胡冰紅
血小板在體內主要參與止血與血栓形成,有著非常重要的生理功能,血小板計數(shù)的結果是指導臨床診斷和治療血小板減少癥的重要指標。血小板檢查方便快捷,其動態(tài)變化能較準確、敏感地反映危重病患者的病情和預后,因此可作為臨床監(jiān)測的一個可靠指標[1]。各種原因導致的血小板假性減少如未被及時發(fā)現(xiàn),將會造成誤診誤治,同時加重患者的心理負擔和經(jīng)濟負擔,進而引起醫(yī)療糾紛。
血細胞分析儀測定血小板因具有快速、準確、重復性好的優(yōu)點而被廣泛應用,但此方法也會出現(xiàn)血小板假性減少的情況。本文總結68例假性血小板減少的原因及解決辦法,現(xiàn)報告如下。
1.1 臨床資料 選擇2016年1月—2017年9月本院門診及住院的68例假性血小板減少患者,首次儀器檢測血小板計數(shù)<100×109/L。
1.2 實驗器材 采用美國貝克曼庫爾特LH750五分類血細胞分析儀,日本奧林巴斯顯微鏡,血細胞計數(shù)板,血小板草酸銨稀釋液以及貝索瑞-姬氏染液。
1.3 實驗方法 回顧性分析該68例假性血小板減少患者血細胞分析儀的血小板計數(shù)結果,查找檢測過程中出現(xiàn)的原因,進行糾正后復檢。復檢以血細胞分析儀檢測為主,結合涂片瑞-姬氏染色,油鏡下觀察血小板分布情況,并用血小板稀釋液于計數(shù)板進行血小板計數(shù)。觀察和記錄復檢結果,并進行統(tǒng)計學分析。
1.4 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件配對t檢驗處理,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
分析假性血小板減少患者首次儀器檢測結果與復檢結果,表明乙二胺四乙酸依賴性血小板假性減少癥(EDTA-dependent pseudo thrombocytopenia,EDTA-PTCP)、標本采集不暢以及大血小板為首檢血小板假性減少的重要原因,糾正前后結果比較均有顯著差異(均P<0.05),見表1。
表1 68例假性血小板減少患者血細胞分析儀首檢血小板計數(shù)結果與糾正后復檢結果的比較(±s)
原因 例數(shù)(例)糾正措施 血小板計數(shù)(×109/L) P值儀器計數(shù) 糾正后計數(shù)EDTA-PTCP 28更換抗凝劑 41±22 186±39 <0.05標本采集不暢 23 重新采集 63±19 182±32 <0.05大血小板 17 手工計數(shù) 72±14 122±24 <0.05
隨著科技的發(fā)展,全自動血細胞分析儀已廣泛應用于臨床實驗室大批量標本的全血細胞分析,國際血液標準化委員會(International Committee for Standardization in Hematology,ICSH)認可首選 EDTA作為全血細胞分析的抗凝劑[2]。然而,EDTA偶爾可引起血液中的血小板聚集,使血小板發(fā)生假性減少[3]。EDTA-PTCP是由于EDTA在抗凝血中可誘導血小板中的特殊蛋白,使血小板發(fā)生聚集,因而在全自動血細胞計數(shù)儀上檢測時,血小板計數(shù)發(fā)生了假性減少的現(xiàn)象[4]。因此,若進行血常規(guī)檢測時出現(xiàn)血小板顯著減少、儀器報警血小板聚集、直方圖異常等,而患者無瘀點或瘀斑等出血情況,應高度懷疑是EDTA-PTCP。此時需采用血涂片鏡檢觀察血小板的數(shù)量和形態(tài),尤其要注意片尾、邊緣是否有血小板聚集。同時請患者至檢驗科采血以縮短標本檢測時間,并更換抗凝劑重新檢測;若結果仍然無法糾正,則應采用手工稀釋計數(shù)法進行血小板計數(shù),以保證檢驗結果的準確性[5],協(xié)助臨床醫(yī)生對患者的疾病做出正確的診斷,防止誤診誤治情況的發(fā)生。
