗期即可發(fā)病而造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。

4.2.2 風(fēng)雨傳播 種植密度過大，并伴有大風(fēng)天氣會(huì)導(dǎo)致番茄枝葉不停的摩擦而造成傷口，細(xì)菌可由傷口侵入；若同時(shí)遇上降雨天氣，田間濕度過大，發(fā)病部位會(huì)溢出菌膿，菌膿會(huì)隨著雨水飛濺而近距離傳播。

4.2.3 農(nóng)事操作 噴灌、大水漫灌可將空氣及土壤中的病原菌傳播到健康的番茄植株上，條件適宜即可造成病害流行；農(nóng)事人員頻頻接觸發(fā)病植株、拔除發(fā)病植株后不經(jīng)消毒再直接接觸健康植株均可造成病原菌的近距離傳播。

4.2.4 昆蟲 昆蟲取食染病果實(shí)或葉片后，病原菌會(huì)粘附在口器上，昆蟲再次取食健康植株時(shí)即可傳播病原菌（Bashan，1986）。

5 防治建議

番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病均為細(xì)菌性病害，病原菌主要經(jīng)番茄植株的傷口或氣孔侵入，通過雨水、種子、農(nóng)事操作等傳播。因此，在進(jìn)行防治時(shí)應(yīng)綜合分析病害發(fā)生的原因，做到預(yù)防為主，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)應(yīng)結(jié)合多種方法進(jìn)行防治。

5.1 加強(qiáng)檢疫 番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌皆為我國(guó)檢疫性細(xì)菌，且都可以通過種子進(jìn)行遠(yuǎn)距離傳播，因此需要制定嚴(yán)格的檢疫措施，對(duì)進(jìn)入菜區(qū)的所有種子進(jìn)行多種方法檢測(cè)，防止帶菌種子進(jìn)入非疫區(qū)。

5.2 選育抗病品種 選用抗病品種是防控植物病害最經(jīng)濟(jì)、有效、省時(shí)省力的措施。在細(xì)菌性斑點(diǎn)病與潰瘍病嚴(yán)重發(fā)生的地區(qū)應(yīng)大力推廣抗病品種。目前國(guó)外學(xué)者已經(jīng)篩選出了部分抗細(xì)菌性斑點(diǎn)病的品種，如Ontario 7710、PI 126430等（Pilowsky &Zutra，1986），此外還有細(xì)葉番茄1126430、多毛番茄等抗病品種。對(duì)于細(xì)菌性潰瘍病，目前國(guó)內(nèi)外還沒有發(fā)現(xiàn)具有商業(yè)價(jià)值的抗病品種，僅發(fā)現(xiàn)部分中度抗性材料，如Lycopersicon pimpnellifolium（L.）Mill.、L. peruvianum（L.）Mill.以 及 L. hirsutum Hum & Bonpl（Gleason et al.，1993）。

5.3 種子處理 用55 ℃溫湯浸種25 min（分），或用1.05%次氯酸鈉溶液浸種20～30 min（分）（Blancard，2012），清水沖洗后晾干催芽，可有效減少種子上的細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌數(shù)量（Louws et al.，2001）。用5%的鹽酸溶液浸泡種子5～10 h （小時(shí)）可有效殺死種子表面和內(nèi)部的潰瘍病菌（李明遠(yuǎn)和柯常取，1991）。另外，可以將成熟的疑似帶有潰瘍病的果實(shí)打碎后放在1個(gè)容器內(nèi)，不要加水，使種子完全淹沒于發(fā)酵液中并密封容器，使其在21℃條件下發(fā)酵4 d（天），發(fā)酵完畢后立即取出種子洗凈，晾干備用，該方法可殺死種子表面全部以及種子內(nèi)部大部分的潰瘍病菌（馮蘭香，1992）。需要注意的是，發(fā)酵時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則易降低種子的萌發(fā)率（León et al.，2011）。

5.4 苗床處理 細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌與潰瘍病菌可在土壤和病殘?bào)w中存活很長(zhǎng)時(shí)間，一旦條件適宜就會(huì)侵染番茄。因此最好選擇新苗床或者選用消毒的育苗基質(zhì)進(jìn)行育苗。若使用舊苗床，需每平方米苗床噴灑30 mL濃度為40%的甲醛溶液，覆膜4～5 d（天）后揭膜，晾15 d（天）后再播種。

5.5 農(nóng)業(yè)防治 加強(qiáng)田間管理：不宜過度密植；生長(zhǎng)前期穩(wěn)施氮肥，避免營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)過旺不利于通風(fēng)排濕。發(fā)病初期及時(shí)摘除病葉并帶出田園燒毀或深埋；避免過多人員進(jìn)出田園損傷枝葉，為病原菌的侵入提供機(jī)會(huì)；盡量采用滴灌技術(shù)，避免大水漫灌，以防田間濕度過大。

合理輪作：發(fā)病較重的田塊與非茄科作物實(shí)行2 a（年）以上的輪作（Cuppels & Elmhirst，1999），可有效減少病原基數(shù)。

5.6 藥劑防治 番茄潰瘍病屬于系統(tǒng)性侵染病害，一旦植株出現(xiàn)明顯的癥狀后再施藥，效果會(huì)很不理想。因此，從選種、播種以及育苗時(shí)就應(yīng)開始做好預(yù)防工作，及時(shí)對(duì)種子和苗床進(jìn)行滅菌消毒處理。苗期發(fā)現(xiàn)病株時(shí)應(yīng)立即拔除，燒毀或深埋。番茄成株期，發(fā)病初期可選擇37.5%氫氧化銅懸浮劑800倍液，或3%中生菌素可濕性粉劑600倍液，或2%春雷霉素水劑300倍液，或20%噻菌銅懸浮劑700倍液噴霧防治。細(xì)菌性斑點(diǎn)病發(fā)病初期可用2%春雷霉素水劑800倍液，或3%中生菌素可濕性粉劑800倍液，或77%氫氧化銅可濕性粉劑800倍液，或72%農(nóng)用硫酸鏈霉素可濕性粉劑3 000～4 000倍液噴霧防治。以上藥劑每隔7～10 d（天）噴施1次，直至控制病情。注意輪換使用不同種類的藥劑，以減緩抗藥性的產(chǎn)生。

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