轉(zhuǎn)移因子在家禽疫病防控中的應(yīng)用

劉 霞 ， 董玉蘭 ， 黃迪海 ， 徐懷英 ， 盛曉丹 ，郭 卉 ， 張從敬 ， 秦春芝 ， 張?jiān)佥x ， 秦卓明,

(1.山東省健牧生物藥業(yè)有限公司 ， 山東濟(jì)南250100 ； 2. 濟(jì)南市動(dòng)物生物藥品工程技術(shù)研究中心 ， 山東濟(jì)南250100 ；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院 ， 北京海淀100193 ； 4.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所 ， 山東濟(jì)南250023)

轉(zhuǎn)移因子(Transfe Factor，TF)是動(dòng)物白細(xì)胞中具有免疫活性的T淋巴細(xì)胞所釋放的一類小分子可透析物質(zhì)。TF攜帶有致敏淋巴細(xì)胞的特異性免疫信息，在受者體內(nèi)能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋灾旅袅馨图?xì)胞，因此，它能夠特異地將供者的細(xì)胞免疫被動(dòng)地轉(zhuǎn)移到受者體內(nèi)，使受者獲得特異性細(xì)胞免疫功能，即轉(zhuǎn)移和擴(kuò)大細(xì)胞的免疫力[1-2]。TF是一種高效、環(huán)保、綠色、保健、無殘留而又安全的新型免疫增強(qiáng)劑，不僅可提高動(dòng)物對(duì)疾病的抵抗力，還廣泛應(yīng)用于人與動(dòng)物病毒病、細(xì)菌病、真菌病和寄生蟲病乃至腫瘤等疫病的預(yù)防和愈后治療，具有明顯的效果[3-5]。

1 轉(zhuǎn)移因子的功效

1.1 天然的免疫增強(qiáng)劑 TF作用迅速，對(duì)畜禽等動(dòng)物無不良反應(yīng)，由于其具有抗原特異性和非特異性雙重免疫功能，因此，是一種理想的新型動(dòng)物免疫增強(qiáng)制劑。

經(jīng)典的TF機(jī)理研究試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),TF具有傳遞特異性細(xì)胞免疫信息的功能，而抗原信息的刺激與動(dòng)物機(jī)體免疫功能的發(fā)揮有著直接的聯(lián)系。李相安等[6]研究發(fā)現(xiàn)，雞脾TF可顯著提高雛雞免疫器官脾臟和腔上囊的相對(duì)重量。黃建文等[7]試驗(yàn)表明，用雞傳染性喉支氣管炎滅活疫苗免疫雞的同時(shí)，肌肉注射TF，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率升高，這表明蛋雞的細(xì)胞免疫機(jī)能增強(qiáng)。

TF能促進(jìn)B細(xì)胞活性，提高抗體滴度，增強(qiáng)疫苗免疫效果。大量試驗(yàn)表明，轉(zhuǎn)移因子配合新城疫活疫苗使用，可以提高1～2個(gè)抗體滴度。2008年中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所進(jìn)行了轉(zhuǎn)移因子口服液對(duì)雞 ND疫苗免疫增強(qiáng)作用(抗體滴度)的驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果表明，轉(zhuǎn)移因子配合新城疫活疫苗使用，抗體滴度提高0.8～1.2。日穆德瑪?shù)萚8]用烏雞脾TF配合NDV疫苗免疫 ，不僅能提高抗體效價(jià)，而且第1次用疫苗免疫可使抗體提前出現(xiàn)較高的水平，并能維持較長(zhǎng)時(shí)間；用TF配合NDV疫苗可以減少1次疫苗免疫。趙雪梅等[9]報(bào)道，TF配合IBDV疫苗免疫后7 d AGP檢出率明顯升高，而傳統(tǒng)則需要14 d才能檢出。李富桂等[10-11]將高濃度雞TF按0.04 mL/只的量與濃縮IBDV細(xì)胞培養(yǎng)物混合，制成增效疫苗，ELISA血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明，增效疫苗試驗(yàn)組的OD值顯著高于對(duì)照組；制備10倍濃縮的雞脾TF，配合雞減蛋綜合征疫苗免疫，結(jié)果第8天開始，HI抗體效價(jià)明顯增加，試驗(yàn)組比對(duì)照組的抗體效價(jià)高1.7～2.7個(gè)滴度。