靜脈穿刺不順或未及時混勻時,會使血液產生凝塊,若凝塊細小而肉眼不易發(fā)現(xiàn),就會造成血小板假性減少[6],常見于新生兒、兒童、肥胖者、長期輸液的重癥患者等。對于此類標本,可與臨床醫(yī)生進行溝通,要求患者重新抽血或采末梢血重新進行檢測。
全血細胞分析儀電阻抗法計數(shù)血小板的閾值通常為2~24 fL,根據(jù)顆粒體積大小通過檢測小孔產生的脈沖進行區(qū)別和計數(shù)。血小板體積通常為2~20 fL,而在許多病理情況下,血小板體積的差異很大,甚至可達到30 fL以上,如腫瘤、急性心肌梗死、妊娠等可出現(xiàn)大血小板增多,但儀器會錯計為小紅細胞而導致血小板假性減少[7]。當自動血細胞分析儀采用阻抗法測定血小板異常時,可轉至網(wǎng)織紅細胞/血細胞計數(shù)通道,采用核酸熒光染色法測定[8]。由于血小板含有RNA,能夠被熒光染色;而成熟的紅細胞沒有RNA,不能被熒光染色。因此,根據(jù)熒光強度可以把血小板和小紅細胞以及其他雜質分開,這樣既可消除小紅細胞和碎片的影響,又可避免因遺漏大血小板而造成的假性結果。但核酸熒光染色法目前尚未完全普及,對于沒有核酸熒光染色法的儀器而言,簡單的方法還是手工顯微鏡計數(shù)和血涂片鏡檢。
血涂片法計數(shù)血小板能夠真實反映血小板的形態(tài),并可及早發(fā)現(xiàn)血小板數(shù)量的假性減少,再聯(lián)合應用手工顯微鏡計數(shù)法,是對血細胞分析儀計數(shù)血小板很好的補充,在發(fā)現(xiàn)和初步糾正假性血小板降低方面有明顯意義[9]。
綜上所述,當出現(xiàn)血小板計數(shù)的結果偏低、計數(shù)儀有報警提示或結果圖譜異常時,檢驗醫(yī)師應引起足夠重視,采取相應措施進行復檢,對檢測結果進行糾正,避免錯誤結果的出現(xiàn),以提高檢驗的準確性,為臨床醫(yī)師提供正確的檢驗報告,最大限度地維護患者的利益。
1 王洪霞,劉健,馬樹林,等.血小板水平在危重病臨床監(jiān)測中的意義[J].中華危重病急救醫(yī)學,2006,18(4):251.
2 劉成玉,羅春麗.臨床檢驗基礎[M]. 5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013.
3 朱海燕. EDTA-K2抗凝劑導致假性血小板減少的原因探討分析[J].淮海醫(yī)藥,2013,31(5):433-434.
4 劉雁. EDTA-K2致假性血小板減少4例分析[J].實用檢驗醫(yī)師雜志,2014,6(2):124-125,97.
5 白志瑤,孫繼芹,尹春瓊,等. EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝劑依賴性假性血小板減少2例分析[J].實用檢驗醫(yī)師雜志,2015,7(4):256-259.
6 李永紅,鐘步云.血細胞分析儀測血小板結果偏低的原因及糾正方法[J].臨床檢驗雜志,2001,19(2):112.
7 周小棉,鄒曉.假性血小板減少癥研究進展[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2007,30(9):1065-1068.
8 柳光芬.兩種血液分析儀血小板測定結果比較[J].重慶醫(yī)學,2009,38(16):2059-2060.
9 文進,夏存玉.顯微鏡法復核血細胞分析儀計數(shù)血小板的重要意義[J].實用檢驗醫(yī)師雜志,2013,5(3):191-192.