兜蘭新品種‘紅霞兜蘭’的選育

李冬梅 呂復(fù)兵 陳和明 趙超藝 劉小飛 朱根發(fā)

摘 要 ‘紅霞兜蘭是以‘帶葉兜蘭為母本、‘同色兜蘭為父本，通過(guò)人工授粉雜交育成的F1新品種，屬斑葉類，抗性強(qiáng)，花期3～5月，開(kāi)花期長(zhǎng)達(dá)50～60 d；花梗長(zhǎng)5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直徑10～12 cm，紫紅色具紫褐色斑點(diǎn)；中萼片寬卵形，長(zhǎng)3.5～4.3 cm，寬3.2～4.0 cm，紫紅色，邊緣具淡黃色暈和紫褐色斑點(diǎn)；合萼片寬卵形，稍小于中萼片，長(zhǎng)3.0～3.5 cm，寬2.5～3.0 cm，淡黃白色，具深淺不一的紫紅色斑點(diǎn)或斑塊；花瓣橢圓形，邊緣波狀具白色緣毛，長(zhǎng)5.0～5.5 cm，寬3.5～4.0 cm；唇瓣兜狀，長(zhǎng)3.5～4.5 cm，寬1.9～2.1 cm，黃褐色，具紫紅色斑點(diǎn)；退化雄蕊黃色，中心具紫褐色暈?；üｉL(zhǎng)度中等，避免了母本花梗過(guò)長(zhǎng)易倒伏和父本花梗過(guò)短貼著盆生長(zhǎng)的缺點(diǎn)，具有較好的觀賞價(jià)值，對(duì)兜蘭屬植物資源的種質(zhì)創(chuàng)新和保護(hù)具有重要意義。

關(guān)鍵詞 紅霞兜蘭 ；品種 ；選育

中圖分類號(hào) S682.31 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2018.10.008

Abstract Paphiopedilum variety 'Hongxia' was a new F1 of a hand pollinated Paphiopedilum crossed with P. hirsutissimum as female parent and P. concolor as male parent. The new variety has spotted leaves with high resistance. This variety flowers for 50～60 days from March to May. The pedicel is 5.5～7.8 cm long， and purple-brown with white pubescence. The variety has one or two flowers， 10～12 cm in diameter， with purple-red and purple-brown spots in the flower（s）. Dorsal sepal， broadly ovate， 3.5～4.3 cm long， 3.2～4.0 cm wide， purple-red with yellowish halo and purple-brown spots at the margin. Synsepal broadly ovate， slightly smaller than dorsal sepal， 3.0～3.5 cm long， 2.5～3.0 cm wide， yellowish white with dark purple spots or patches. Petals elliptic， margin wavy with white margin hairs， 5.0～5.5 cm long， 3.5～4.0 cm wide. Lip， deeply pouched， 3.5～4.5 cm long， 1.9～2.1 cm wide， yellowish-brown with purple-red spots. The staminode is yellow with purple-brown halo at the center. The pedicel is medium in length， which avoids the disadvantages of slope of long female pedicel and the attachment of short male pedicel to the basin. The new variety has good ornamental value， and has great influence on the innovation and protection of germplasm resources of the genus Paphiopedilum.

Keywords Paphiopedilum variety Hongxia ； variety ； breeding

兜蘭，是蘭科（Orchidaceae）兜蘭屬（Paphiopedilum）植物的統(tǒng)稱。其花期持久，花色艷麗，花型奇特，具有很高的觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1]。兜蘭主要分布于亞洲熱帶地區(qū)至太平洋一些島嶼，為陸生蘭，少數(shù)為附生蘭。中國(guó)是世界上兜蘭屬植物最豐富的國(guó)家之一[1]。由于人們對(duì)兜蘭野生資源的過(guò)度采挖，兜蘭已成為世界上最瀕危的植物物種之一，所有野生兜蘭種類均被列入《瀕危野生動(dòng)植物種國(guó)際貿(mào)易公約》附錄Ⅰ而被禁止貿(mào)易。兜蘭雜交育種對(duì)滿足市場(chǎng)需求和對(duì)野生兜蘭植物資源的保護(hù)具有重要意義[1-8]。

英國(guó)皇家園藝學(xué)會(huì)（Royal Horticultural Society，簡(jiǎn)稱RHS）是世界上權(quán)威的蘭花新品種登錄機(jī)構(gòu)，該機(jī)構(gòu)只登錄首次育成的蘭花屬間和種間雜交種。由于以‘帶葉兜蘭為母本和‘同色兜蘭為父本的雜交種之一Paph. Kamioka已于2007在RHS登記，本研究以‘帶葉兜蘭為母本和‘同色兜蘭為父本的雜交種將不能再在RHS網(wǎng)站登記。因此，本文僅對(duì)兜蘭新品種‘紅霞兜蘭的選育過(guò)程及栽培技術(shù)特點(diǎn)闡述。

