于振洋, 宋春陽(yáng), 楊文嬌, 何貝貝, 姜建陽(yáng)
(青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,山東青島266109)
近年來(lái),隨著對(duì)日糧纖維理化特性和營(yíng)養(yǎng)生理作用的深入研究,發(fā)現(xiàn)其在增強(qiáng)豬的健康和維持胃腸道的微生態(tài)平衡方面具有重要的作用(楊玉芬,2000;王浩等,1994)。 研究表明,添加適當(dāng)含量的纖維能夠提高豬的生產(chǎn)性能 (鄭會(huì)超等,2007;羅獻(xiàn)梅等,2000;袁森泉,1999)。目前,國(guó)內(nèi)外主要使用“粗纖維”評(píng)定日糧適宜纖維水平,但由于 “粗纖維”的測(cè)定方法不能準(zhǔn)確反映日糧纖維含量,不能滿(mǎn)足對(duì)于日糧纖維研究的需要,而酸性洗滌纖維(ADF)作為評(píng)定飼草中纖維類(lèi)物質(zhì)的指標(biāo)之一,逐漸成為一種趨勢(shì)(何忠武,2011)。氨基酸回腸消化率的測(cè)定能夠準(zhǔn)確反映動(dòng)物采食后日糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被機(jī)體消化吸收的狀況,是評(píng)定豬日糧中氨基酸利用率的重要指標(biāo)(Stein等,2007)。本試驗(yàn)以煙臺(tái)黑豬、魯農(nóng)2號(hào)生長(zhǎng)豬為研究對(duì)象,通過(guò)飼喂不同ADF水平的日糧,研究ADF水平對(duì)其氨基酸回腸表觀(guān)消化率的影響。
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 選取健康去勢(shì)、初始體重(45.02±0.7)kg的煙臺(tái)黑豬、魯農(nóng) 2號(hào)豬各 4頭,分別放入50 cm×150 cm可調(diào)鍍鋅代謝籠中,適應(yīng)7 d后對(duì)8頭試驗(yàn)豬的回腸末端安裝簡(jiǎn)單“T”型瘺管。手術(shù)前進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)處理,手術(shù)恢復(fù)期為20 d,術(shù)后7 d內(nèi)每頭豬每天早晚兩次注射頭孢類(lèi)消炎藥,用碘酒和酒精擦拭手術(shù)部位,氧化鋅軟膏涂抹刀口處,保持清潔,避免感染,依據(jù)外科手術(shù)常規(guī)護(hù)理方法進(jìn)行護(hù)理。每天仔細(xì)觀(guān)察豬只采食和健康狀況,并做好記錄,當(dāng)豬只完全恢復(fù)、采食正常并維持穩(wěn)定后,開(kāi)始試驗(yàn)。
1.2 瘺管設(shè)計(jì) 本試驗(yàn)采用的簡(jiǎn)單“T”型瘺管由北京大鴻恒業(yè)科技有限公司采用聚乙烯塑料材質(zhì)的圓棒加工而成。瘺管的凹槽寬25 mm、長(zhǎng)40 mm,圓管內(nèi)徑18 mm、壁厚3 mm、長(zhǎng)50 mm。將圓管用模刀加工成螺距為1 mm的螺紋,配以合適的墊圈、螺母和蓋子即可。
1.3 手術(shù)操作 試驗(yàn)豬手術(shù)前禁食24 h,禁水12 h,個(gè)體稱(chēng)重。麻醉劑采用YFM合劑(主要成分為鹽酸氯氨酮和咪唑安定),耳后注射進(jìn)行全身麻醉。麻醉后左側(cè)臥綁定于手術(shù)臺(tái)上,用手術(shù)刀對(duì)試驗(yàn)豬右腹側(cè)后半部剃毛、清潔,然后用碘酊和醫(yī)用酒精對(duì)手術(shù)部位進(jìn)行消毒處理,用0.25%普魯卡因在預(yù)定切口處進(jìn)行局部浸潤(rùn)麻醉。手術(shù)操作參考張英群(1993)的方法并加以改進(jìn)。手術(shù)后讓豬自然蘇醒并自由走動(dòng),以恢復(fù)腸管的正常蠕動(dòng),待豬恢復(fù)正常采食后放入代謝籠中。6~8 h后飼喂適量軟化飼料,逐漸轉(zhuǎn)入正常日糧。
