丙型肝炎病毒抗體檢測(cè)聯(lián)合核酸檢測(cè)在血液篩查中的價(jià)值

黃耀東 彭云娟 魏麗華

丙型病毒性肝炎（丙肝）是一種常見(jiàn)的傳染性疾病，血液是傳播丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV）的主要途徑，該疾病初期具有隱匿性，隨著病情的逐漸發(fā)展，會(huì)對(duì)患者的身體造成不同程度的影響，早期診斷疾病對(duì)患者的健康十分重要［1-2］。本研究分析HCV抗體（HCV-Ab）檢測(cè)聯(lián)合核酸檢測(cè)用于丙肝血液篩查的價(jià)值，具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年1月—12月本院采集的3 925份血液標(biāo)本進(jìn)行研究，其中男性標(biāo)本2 368份，女性標(biāo)本1 557份；年齡19～45歲，平均（33.6±4.2）歲。

1.2 檢測(cè)方法 每位受試者留取4管血液標(biāo)本，使用分離膠促凝真空采血管用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)和丙氨酸轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）檢測(cè)；使用帶有分離膠乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）-K2抗凝真空采血管進(jìn)行核酸檢測(cè)。為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要詳細(xì)記錄每份樣品的編碼信息。采集標(biāo)本后，于2 h內(nèi)完成離心，2～8 ℃冰箱保存樣本，24 h內(nèi)完成檢測(cè)。

HCV-Ab檢測(cè)和核酸檢測(cè)需要由專業(yè)醫(yī)師按照相關(guān)操作說(shuō)明書完成操作。計(jì)算臨界值（臨界值＝陰性對(duì)照孔A均值+0.12），陽(yáng)性對(duì)照孔A＞0.50或陰性對(duì)照孔A＞0.08時(shí)，表明檢測(cè)結(jié)果有效。若待檢測(cè)樣品A值在臨界值以下，表明HCV-Ab為陰性，針對(duì)陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果需要重新進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)比聯(lián)合檢測(cè)和分別單獨(dú)檢測(cè)所得到的陽(yáng)性檢出率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

單獨(dú)進(jìn)行HCV-Ab檢測(cè)結(jié)果顯示陽(yáng)性2例，不確定1例。單獨(dú)進(jìn)行核酸檢測(cè)未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果，抗體篩查后的陰性標(biāo)本經(jīng)核酸檢測(cè)未見(jiàn)陽(yáng)性結(jié)果。而HCV-Ab檢測(cè)聯(lián)合核酸檢測(cè)結(jié)果顯示，3 925份血液標(biāo)本中，有9例呈現(xiàn)陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為0.23%。可見(jiàn)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率明顯高于單獨(dú)進(jìn)行HCV-Ab檢測(cè)和核酸檢測(cè)（均P＜0.05）。

3 討論

HCV-Ab是由HCV感染引起的病毒性肝炎，輸血、針刺、吸毒均為傳播丙肝的重要途徑，該疾病會(huì)導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化，部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞癌。相關(guān)調(diào)查結(jié)果顯示，目前丙肝在全球的感染率為3%左右，且未來(lái)發(fā)病率可能會(huì)繼續(xù)上升，成為十分嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題［3-4］。從源頭上預(yù)防病毒的傳播和擴(kuò)散，對(duì)于控制疾病和降低發(fā)病率具有十分重要的意義。

