槐杞黃顆粒調(diào)節(jié)哮喘患兒體液免疫機(jī)理初探

劉爽 米繼強(qiáng) 王嘉欣 孫麗平(通訊作者)

130012長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院1

130117長春中醫(yī)藥大學(xué)2

哮喘是最常見的引起兒童慢性咳嗽的疾病之一，其發(fā)病率和病死率逐年上升，患病過程中細(xì)胞免疫缺陷及體液免疫功能紊亂等情況常出現(xiàn)[1]。近些年來，應(yīng)用中藥制劑槐杞黃顆粒對(duì)哮喘患兒進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)的報(bào)道屢見不鮮，現(xiàn)將其機(jī)理淺析如下。

支氣管哮喘患兒體液免疫的特點(diǎn)

免疫反應(yīng)作為變態(tài)反應(yīng)的基礎(chǔ)，其是機(jī)體保護(hù)自身的一種生理反應(yīng)。它對(duì)各種屬于非自身的具抗原性的物質(zhì)進(jìn)行識(shí)別、排除和消滅。此外，體內(nèi)衰老的細(xì)胞和突變的體細(xì)胞也將被視為非自身物質(zhì)予以消滅。參與免疫的主要細(xì)胞和各種因子如下：①淋巴細(xì)胞：參與免疫的免疫活性細(xì)胞主要是淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞主要分T細(xì)胞和B細(xì)胞。在血循環(huán)中的主要是T細(xì)胞，它們的壽命可長達(dá)數(shù)月、數(shù)年，甚至終生。在免疫反應(yīng)中T細(xì)胞處于中心地位，它不僅是免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)者，同時(shí)又作為免疫反應(yīng)的效應(yīng)物。根據(jù)細(xì)胞膜表面存在的分化抗原簇的差異T細(xì)胞又分為輔助性T細(xì)胞(Th)和細(xì)胞毒T細(xì)胞(TC)或抑制性T細(xì)胞(TS)，前者細(xì)胞表面特征性的分化抗原為CD4+，CD8+。在免疫反應(yīng)中，最重要的又是Th即CD4+T細(xì)胞。Th細(xì)胞在接受抗原刺激后分化為Th1和Th2細(xì)胞。Th1細(xì)胞主要涉及遲發(fā)超敏反應(yīng)，也產(chǎn)生干擾素，一次激活外周的巨噬細(xì)胞，起到保護(hù)機(jī)體的作用。此外，激活的Th1細(xì)胞能夠幫助B細(xì)胞使免疫球蛋白轉(zhuǎn)為可溶性IgG類型，對(duì)抗細(xì)菌和病毒感染。Th2細(xì)胞誘導(dǎo)的途徑最終產(chǎn)生IgE。眾所周知，IgE促使變應(yīng)性炎癥的形成，因而，Th2細(xì)胞在引起哮喘的變應(yīng)性炎癥上起了重要作用。②抗原呈遞細(xì)胞；③MHC；④單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)；⑤肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞；⑥EOS；⑦分化抗原簇(CD)：CD是存在于T細(xì)胞分化發(fā)育成熟的過程中不同階段的一組特異性表面標(biāo)志。如T細(xì)胞分化過程中其表面出現(xiàn)第1個(gè)特異性標(biāo)志即CD2，因此，有CD2的T細(xì)胞還很不成熟。而出現(xiàn)于全部外周血T細(xì)胞表面和胸腺細(xì)胞的晚期的是CD3，成熟的胸腺細(xì)胞和T細(xì)胞還表達(dá)CD3或CD8；⑧T細(xì)胞受體；⑨細(xì)胞因子；⑩黏附分子：當(dāng)哮喘發(fā)生時(shí)，氣道就會(huì)聚集許多炎癥細(xì)胞。這些炎癥細(xì)胞能從血管內(nèi)移行到變應(yīng)性炎癥部位，附著于白細(xì)胞、內(nèi)皮、血管外基質(zhì)和上皮細(xì)胞的各種AM起了重要作用，而且它們決定了炎癥細(xì)胞移行的方向；a.補(bǔ)體：為9種血清球蛋白組成的一組蛋白質(zhì)，只有依次被激活后才能表現(xiàn)出生物活性。b.Ig：當(dāng)B細(xì)胞接受抗原的雙信號(hào)刺激后，增殖分化為漿細(xì)胞，分泌針對(duì)該抗原的不同類別的具有抗體活性的蛋白質(zhì)參與體液免疫。Ig約占血清蛋白質(zhì)的20%。分IgA、IgG、IgM、IgD和IgE。前4類抗體與抗原結(jié)合后能產(chǎn)生沉淀，故稱為中和抗體或沉淀抗體。IgE為親細(xì)胞抗體，是引起Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的罪魁禍?zhǔn)??？乖妥儜?yīng)原抗原：變應(yīng)原是引起Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的抗原性物質(zhì)。c.特應(yīng)性和特應(yīng)性疾病。