1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理 本試驗(yàn)采用4×4拉丁方設(shè)計(jì),分為4個(gè)試驗(yàn)期。每期7 d,前6 d為預(yù)飼期,于第7天將封口袋用皮筋套在瘺管上,連續(xù)收集24 h的食糜。采集前,封口袋中加入濃度為10%的硫酸10 mL,以減少食糜中細(xì)菌的繁殖。時(shí)時(shí)觀(guān)察封口袋,經(jīng)常更換,采集的食糜立即放入-20℃冰箱中保存。每天分別于7:00和16:00等量飼喂,自由飲水。試驗(yàn)結(jié)束后,在室溫下自然溶化收集的食糜,將每頭豬收集的食糜混合均勻后用真空冷凍干燥機(jī)冷凍干燥,然后在室溫下回潮24 h,將樣品粉碎、過(guò)80目篩處理后備用。
1.5 試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)采用玉米-豆粕型日糧,在保持日糧其他養(yǎng)分基本一致的情況下,按照日糧ADF含量不同分為3.8%、4.8%、5.8%、6.8%四個(gè)處理組。日糧中添加三氧化二鉻作為外源指示劑。試驗(yàn)日糧氨基酸組成見(jiàn)表1,試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。
1.6 測(cè)定指標(biāo)及方法
1.6.1 日糧及食糜中氨基酸和鉻的測(cè)定 日糧和食糜中的16種氨基酸含量使用氨基酸自動(dòng)分析儀(日立L-8800,日本)進(jìn)行測(cè)定;日糧和食糜中的鉻含量采用干法消解后使用原子吸收光譜儀(日立Z-5000,日本)進(jìn)行測(cè)定。
表1 試驗(yàn)日糧氨基酸組成%
1.6.2 回腸末端氨基酸表觀(guān)消化率的測(cè)定 回腸末端氨基酸表觀(guān)消化率的計(jì)算公式如下:
式中:AD為養(yǎng)分的回腸末端氨基酸表觀(guān)消化率,%;[AA]digesta為食糜的氨基酸含量,mg/kg;[AA]diet為日糧中的氨基酸含量,mg/kg;[Cr]diet分別為日糧中的鉻含量,mg/kg DM;[Cr]digesta為食糜中的鉻含量,mg/kg DM。
1.7 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)處理采用SPSS 17.0軟件中的GLM模型對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行兩因子方差分析。模型包括主因子品種、ADF水平及二者的互作。品種內(nèi)進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA),并用LSD法進(jìn)行多重比較。
由表3可知,對(duì)于6.8%組,除煙臺(tái)黑豬的蛋氨酸、組氨酸以及魯農(nóng)2號(hào)豬的組氨酸表觀(guān)消化率顯著低于3.8%組(P<0.05)外,兩品種生長(zhǎng)豬必需氨基酸的回腸表觀(guān)消化率均極顯著低于3.8%組(P<0.01);除煙臺(tái)黑豬的甘氨酸、丙氨酸以及魯農(nóng)2號(hào)豬的丙氨酸表觀(guān)消化率顯著低于3.8%組(P<0.05)外,兩品種生長(zhǎng)豬非必需氨基酸的回腸表觀(guān)消化率均極顯著低于3.8%組(P<0.01)。對(duì)于5.8%組,除煙臺(tái)黑豬的蛋氨酸表觀(guān)消化率顯著低于3.8%組(P<0.05)外,兩品種生長(zhǎng)豬必需氨基酸的回腸表觀(guān)消化率均極顯著低于3.8%組(P<0.01);除煙臺(tái)黑豬的甘氨酸、丙氨酸以及魯農(nóng)2號(hào)豬的甘氨酸表觀(guān)消化率顯著低于3.8%組(P<0.05)外,兩品種生長(zhǎng)豬非必需氨基酸的回腸表觀(guān)消化率均極顯著低于3.8%組(P<0.01)。4.8%組與3.8%組各項(xiàng)氨基酸回腸表觀(guān)消化率差異不顯著(P>0.05)。兩品種豬蛋氨酸、纈氨酸、異亮氨酸的表觀(guān)消化率差異極顯著(P<0.01),賴(lài)氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、組氨酸、胱氨酸、絲氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的表觀(guān)消化率差異顯著(P<0.05),蘇氨酸、谷氨酸、天冬氨酸的表觀(guān)消化率差異不顯著(P>0.05),相同ADF水平日糧的煙臺(tái)黑生長(zhǎng)豬各氨基酸的回腸表觀(guān)消化率高于魯農(nóng)2號(hào)生長(zhǎng)豬;ADF水平除可顯著影響丙氨酸的表觀(guān)消化率(P<0.05)外,對(duì)其他氨基酸的表觀(guān)消化率均影響極顯著 (P<0.01);品種×ADF水平對(duì)氨基酸回腸表觀(guān)消化率影響均不顯著(P>0.05)?;貧w分析表明,兩品種生長(zhǎng)豬必需氨基酸和非必需氨基酸的回腸表觀(guān)消化率均與日糧ADF水平呈顯著線(xiàn)性負(fù)相關(guān)(P < 0.05)。