1.2 輔助治療家禽疫病 用于動(dòng)物疫病控制的特異性TF開發(fā)已引起國(guó)內(nèi)外的重視，Wilson等[12-13]用NDV疫苗、傳染性喉氣管炎病毒強(qiáng)毒株及疫苗等疫苗免疫奶牛，由初乳及牛乳制備病毒特異性TF取得成功。日本生物保健公司采用引起雞主要傳染病的細(xì)菌、病毒抗原免疫奶牛，由初乳制備特異性TF，用于防治雞葡萄球菌、鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、沙門菌、副嗜血桿菌、支原體、NDV、IBV、IBDV等病原體感染引起的疾病，效果良好，產(chǎn)品早已投放市場(chǎng)應(yīng)用。國(guó)內(nèi)禽病研究者和本項(xiàng)目組利用TF在多種禽病的治療方面進(jìn)行了針對(duì)性研究(詳見第二部分)。

1.3 增強(qiáng)家禽機(jī)體抵抗力，抗應(yīng)激和預(yù)防疾病發(fā)生 在養(yǎng)殖生產(chǎn)中的某些關(guān)鍵時(shí)期，容易發(fā)生疾病，此時(shí)，可應(yīng)用TF緩解應(yīng)激，降低疫病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。如雛雞免疫器官尚未發(fā)育良好，應(yīng)用TF可改善機(jī)體免疫功能，提高抗病力和存活率。雛雞進(jìn)入雞舍后，TF每瓶 800～ 1 000只雞飲水，每天1次，連用3次。20日齡ND疫苗二免時(shí)配合TF(第1次配合疫苗免疫，第2次單飲)，可有效避免免疫誘發(fā)呼吸道病和免疫空白期所造成的免疫力下降。此外，對(duì)于4～5周齡的商品肉雞來說，往往是疾病的高發(fā)期，雞群一旦發(fā)病就會(huì)給雞群造成很大的損失。大量的試驗(yàn)證明，在4～5周齡前后(30～35日齡期間)，連續(xù)使用 2～3天TF(每瓶200～300只的用量連用2～3 d)，可有效避免中期危機(jī)，防止死亡尖峰帶來的損失，保證雞群42 d正常出欄。這一點(diǎn)在臨床上效果明顯。

種雞在開產(chǎn)前和產(chǎn)蛋高峰應(yīng)用TF效果良好，當(dāng)產(chǎn)蛋率從50%至高峰期間，每周TF飲水2次，可有效緩解因種雞產(chǎn)蛋所帶來的應(yīng)激，對(duì)于維護(hù)產(chǎn)蛋高峰和時(shí)間十分重要。

1.4 用于免疫功能低下(障礙)或免疫抑制病的治療 免疫抑制是由于免疫系統(tǒng)受到損害，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)抗原的應(yīng)答能力下降，對(duì)疾病的敏感性增強(qiáng)的一種免疫異常狀態(tài)。TF能刺激機(jī)體淋巴細(xì)胞活性，治療免疫抑制性疾病，解除免疫耐受性。TF作為免疫激活劑進(jìn)入機(jī)體后、可使造血系統(tǒng)在短期內(nèi)產(chǎn)生大量的白細(xì)胞；同時(shí)活化淋巴細(xì)胞，增加T輔助細(xì)胞產(chǎn)生和釋放更多的淋巴因子，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂從而發(fā)揮抗放射、抗免疫抑制、增強(qiáng)免疫功能的作用。