1 材料與方法

1.1 材料

母本‘帶葉兜蘭（圖1），屬綠葉類，葉帶形或線形，花單朵，較大，直徑9～12 cm，紫褐色為主，花期4～5月，單株花期30～50 d，環(huán)境適應(yīng)性較強(qiáng)，抗逆性較強(qiáng)。

父本‘同色兜蘭（圖2），屬斑葉類，葉矩形至狹橢圓形，葉背面具極密集的紫點(diǎn)或完全紫色，花1～2朵，直徑5～7 cm，淡黃色或近黃色，具紫色細(xì)斑點(diǎn)，周年開(kāi)花，單株花期35～45 d，環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)。

1.2 方法

1.2.1 人工授粉

2014年4月中下旬，用滅菌牙簽采集父本的花粉授于母本的柱頭上，母本‘帶葉兜蘭在花朵盛開(kāi)7 d內(nèi)進(jìn)行人工授粉，授粉前先用剪刀剪去母本和父本的唇瓣，將‘同色兜蘭的花粉授于‘帶葉兜蘭的柱頭上。

1.2.2 雜交蒴果的保存

采集的蒴果裝于尼龍網(wǎng)袋中，保存于4℃冰箱5 d。

1.2.3 雜交蒴果的消毒

將4℃處理過(guò)的蒴果，在超凈工作臺(tái)上用棉球蘸取70%酒精擦拭蒴果表面晾干后，用0.1%升汞溶液消毒25 min，滅菌水沖洗4次。

1.2.4 無(wú)菌播種與原球莖誘導(dǎo)

用刀片切開(kāi)消毒的蒴果，將褐色粉末種子接種到種子萌發(fā)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～30℃，光照強(qiáng)度為2 000～2 300 lx，光照時(shí)間控制為14 h/d；所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基成分為1/6 MS、6-芐氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉膠粉9.5 g/L，pH 5.6。培養(yǎng)基滅菌條件為125℃，40 min。發(fā)芽率=（發(fā)芽的種子數(shù)/播種的種子數(shù)）×100%。

1.2.5 壯苗及生根培養(yǎng)

將原球莖及芽混合體接種在壯苗及生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為25～30℃，光照強(qiáng)度為2 000～2 300 lx，光照時(shí)間控制為14 h/d；所述的壯苗及生根培養(yǎng)基成分為1/6 MS、萘乙酸0.50 mg/L、椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、活性炭1.5 g/L、蔗糖30 g/L、卡拉膠粉8.5 g/L，pH 5.6。培養(yǎng)基滅菌條件為125℃，40 min。

1.2.6 煉苗移栽

當(dāng)小苗植株長(zhǎng)至4～7 cm高時(shí)，2015年9月，將培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移至溫室，在溫室自然光照下煉苗10 d，取出瓶苗，洗凈根部培養(yǎng)基，百菌清溶液消毒后，移栽到體積比蘭石∶陶粒為3∶2的混合基質(zhì)中。移栽成活率達(dá)85%；百菌清溶液消毒是用0.3%的百菌清溶液浸泡30 min。

1.2.7 大棚種植與病蟲(chóng)害防治

移栽5 d開(kāi)始施水溶性的平衡肥，每10 d施肥1次，噴施藥劑預(yù)防病蟲(chóng)害；每月用清水沖洗栽培基質(zhì)1次。移栽后前6個(gè)月為小苗管理期，待小苗長(zhǎng)出新根，更換栽培杯，施肥方式同上。植株進(jìn)入大苗期后，進(jìn)行水、肥、光、溫度和病蟲(chóng)害管理調(diào)控，保持通風(fēng)透氣遮陰，濕度在70～85%，溫度在20～32℃條件；如果溫度高于32℃，用風(fēng)機(jī)和水簾降溫?；ㄑ砍霈F(xiàn)后，要進(jìn)行花期的水、肥、光、溫和病蟲(chóng)害的管理。

2 結(jié)果與分析

2.1 選育過(guò)程

授粉后120 d，將基本成熟而未開(kāi)裂的蒴果作為外植體（圖3）；蒴果消毒后播種原球莖誘導(dǎo)培養(yǎng)基，培養(yǎng)90 d，形成原球莖及芽混合體（圖4），雜交種子萌發(fā)率達(dá)90%以上（一共播種10瓶培養(yǎng)基，每瓶播種種子數(shù)100粒，發(fā)芽數(shù)在90～95，總種子發(fā)芽率達(dá)90%以上）；再培養(yǎng)210 d，長(zhǎng)成帶2～4條根，2～4片葉的完整植株（圖5）。大棚種植2.5年后，進(jìn)行開(kāi)花類型的兜蘭新品種選擇。從中選育出類型之一，在2018年3～5月初次開(kāi)花，如圖6所示，于2018年6月將選育出的新類型命名為‘紅霞兜蘭。