槐杞黃顆粒藥理淺析

槐杞黃顆粒由3種藥組成，分別為槐耳菌質(zhì)、枸杞子、黃精?；倍|(zhì)經(jīng)熱水對(duì)清膏進(jìn)行提取，經(jīng)分析后發(fā)現(xiàn)其含有20余種礦質(zhì)元素、多糖及蛋白質(zhì)等多種有機(jī)成分，成分與子實(shí)體一致。多糖蛋白(PS-T)是其主要活性成分，它是雜多糖(由6種單糖組成)結(jié)合18種氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)?；倍甯唷⒍嗵悄芊浅ｏ@著地促進(jìn)細(xì)胞吞噬功能，可增強(qiáng)溶菌酶活性，增進(jìn)臍血EaRFC及GVHR，同時(shí)也可使特異性抗體產(chǎn)生及血清中血紅蛋白含量提高，促進(jìn)小鼠脾細(xì)胞DNA合成。復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院孫雯等人進(jìn)行了中藥槐耳對(duì)哮喘緩解期兒童外周血單個(gè)核細(xì)胞Th1/Th2平衡的基因及蛋白水平調(diào)節(jié)的研究。結(jié)論證明：槐耳菌質(zhì)能夠明顯增加IFN-γ及減少IL-4 mRNA的表達(dá)，可調(diào)節(jié)哮喘兒童緩解期IFN-γ/IL-4比值的失衡，平衡Thl/Th2比值的漂移。大量研究表明，一些疾病的病理機(jī)制由免疫異常所介導(dǎo)，如Sjgrens綜合征，其淋巴細(xì)胞及其亞群的功能發(fā)生異常變化，抗體水平亦出現(xiàn)明顯異常，多表現(xiàn)為外周血T細(xì)胞減少，尤其是抑制性T(Ts)細(xì)胞減少，輔助性T(Th)細(xì)胞相對(duì)增多，IgM和IgG水平升高，伴有抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)異常免疫反應(yīng)等。目前尚無合適藥物用于治療。相關(guān)研究依據(jù)上述疾病的免疫異常改變特點(diǎn)，采用正?；虍惓Ｃ庖叻磻?yīng)的病理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停w內(nèi)外研究相結(jié)合，較系統(tǒng)地觀察了槐杞黃顆粒對(duì)非特異性免疫、細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)的影響。結(jié)果表明，槐杞黃顆粒2個(gè)劑量組對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能有明顯的促進(jìn)作用，對(duì)機(jī)體免疫狀態(tài)的改善是非常有益的。相關(guān)研究表明，槐杞黃顆可明顯對(duì)抗Cy所致的DTh的異?；蚪档?，雙向調(diào)節(jié)作用明顯，其還可使異常改變的脾指數(shù)和胸腺指數(shù)明顯恢復(fù)，體外研究也表明，該藥3個(gè)劑量組均可使DTh小鼠異常的T淋巴細(xì)胞增殖功能獲得明顯恢復(fù)，這可能是其免疫調(diào)節(jié)作用得以發(fā)揮的一個(gè)重要機(jī)制。這一結(jié)果表明槐杞黃顆粒對(duì)控制自身抗體形成可能具有一定的作用。