2 轉(zhuǎn)移因子在家禽疾病防控中的具體應(yīng)用

2.1 雞新城疫

2.1.1 治療早期新城疫效果最佳 肉仔雞20日齡前發(fā)生的新城疫稱為“早期新城疫”。在臨床實(shí)踐中，最早的新城疫4～5 d，一般在10～12 d多發(fā)，14 d免疫后也常發(fā)生。早期新城疫發(fā)病特點(diǎn)：雛雞癱瘓、腸炎拉稀、死亡率偏高(一般的日死亡率在3‰～5‰)，按腸炎治療無效。剖檢可見腸道出血嚴(yán)重，內(nèi)容物無或少；腎臟輕微腫脹、出血；輸尿管有尿酸鹽沉積；偶爾也可見到腺胃出血，但出血不嚴(yán)重。使用轉(zhuǎn)移因子有立竿見影之效，死亡率迅速下降，采食量恢復(fù)明顯。使用方法是：先停水2～4 h，實(shí)驗(yàn)室用轉(zhuǎn)移因子(商品名：百渡清)按800只雞/瓶加入全天(24 h)雞群總飲水量1/6水中，2 h內(nèi)飲完，連用2～3 d。

2.1.2 中期控制新城疫效果明顯 肉仔雞21-35 d之間發(fā)生的ND一般稱為“中期新城疫”。臨床表現(xiàn)為：發(fā)育較好的雞首先死亡，但死亡率不高，一般不超過5‰；不增料，有的連續(xù)3～7 d不增料(該期間應(yīng)為增料明顯期，增長(zhǎng)很快)；有呼吸道癥狀。剖檢可見腸道漿膜(特別是十二指腸)有米粒大的出血斑，僅憑此點(diǎn)尚不可判定為非典型ND，其他病變還有：肝臟腫大，膽囊腫大、充盈，肺淤血，腺胃水腫、出血或糜爛。發(fā)現(xiàn)上述情況及時(shí)使用TF有很好的治療效果，使用方法和劑量同上。另外，為了解決ND免疫失敗問題，建議在7、14、21、30 d節(jié)點(diǎn)前后和疫苗一起或單獨(dú)(有時(shí)因H9存在不能免疫)使用TF，控制效果較好。

2.1.3 肉雞出欄前應(yīng)綜合防控 肉雞35 d至肉雞出欄(42 d)這段時(shí)間發(fā)生的新城疫稱為后期新城疫。臨床特點(diǎn)是多為新城疫繼發(fā)或混發(fā)，即與H9、大腸桿菌病、支原體等形成混合感染，應(yīng)綜合防控。臨床癥狀主要表現(xiàn)為：腸炎過料，癱雞增多，死亡率升高，一般在5‰以上。剖檢變化主要表現(xiàn)是：腺胃腫脹或糜爛，乳頭出血或消失，腸炎彌散性出血、腫脹，腎臟腫大、出血，無尿酸鹽沉積；肝臟腫大、出血，膽囊腫大充盈。如與H9混合感染或繼發(fā)大腸桿菌病，則死亡率更高(日死亡率可達(dá)1%以上)。使用方法：每天早晨先停水2～4 h，按200只雞1瓶百渡清加入全天飲水量的1/6水中2 h內(nèi)飲完；白天時(shí)間使用治療H9的中藥或大腸桿菌藥物，晚上可使用腎腫藥通腎，綜合治療即可取得明顯的效果。

2.1.4 預(yù)防蛋種雞開產(chǎn)前發(fā)生非典型新城疫 種雞在開產(chǎn)前和產(chǎn)蛋高峰很容易發(fā)生非典型性新城疫，利用TF預(yù)防效果良好。特別是當(dāng)產(chǎn)蛋率從50%至高峰期間，每周TF飲水2次，可有效緩解因種雞產(chǎn)蛋所帶來的應(yīng)激，對(duì)于維護(hù)蛋種雞產(chǎn)蛋高峰和時(shí)間十分重要。