2.2 品種特征特性

‘紅霞兜蘭單株花期50～60 d，花期在3～5月，花為紫紅色，花瓣有紫褐色斑點(diǎn)?！t霞兜蘭植株株形、花形、花色和花梗長(zhǎng)等性狀介于兩個(gè)親本之間（圖6），其與父母本的主要區(qū)別特征見(jiàn)表1。‘紅霞兜蘭植株叢生，單株有葉5～9片；開(kāi)花株平均株高9.5 cm，株幅27.5 cm，倒二葉葉長(zhǎng)11～12 cm，葉寬2.5～2.8 cm。葉基部具紫紅色斑點(diǎn)，葉面具深淺綠色相間的網(wǎng)格斑，葉背面綠色?；üｉL(zhǎng)5.5～7.8 cm，紫褐色，披白色短柔毛；花1～2朵，直徑10～12 cm，紫紅色，具紫褐色斑點(diǎn)；中萼片寬卵形，長(zhǎng)3.5～4.3 cm，寬3.2～4.0 cm，紫紅色，邊緣具淡黃色暈和紫褐色斑點(diǎn)；合萼片寬卵形，稍小于中萼片，長(zhǎng)3.0～3.5 cm，寬2.5～3.0 cm，淡黃白色，具深淺不一的紫紅色斑點(diǎn)或斑塊；花瓣橢圓形，邊緣波狀具白色緣毛，長(zhǎng)5.0～5.5 cm，寬3.5～4.0 cm；唇瓣兜狀，長(zhǎng)3.5～4.5 cm，寬1.9～2.1 cm，黃褐色，具紫紅色斑點(diǎn)；退化雄蕊黃色，中心具紫褐色暈。

2.3 繁殖及栽培技術(shù)要點(diǎn)

選擇健康的親本進(jìn)行人工授粉雜交，收取蒴果后，采用組織培養(yǎng)無(wú)菌播種的方式進(jìn)行。將裝有瓶苗的培養(yǎng)瓶置于溫室中煉苗10～15 d，取出瓶苗，洗凈根部培養(yǎng)基，0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min，取出晾干后移栽到蘭石體積比∶陶粒=（1～3）∶（1～2）的混合基質(zhì)中；需用雙層遮陰網(wǎng)遮陰。蘭石和陶粒用清水浸泡3～4 h至充分吸水后，再用清水沖洗除去殘?jiān)蛪m泥，晾曬至1～2成干。移栽成活率達(dá)85%以上。

移栽5～7 d開(kāi)始施肥。選擇水溶性的平衡肥（氮∶磷∶鉀=20∶20∶20），以1 000～1 500倍濃度，每10～15 d基部澆灌施肥1次；為防栽培基質(zhì)中鹽分過(guò)高，每月用清水淋洗栽培基質(zhì)1次，淋洗方法同施肥方法。移栽后前6個(gè)月為小苗管理期，待小苗長(zhǎng)出新根，更換栽培杯，施肥方式同上。植株進(jìn)入大苗期后，施用高磷鉀肥（氮∶磷∶鉀=10∶20∶30），施用方式、濃度和次數(shù)同上。小苗和大苗期保持通風(fēng)透氣遮陰，濕度在70～85%，溫度在20～32℃條件。換盆時(shí)間宜選擇3～5月和9～10月，健康的植株可直接轉(zhuǎn)入較大盆中，病株可用70%酒精擦拭過(guò)的剪刀剪去老根和病葉，清除基質(zhì)，將修理好的植株用0.1%～0.3%的百菌清溶液浸泡30～40 min后，放在陰涼處晾干后種植。

病害的防治是每月分別噴灑50%的多菌靈可濕性粉劑800～1 000倍1～2次，70%的甲基托布津可濕性粉劑800～1 000倍1～2次；蟲(chóng)害的防治是將40%的氧化樂(lè)果乳油800～1 000倍和80%的敵敵畏800～1 000倍交替噴施，防治菜蛾和蝸牛，每月噴施1～2次。

3 討論與結(jié)論

兜蘭屬植物的雜交育種由于在自然條件下受種子萌發(fā)條件的限制，發(fā)展較緩慢，而采用普通的無(wú)菌播種技術(shù)也存在著種子萌發(fā)率低和周期長(zhǎng)的困難?！畮~兜蘭人工同種異株授粉的種子播種在1/2 MS、MS、RE、VW、‘花寶1號(hào)、1/4 MS的基本培養(yǎng)基上，1/2 MS和RE的基本培養(yǎng)基上種子萌發(fā)率高[9-12]；‘帶葉兜蘭授粉后120～150 d的種子萌發(fā)率高[9-10，13]?！堤m人工同種異株授粉的種子播種在1/2 MS和1/4 MS的基本培養(yǎng)基上，種子萌發(fā)率高；同時(shí)，‘同色兜蘭授粉后210 d的種子萌發(fā)率最高[14-15]。因此，不同的兜蘭品種的最佳種子萌發(fā)培養(yǎng)基和最佳授粉后果莢的采集時(shí)間也不同。

