殼寡糖防治茶赤星病研究

黃大野+向朝暉+周世位+王章偉+孟祥生+唐自光+汪敬之+向武斌+曾凡勇+曹春霞

摘要：為研究殼寡糖對(duì)茶赤星病（Pseudocercospora theae）田間防治效果和防御酶系的影響，采用100 μg/mL殼寡糖噴霧誘導(dǎo)茶樹(shù)3次。結(jié)果表明，與對(duì)照相比病情指數(shù)明顯降低，防效達(dá)到52.26%，防御酶超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性明顯提高。

關(guān)鍵詞：殼寡糖；防御酶系；茶赤星?。≒seudocercospora theae）

中圖分類號(hào)：S435.711 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2017）24-4791-02

茶赤星?。≒seudocercospora theae）是茶樹(shù)重要病害，喜低溫高濕，其最適發(fā)病空氣溫度為20 ℃、相對(duì)濕度80%以上，因高山地區(qū)溫度較低且多云霧，故較容易發(fā)病。發(fā)病主要在嫩葉和成葉上，嫩莖、葉柄上也有發(fā)生，引起嫩梢不生長(zhǎng)。病葉干制成的茶，味苦澀，導(dǎo)致茶葉產(chǎn)量和品質(zhì)明顯下降，嚴(yán)重影響茶葉的商品價(jià)值和茶農(nóng)的經(jīng)濟(jì)收入[1，2]。生產(chǎn)上通常采用吡唑醚菌酯或甲基硫菌靈等化學(xué)殺菌劑進(jìn)行防治?；瘜W(xué)殺菌劑的使用會(huì)造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響春茶品質(zhì)。

湖北高山地區(qū)春茶由于氣溫較低病蟲(chóng)害較少，同時(shí)為了保證春茶品質(zhì)，期間基本不施用化學(xué)農(nóng)藥。但近年來(lái)赤星病危害日益嚴(yán)重，對(duì)春茶生產(chǎn)造成嚴(yán)重?fù)p失，嚴(yán)重危及早春名優(yōu)茶的生產(chǎn)，生產(chǎn)上亟需安全有效的防治方法來(lái)控制赤星病造成的危害。殼寡糖是一種安全環(huán)保的新型寡糖類抗病誘導(dǎo)劑，由2～20個(gè)氨基葡萄糖通過(guò)β-1、4-糖苷鍵連接而成的低聚糖，它是一種有效的植物誘抗激發(fā)子，能激活植物自身免疫力，提高抗病性能，已在防治植物病害方面顯示出巨大的潛力[3]。本研究旨在確定殼寡糖對(duì)茶赤星病的田間防治效果及探索誘導(dǎo)抗性的機(jī)理，尋找一條防治春茶赤星病更為安全有效的方法，為湖北名優(yōu)茶安全生產(chǎn)提供保障。

1 材料與方法

1.1 材料

85%殼寡糖原藥，中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所；250 g/L吡唑醚菌酯乳油，巴斯夫植物保護(hù)有限公司。

1.2 方法

1.2.1 殼寡糖防治茶赤星病 試驗(yàn)地點(diǎn)位于恩施鶴峰縣鑫農(nóng)茶業(yè)有限公司茶園，海拔約1 000 m，土壤為黃壤土。試驗(yàn)共設(shè)置3個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)。隨機(jī)排列，每個(gè)小區(qū)面積20 m?，分別噴施殼寡糖、吡唑醚菌酯和清水。85%寡糖原藥用清水溶解至終濃度為100 μg/mL，提前進(jìn)行誘導(dǎo)，于2017年3月20日進(jìn)行噴霧誘導(dǎo)1次，每隔7 d誘導(dǎo)1次，共誘導(dǎo)3次。250 g/L吡唑醚菌酯乳油使用清水將有效成分溶解至1 000 μg/mL，于4月1日進(jìn)行噴霧處理，每隔7 d噴霧1次，共噴霧3次。于采收前5月5日進(jìn)行病害調(diào)查。每個(gè)小區(qū)5點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)調(diào)查20個(gè)葉片，統(tǒng)計(jì)病情指數(shù)，并計(jì)算防效。