2.2 傳染性囊病 韓書祥等[14]用TF治療4例共21 500只肉雞IBD，治愈率達(dá)92%。李富桂等[10]用TF對(duì)IBD治愈率為60%，卵黃抗體治療組存活率為80%，但對(duì)照組存活率僅為20%。治療方案：使用轉(zhuǎn)移因子每瓶600～800只雞飲水，每天1次，癥狀較輕者一般連用 2次，癥狀較重者一般連用3次，并配合抗病毒類中藥，為預(yù)防繼發(fā)大腸桿菌病，可配合抗生素治療。

2.3 雞傳染性喉氣管炎 藏廣田等[15]用豬非特異性TF治療雞傳染性喉氣管炎98例，治愈81例，治愈率達(dá)82.7%。周富榮等用豬脾臟TF預(yù)防雞傳染性喉氣管炎有一定作用(6/30)。

2.4 雞傳染性支氣管炎 在實(shí)驗(yàn)室對(duì)30 d的SPF雞進(jìn)行IBV攻毒，待臨床癥狀出現(xiàn)后，分別利用TF高劑量(1.0 mL/羽)、中劑量(0.5 mL/羽)、低劑量(0.25 mL/羽)、生理鹽水組(0.5 mL/羽，空白對(duì)照)和正常組(健康對(duì)照)各50只雞/組進(jìn)行治療。結(jié)果發(fā)現(xiàn),高劑量組、中劑量、低劑量和生理鹽水組的總有效率(從增重、死亡和臨床表現(xiàn)等判斷)分別為88%、84%、72%和34%，而正常組均正常。由此可見，TF對(duì)IBV發(fā)病具有一定的治療效果。

對(duì)腎型IBV治療：百渡清(TF商品名)，300羽/100 mL，集中2-3 h飲水，配合中藥甚美舒，第1天全天24 h飲用，第2天、第3天飲用12 h。效果：第2天，死亡下降，死亡的雞剖檢也見不到花斑腎，第3天基本控制住死亡。證實(shí)百渡清配合甚美舒對(duì)于IBV引起的腎臟腫脹、花斑腎有很好的治療效果。

臨床研究資料表明，利用TF治療IB病32 560例，治愈率達(dá)88.6%。此外，高峰等用TF治療IB，同時(shí)配合使用氧氟沙星等抗生素，每日1次，連用3～5 d，治療17 800只肉雞，治愈率達(dá)90%以上。

2.5 鴨黃病毒感染 黃迪海等[16]對(duì)28周齡感染鴨黃病毒的蛋種鴨經(jīng)臨床治療，其中“百渡寧(轉(zhuǎn)移因子)+中藥”試驗(yàn)組治療蛋鴨1萬羽，同時(shí)設(shè)立其他中藥治療組與空白對(duì)照組。33 d內(nèi)平均產(chǎn)蛋率恢復(fù)至最高產(chǎn)蛋率的97.1%，明顯優(yōu)于單純中藥組的90.8%、91.2%和空白組的60.5%。因此，用百渡清輔以抗病毒中藥對(duì)28周齡鴨黃病毒病，具有較好的治療效果。從而為雞脾轉(zhuǎn)移因子作為口服中藥應(yīng)用于臨床治療鴨黃病毒感染提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2.6 禽流感 對(duì)于該病不建議治療。但是，對(duì)于低致病性禽流感可采取對(duì)癥治療等一系列綜合措施，以減輕經(jīng)濟(jì)損失。當(dāng)家禽患有禽流感時(shí)，機(jī)體的免疫力在一定程度上受到了抑制，呼吸道上皮細(xì)胞纖毛運(yùn)動(dòng)和吞噬細(xì)胞功能下降，機(jī)體的抗病能力降低，極易受細(xì)菌性病原的攻擊而引起繼發(fā)性感染。因此，在禽流感等病的化療藥物控制中，必須注意抗病毒和抗菌的同時(shí)治療，還應(yīng)該使用免疫調(diào)節(jié)劑(轉(zhuǎn)移因子)，提高恢復(fù)機(jī)體的正常免疫調(diào)節(jié)機(jī)能。