筆者經(jīng)改變基本培養(yǎng)基的成分，將基本培養(yǎng)基調(diào)成1/6MS，再在其中添加椰汁15.0%、香蕉汁15.0%、6-芐氨基腺嘌呤2.0 mg/L、萘乙酸0.50 mg/L、活性炭1.0 g/L、蔗糖30 g/L和卡拉膠粉9.5 g/L，以‘帶葉兜蘭為母本、‘同色兜蘭為父本的雜交蒴果種子在此培養(yǎng)基上萌發(fā)率達(dá)90%以上。推測(cè)可能是1/6 MS的鹽離子濃度低，有利于種子的萌發(fā)，而其中附加物椰汁和香蕉汁，也為種子的萌發(fā)提供必需的物質(zhì)基礎(chǔ)，其具體的作用機(jī)理需要做進(jìn)一步探究。在已成功報(bào)道的兜蘭種子萌發(fā)的培養(yǎng)基中，一般都有附加物椰汁或香蕉汁[5，10-12，14-15]。已報(bào)道的兜蘭新品種的選育時(shí)間在3～5年[5-8]。本研究的選育時(shí)間為4年，與已報(bào)道的兜蘭新品種選育的時(shí)間長(zhǎng)一致。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉仲健，陳心啟，陳利君，等. 中國(guó)兜蘭屬植物[M].2009，北京：科學(xué)出版社.

[2] 曾宋君，陳之林，吳坤林，等. 兜蘭無(wú)菌播種和組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2007，34（3）：793-796.

[3] 曾宋君，田瑞雪，陳之林，等. 兜蘭屬植物雜交育種研究進(jìn)展[J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)，2010，18（2）：459-468.

[4] 曾宋君，夏念和，陳之林，等. 國(guó)產(chǎn)兜蘭屬植物觀賞價(jià)值評(píng)價(jià)及其在華南地區(qū)的應(yīng)用前景分析[J]. 中國(guó)野生植物資源，2011，30（2）：9-13，35.

[5] 傅燕艷，曾宋君，張建霞，等. 兜蘭新品種‘南之霞[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2013，40（4）：804-806.

[6] 王燕君，譚志勇，劉運(yùn)權(quán)，等. 兜蘭新品種‘紅瑪瑙[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2012，39（8）：1 626-1 628.

[7] 聞?wù)嬲?，王燕君，?茵，等. 兜蘭新品種‘農(nóng)大烏紗[J]. 園藝學(xué)報(bào)，2014，41（3）：609-611.

[8] 王燕君，張樂(lè)萍，王亞平，等. 兜蘭新品種“金冠兜蘭”的選育[J].北方園藝，2016，（2）：154-156.

[9] 曾宋君，陳之林，段 俊. 帶葉兜蘭的無(wú)菌播種和離體快速繁殖[J]. 植物生理通訊，2006，42（2）：247.

[10] 田 凡，顏鳳霞，姜運(yùn)力，等. 帶葉兜蘭種子無(wú)菌萌發(fā)及試管成苗技術(shù)研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（9）：30-33.

[11] 陳寶玲，陳 爾，楊舒婷，等. 不同培養(yǎng)基組分對(duì)帶葉兜蘭離體培養(yǎng)效果的影響[J]. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2016，47（10）：1 730-1 736.

[12] 陳寶玲，周千淞，陳 爾，等. 帶葉兜蘭壯苗生根培養(yǎng)基及移栽基質(zhì)選擇[J]. 廣西林業(yè)科學(xué)，2017，46（2）：206-209.

[13] 張娟娟，嚴(yán) 寧，胡 虹. 三種兜蘭屬植物種子發(fā)育過(guò)程及其與無(wú)菌萌發(fā)的關(guān)系[J]. 植物分類與資源學(xué)報(bào)，2013，35（1）：33-40.

[14] 王蓮輝，姜運(yùn)力，余金勇，等. 同色兜蘭的組織培養(yǎng)與快速繁殖[J]. 植物生理學(xué)通訊，2008，44（6）：1 171-1 172.

[15] 李秀玲，黃昌艷，宋 倩，等. 同色兜蘭的非共生萌發(fā)與快速繁殖研究[J]. 植物科學(xué)學(xué)報(bào)，2016，34（1）：127-134.