茶赤星病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，無(wú)病；1級(jí)，病斑面積占整片葉面積的5%以下；3級(jí)，病斑面積占整片葉面積的6%～25%；5級(jí)，病斑面積占整片葉面積的26%～50%；7級(jí)，病斑面積占整片葉面積的51%～75%；9級(jí)，病斑面積占整片葉面積的76%以上。

1.2.2 殼寡糖對(duì)茶葉防御酶系的影響 田間對(duì)茶樹(shù)噴施100 μg/mL殼寡糖水溶液，每隔2 d噴霧1次，共噴施3次，對(duì)照噴施清水。在噴施殼寡糖2、4、6和8 d時(shí)取樣裝入錫箔袋中，超氧化物歧化酶（SOD）活性采用NBT（氮藍(lán)四唑）顯色法[4]測(cè)定，過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性按照Chen等[5]的方法測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

田間藥效試驗(yàn)結(jié)果（表1）表明，殼寡糖對(duì)茶赤星病具有良好的防治效果。經(jīng)過(guò)3次誘導(dǎo)后，與對(duì)照相比，病情指數(shù)明顯降低，防效達(dá)到50%以上，低于化學(xué)藥劑吡唑醚菌酯。

由圖1可知，經(jīng)過(guò)殼寡糖3次誘導(dǎo)后，與對(duì)照相比，抗病性相關(guān)的超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性均有不同程度的提升，均高于清水對(duì)照。殼寡糖誘導(dǎo)后防御酶活性總體上是先升高后降低，在2 d時(shí)取樣達(dá)到最大值，隨后下降。

3 小結(jié)與討論

有研究報(bào)道殼寡糖對(duì)由真菌、細(xì)菌和病毒引起的病害具有良好的防治效果[3]，本研究與其結(jié)果一致，并首次報(bào)道了殼寡糖對(duì)茶赤星病的誘導(dǎo)抗病性。

植物誘導(dǎo)抗性的產(chǎn)生通常與植物防御酶系PAL（苯丙氨酸解氨酶）、POD（過(guò)氧化物酶）、PPO（多酚氧化酶）等具有相關(guān)性，已成為寄主與病原互作過(guò)程中評(píng)價(jià)植物抗病性的重要生理指標(biāo)[6]。本研究經(jīng)過(guò)寡糖誘導(dǎo)后茶葉相關(guān)防御酶系活性明顯提高，表明其可能是防治茶赤星病的重要機(jī)制。

本研究結(jié)果表明，殼寡糖對(duì)茶赤星病田間具有一定的防治效果，其與枯草芽孢桿菌等生物殺菌劑混用是否具有協(xié)同增效作用值得進(jìn)一步研究，以期為茶葉赤星病的生物防治奠定基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 吳順章，林繼紅，林德鋒，等.氧化亞銅加過(guò)氧乙酸對(duì)茶赤星病菌室內(nèi)生物活性測(cè)定和田間藥效試驗(yàn)[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理，2008， 29（1）：21-23.

[2] 丁昭斌，邱躍聲.不同殺菌劑防治茶園赤星病效果研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012（3）：200，203.

[3] 王文霞，趙小明，杜昱光，等.寡糖生物防治應(yīng)用及機(jī)理研究進(jìn)展[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào)，2015，31（5）：757-769.

[4] 劉炳輝，董曉穎，李志軍，等.硬肉桃果實(shí)成熟前后幾種與果實(shí)軟化相關(guān)的生理指標(biāo)的變化[J].植物生理學(xué)通訊，2008，44（5）：887-890.

[5] CHEN Y F，ZHAN Y，ZHAO X M，et al. Functions of oligochitosan induced resistance and pathogenesis related protein kinase in tobacco mosaic virus proteins in tobacco[J].Plant Physiology & Biochemistry，2009，47（8）：724-731.

[6] 吳岳軒，曾富華，王榮臣.雜交稻對(duì)白葉枯病的誘導(dǎo)抗性與細(xì)胞內(nèi)防御酶系統(tǒng)關(guān)系的初步研究[J].植物病理學(xué)報(bào)，1996，26（2）：127-131.endprint