槐杞黃顆粒調(diào)節(jié)哮喘患兒體液免疫的機(jī)理初探

中醫(yī)認(rèn)為槐耳菌質(zhì)、枸杞子、黃精三藥相合，既益氣，又滋陰，槐耳偏于益氣，黃精氣陰并補(bǔ)，枸杞子偏于滋陰，配伍在一方之中，養(yǎng)陰而不過于滋膩，補(bǔ)氣而不致滯氣，藥均和平，平補(bǔ)氣陰，平中寓奇。三藥歸經(jīng)于心、肝、脾、肺、腎五臟，心主血、肺主氣，肝藏血而主疏泄，脾主運(yùn)化，為后天之本，腎藏精、氣，為先天之本。本方入五臟，臟腑相關(guān)，益五臟之精氣，滋臟腑之陰津，藥味雖不多，而對(duì)整體之虛弱具有照顧全面、強(qiáng)壯補(bǔ)養(yǎng)之功效。吳振起等對(duì)緩解期CVA患者采用槐杞黃顆粒進(jìn)行治療，臨床有效率達(dá)92.05%，其中含有槐耳、黃精、枸杞子，三藥合用，滋臟腑陰津，平補(bǔ)氣陰，益五臟精氣，研究證明基礎(chǔ)治療配合槐杞黃顆?？诜筛纳苹颊叩拿庖吖δ躘2]。李濟(jì)金等人對(duì)槐杞黃顆粒對(duì)兒童支氣管哮喘患者T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)的影響進(jìn)行了相關(guān)研究，結(jié)果表明槐杞黃顆粒是很高的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，可增強(qiáng)肺部抗炎作用，能促進(jìn)患兒T淋巴細(xì)胞分裂增殖、成熟分化，修復(fù)Th1/Th2平衡，提高患兒外周血T淋巴細(xì)胞亞群含量，對(duì)兒童支氣管哮喘患者療效顯著。孫海平等人對(duì)槐杞黃顆粒對(duì)毛細(xì)支氣管炎后哮喘的預(yù)防作用進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)槐杞黃顆粒能使毛細(xì)支氣管炎后哮喘發(fā)病率降低，以下是可能原因：①Th1/Th2紊亂可能在毛細(xì)支氣管炎患兒中存在，而槐杞黃顆粒中由槐耳菌絲經(jīng)固體發(fā)酵產(chǎn)生的新真菌類藥物的槐耳菌質(zhì)，其含多種礦物質(zhì)元素，主要成分槐耳菌質(zhì)多糖(PS-T)是一種雜多糖，由6種單糖組成，結(jié)合18種氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)。PST是一種生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，具有很高的活性[3]，與中藥黃精共同作用，對(duì)患兒T淋巴細(xì)胞分裂增殖、成熟分化有促進(jìn)作用，對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的諸多環(huán)節(jié)都有激發(fā)作用，從而糾正毛細(xì)支氣管炎患兒Th1/Th2平衡紊亂，使其得以恢復(fù)。②中醫(yī)藥研究顯示枸杞多糖(LBP)作為枸杞子中的主要功效成分，其有多種作用，如增加免疫功能、抗氧化。LBP通過多種方式對(duì)免疫調(diào)節(jié)功能產(chǎn)生一定影響，一方面它增加人類外周血單核細(xì)胞中TNF-α和IL-2等細(xì)胞因子的表達(dá)，mRNA和蛋白水平都受到LBP劑量的影響，有一定的相關(guān)性[4]；另一方面LBP可刺激脾T細(xì)胞增殖，機(jī)制如下：誘導(dǎo)IL-2和IFN-γ基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)，蛋白1(AP-1)和轉(zhuǎn)錄因子活化T細(xì)胞核因子(NFAT)的激活，促進(jìn)CD25的表達(dá)，從而增強(qiáng)免疫功能[5]，對(duì)毛細(xì)支氣管炎后哮喘起到預(yù)防作用。

為了探討槐杞黃顆粒對(duì)免疫功能的影響，有研究試驗(yàn)采用動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，在整體、器官和細(xì)胞水平上研究了該藥的免疫調(diào)節(jié)作用。所采用的劑量由臨床擬用劑量折算而得，陽性對(duì)照藥選用具有免疫調(diào)節(jié)作用的黃芪精口服液。研究結(jié)果表明，槐杞黃顆粒不僅可明顯提高巨噬細(xì)胞吞噬功能，而且對(duì)環(huán)磷酰胺所致增高或低下的細(xì)胞和體液免疫異常改變均有明顯調(diào)節(jié)作用，并能使T、B淋巴細(xì)胞增殖能力和IgM、IgG含量維持近正常水平。中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院的李紅梅等人進(jìn)行了槐杞黃對(duì)哮喘大鼠Th1/Th2/Th1細(xì)胞因子及肺泡巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響的研究。研究結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組相比，哮喘組血清和BALF中IFN-γ降低，IL-17、IL-4升高，采用布地奈德干預(yù)后IL-4和IL-17明顯降低，IFN-γ明顯升高，提示對(duì)哮喘大鼠的Th1/Th2/Th17失衡吸入性糖皮質(zhì)激素能夠起到明顯改善作用；IFN-γ水平在采用槐杞黃干預(yù)后顯著升高。布地奈德聯(lián)用槐杞黃干預(yù)后IL-17降低、IFN-γ水平升高，均比單用布地奈德效果明顯。提示槐杞黃有提高IFN-γ表達(dá)、使哮喘大鼠Th1細(xì)胞功能增強(qiáng)的作用，與糖皮質(zhì)激素有協(xié)同作用?；辫近S不僅能明顯提高肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬能力，且有明顯提高哮喘大鼠IFN-γ表達(dá)的功效；聯(lián)合應(yīng)用槐杞黃輔佐吸入性糖皮質(zhì)激素對(duì)哮喘進(jìn)行治療，不僅能夠增強(qiáng)肺泡巨噬細(xì)胞吞噬能力，還能對(duì)吸入性糖皮質(zhì)激素糾正哮喘大鼠Th1/Th2/Th17失衡起到顯著提高的作用。

綜上所述，槐杞黃顆粒不僅對(duì)非特異性免疫功能有促進(jìn)租用，對(duì)異常改變的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)有明顯調(diào)節(jié)作用。在臨床中，槐杞黃顆?？梢杂糜谡{(diào)節(jié)哮喘患兒的體液免疫功能。