確診禽流感后，使用TF每瓶600～800只雞飲水每天1次，癥狀較輕者一般連用2 d，癥狀較重者一般連用3～4 d，配合抗病毒類中藥如荊防敗毒散或雙黃連等。為防止繼發(fā)大腸桿菌病，應(yīng)配合抗生素預(yù)防治療。

2.7 小鵝瘟 張保華等[17]用TF治療自然發(fā)病前期小鵝瘟病例40只，治愈率75%，用高免抗血清治療治愈率60%；治療自然發(fā)病后期小鵝瘟病例46只，治愈率20%～40%，用高免抗血清治療，治愈率則為37.5%；對(duì)人工感染發(fā)病雛鵝的治愈率為70%。

2.8 大腸桿菌及其混合感染 實(shí)驗(yàn)室用百渡清配合欣復(fù)康治療大腸桿菌人工感染SPF發(fā)病雞120例，治愈率達(dá)到95.6%，對(duì)照組單用欣復(fù)康治愈率89.4%。用百渡清治療新大腸桿菌自然發(fā)病1 398例，治愈率達(dá)92.7%。

大腸桿菌與其他細(xì)菌、支原體或病毒混合感染的情況非常多見，多重病原的感染加重了發(fā)病嚴(yán)重程度，死亡率高，而且治療起來也非常困難，很多情況下連用7～8 d藥物都無濟(jì)于事。針對(duì)該現(xiàn)狀應(yīng)結(jié)合抗病毒藥物和大腸桿菌藥物，同時(shí)應(yīng)用2～3 d 轉(zhuǎn)移因子，治療效果非常明顯。

3 TF對(duì)家禽的促生長(zhǎng)作用

TF在促進(jìn)家禽機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育方面具有促進(jìn)作用。2015-2016年間，山東家禽所和健牧藥業(yè)研究團(tuán)隊(duì)在山東省的高青、濰坊、寧陽、昌邑四個(gè)地區(qū)共73 610只商品肉雞中分別進(jìn)行了TF促生長(zhǎng)試驗(yàn)。針對(duì)商品肉雞母源抗體降低規(guī)律以及疫病防控的關(guān)鍵點(diǎn)，確定了TF使用量和程序，即“132”程序(3次免疫，提前2天)，分別在6、7日齡添加量為1 000羽/瓶；13、14日齡添加量為800羽/瓶；20、21日齡添加量為800羽/瓶。王樹平等[18]對(duì)出欄時(shí)綜合比較發(fā)現(xiàn)，TF試驗(yàn)組與對(duì)照組相比具有明顯的促生長(zhǎng)和抗病作用，試驗(yàn)組(利用TF組)平均存活率為95.37%，最高為99.4%，對(duì)照組(非利用TF組)平均存活率為91.80%，二者比較存活率平均提高3.57%；試驗(yàn)組平均料肉比為1.58，而對(duì)照組為1.70，降低0.12；試驗(yàn)組出欄時(shí)平均毛體重為2.67 kg，對(duì)照組為2.57 kg，平均每只雞增重200 g，經(jīng)濟(jì)效益顯著。

4 展望

隨著規(guī)模化養(yǎng)殖的發(fā)展，人們?cè)絹碓蕉嗟囊蕾嚳股氐氖褂茫瑫r(shí)也暴露出了越來越多的問題，比如抗生素的藥物殘留問題，細(xì)菌的耐藥性問題，食品安全問題等。研究表明，TF作為一種可以整體提高機(jī)體免疫機(jī)能的制劑，其臨床效果已經(jīng)得到肯定，在防治動(dòng)物傳染病，增強(qiáng)機(jī)體免疫等方面效果確實(shí)可靠，而且TF應(yīng)用安全、作用迅速、效果顯著、無抗原性、無藥物殘留、無明顯毒副作用，是未來畜禽疾病防治的重要方向。