HCV-Ab檢測(cè)從20世紀(jì)80年代至今一直不斷發(fā)展，臨床顯示其敏感性和特異性在不斷提高。HCV-Ab檢測(cè)可以應(yīng)用不同的方法，比如化學(xué)發(fā)光法、免疫層析法、ELISA法等，其中ELISA法被應(yīng)用的頻率最高，該項(xiàng)技術(shù)是一種固相酶免疫監(jiān)測(cè)技術(shù)，固相載體包裹已知的抗體或抗原［5-6］，與待檢樣品中的抗原或抗體反應(yīng)，將酶標(biāo)記抗體或抗原加入后，結(jié)合免疫復(fù)合物，加入酶后顯色，根據(jù)所顯示的顏色或測(cè)出的吸光度（A）值，行定性分析或定量分析。ELISA法應(yīng)用廣泛，但有研究顯示，目前該項(xiàng)檢測(cè)的試劑盒存在差異，因而針對(duì)同一份血液樣本，有時(shí)可能會(huì)得到不同的結(jié)果。所以在實(shí)際的監(jiān)測(cè)過(guò)程中，一般會(huì)選擇不同廠家生產(chǎn)的兩種試劑進(jìn)行檢測(cè)，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。另外，HCV-Ab的轉(zhuǎn)陽(yáng)窗口期比較長(zhǎng)，一般超出2個(gè)月，部分患者甚至在6個(gè)月左右。由于部分患者所處感染期不同，HCV-Ab檢測(cè)中可能會(huì)得到陰性的結(jié)果，因而抗體檢測(cè)具有較高的漏檢率［7-8］。以往研究顯示，HCV-Ab有窗口期，抗體檢測(cè)試劑質(zhì)量不穩(wěn)定，少數(shù)患者不產(chǎn)生抗體，這些因素都會(huì)對(duì)抗體檢測(cè)的結(jié)果產(chǎn)生影響，無(wú)法完全篩查出陽(yáng)性感染者。

核酸檢測(cè)能夠反映HCV在患者體內(nèi)的傳染程度和復(fù)制過(guò)程，相較于HCV-Ab檢測(cè)，核酸檢測(cè)能夠在較短的時(shí)間內(nèi)得出患者是否感染的結(jié)果，一般感染2周左右就可顯示為陽(yáng)性。臨床研究認(rèn)為，定量或定性聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）檢測(cè)具有較高的靈敏性和特異性，但是這種檢測(cè)方法過(guò)程比較復(fù)雜，檢測(cè)價(jià)格比較高，因此一般首先為患者進(jìn)行抗體檢測(cè)［9-10］。如果患者經(jīng)過(guò)HCV-Ab檢測(cè)結(jié)果顯示結(jié)果為陽(yáng)性，則不需要再進(jìn)行核酸檢測(cè)；而對(duì)于檢測(cè)結(jié)果陰性的患者，有必要進(jìn)行核酸檢測(cè)。HCV-Ab檢測(cè)聯(lián)合核酸檢測(cè)，能夠有效改善HCV-Ab檢測(cè)轉(zhuǎn)陽(yáng)前窗口期較長(zhǎng)的問(wèn)題，二者的優(yōu)勢(shì)能夠得到最大程度的發(fā)揮，缺陷也能夠被有效的規(guī)避，縮短了窗口期，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性［11-12］。

出現(xiàn)HCV檢測(cè)陽(yáng)性但是核酸檢測(cè)低于下限值的情況，可能是因?yàn)檠褐写嬖陬愶L(fēng)濕因素或高濃度非特異性免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）在包被抗原或固相載體中吸附，也可能與HCV抗原（HCV-Ag）不純、樣本中存在超氧化物歧化酶有關(guān)。本研究中，聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出結(jié)果明顯高于單純進(jìn)行HCV-Ab檢測(cè)或核酸檢測(cè)的結(jié)果，這與相關(guān)文獻(xiàn)中的研究結(jié)果［13-14］一致，說(shuō)明了聯(lián)合檢測(cè)的必要性和可行性。將這兩種檢測(cè)方法相互結(jié)合，能夠更加清晰地反映患者血液異常的情況，進(jìn)一步提高丙肝的檢出率，盡量避免漏檢的情況，對(duì)保證血液的安全性以及患者本身的早期治療均具有重要的意義。

綜上所述，在丙肝血液篩查中應(yīng)用HCV-Ab檢測(cè)與核酸檢測(cè)聯(lián)合的方法，其效果好于單純進(jìn)行HCV-Ab檢測(cè)，能夠更好地提示相關(guān)疾病的感染情況，預(yù)防疾病的進(jìn)一步傳播，保證血液的安全性。

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