表2 試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
日糧纖維不僅可以影響飼料中外源性蛋白質(zhì)和氨基酸的消化,而且可以增加內(nèi)源蛋白質(zhì)和氨基酸的損失,從而顯著降低飼料中氨基酸的消化率。許多研究證實(shí),日糧中添加纖維性飼料可影響外源氨基酸、粗蛋白質(zhì)、淀粉、脂肪和礦物質(zhì)等物質(zhì)的養(yǎng)分消化率;增加回腸食糜中內(nèi)源蛋白質(zhì)和氨基酸的排出量(彭健和蔣思文,1995;Graham 等,1986)。
日糧纖維水平和種類(lèi)對(duì)動(dòng)物氨基酸代謝的影響已有研究,但報(bào)道的結(jié)果不一致。李鐵軍等(2004)以豌豆皮(水溶性 NSP)和純稻殼(非水溶性NSP)為纖維來(lái)源,研究不同類(lèi)型的纖維對(duì)豬氨基酸代謝的影響,結(jié)果表明,水溶性日糧纖維只是對(duì)豬回腸的內(nèi)源性氮和氨基酸的分泌、排泄有影響,而不影響回腸蛋白質(zhì)和賴(lài)氨酸的真消化率。王誠(chéng)等(1994)報(bào)道,日糧粗纖維水平對(duì)蛋氨酸和胱氨酸的表觀(guān)消化率無(wú)顯著影響(P>0.05),對(duì)其他必需氨基酸消化率的影響差異極顯著(P<0.01)。劉長(zhǎng)忠等(2008)研究不同日糧粗纖維水平 (3%、5%、7%、9%和11%)對(duì)鵝內(nèi)源氨基酸排泄量和氨基酸真消化率的影響,結(jié)果表明,隨粗纖維水平增加(3%~7%),鵝內(nèi)源氨基酸排泄量有升高的趨勢(shì),但差異不顯著,氨基酸真消化率較高且穩(wěn)定;隨著粗纖維水平的增加 (7%~11%),內(nèi)源氨基酸排泄量極顯著升高,氨基酸真消化率極顯著降低。Li等(1994)報(bào)道,日糧纖維對(duì)賴(lài)氨酸、蘇氨酸等15種氨基酸的回腸表觀(guān)消化率沒(méi)有顯著影響。其原因可能為較高的日糧纖維增加了小腸蠕動(dòng),減少了食糜與消化道接觸的時(shí)間,降低了必需氨基酸的消化率;較高的粗纖維水平,促進(jìn)了小腸對(duì)纖維的消化分解能力,影響或抑制了消化酶的活性。
表3 ADF水平對(duì)不同品種生長(zhǎng)豬回腸氨基酸表觀(guān)消化率的影響%
本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧ADF水平為3.8%~4.8%對(duì)兩品種豬氨基酸回腸表觀(guān)消化率的影響不明顯,為5.8%及以上時(shí)其則受到顯著或極顯著影響。豬的品種對(duì)蘇氨酸、谷氨酸、天冬氨酸表觀(guān)消化率的影響不顯著,對(duì)其他氨基酸表觀(guān)消化率均影響顯著或極顯著;ADF水平除顯著影響丙氨酸消化率外,對(duì)其他氨基酸消化率均影響極顯著;但二者的互作關(guān)系不明顯。本試驗(yàn)研究還發(fā)現(xiàn),日糧纖維對(duì)煙臺(tái)黑生長(zhǎng)豬的氨基酸回腸表觀(guān)消化率的影響弱于魯農(nóng)2號(hào)生長(zhǎng)豬,這表明地方品種配套系生長(zhǎng)豬的氨基酸回腸表觀(guān)消化率低于地方品種生長(zhǎng)豬。
4.1 兩品種豬的氨基酸回腸表觀(guān)消化率均與ADF水平呈顯著線(xiàn)性負(fù)相關(guān)。
4.2 日糧ADF水平為3.8%~4.8%對(duì)地方品種豬及其配套系氨基酸回腸表觀(guān)消化率影響不顯著,ADF水平為5.8%及以上時(shí)其則顯著或極顯著降低。
4.3 豬的品種對(duì)蘇氨酸、谷氨酸、天冬氨酸的消化率影響不顯著,對(duì)其他氨基酸消化率均影響顯著或極顯著,ADF水平除顯著影響丙氨酸的消化率外,對(duì)其他氨基酸消化率均影響極顯著,但二者的互作關(guān)系不明顯。
4.4 與煙臺(tái)黑豬相比,魯農(nóng)2號(hào)豬的氨基酸回腸表觀(guān)消化率降低更明顯。
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