羌活飲片生產(chǎn)加工工藝規(guī)范化研究

孫振陽+王英姿+聶瑞杰+張景珍+王思雨

[摘要] 該研究以羌活醇、異歐前胡素、揮發(fā)油和浸出物（水、醇）為研究對(duì)象，考察不同軟化方法、切片厚度和干燥方法對(duì)羌活飲片質(zhì)量的影響，采用歸一距離評(píng)價(jià)法對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。研究結(jié)果表明，不同軟化、切制、干燥工藝會(huì)對(duì)羌活中5種成分的含量造成影響，羌活飲片的最佳加工工藝為羌活藥材撿去沙石等非藥用部位，除去霉變、蟲蛀部分，用流動(dòng)的飲用水搶水洗凈，碼放于潤藥池中，采用悶潤法進(jìn)行軟化，每1 kg藥材每隔2 h噴灑1/8量水，藥材上部用潔凈濕潤的棉布覆蓋，悶潤12 h至藥材內(nèi)外軟硬程度適宜后切厚片（2～4 mm），于50 ℃鼓風(fēng)干燥4 h，期間翻動(dòng)2次。該工藝切實(shí)可行，為羌活飲片生產(chǎn)加工的標(biāo)準(zhǔn)化提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，對(duì)羌活飲片質(zhì)量的提高具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 羌活； 軟化； 切制； 干燥； 加工工藝

[Abstract] Notopterol， isoimperatorin， volatile oil and extract （water and ethanol） were used as the research objects in this study to investigate the effects of different softening method， slice thickness and drying methods on the quality of Notopterygii Rhizoma et Radix slices， and the experimental data were analyzed by homogeneous distance evaluation method. The results showed that different softening， cutting and drying processes could affect the content of five components in Notopterygii Rhizoma et Radix incisum. The best processing technology of Notopterygii Rhizoma et Radix slices was as follows： non-medicinal parts were removed； mildewed and rot as well as moth-eaten parts were removed； washed by the flowing drinking water； stacked in the drug pool； moistening method was used for softening， where 1/8 volume of water was sprayed for every 1 kg of herbs every 2 h； upper part of herbs covered with clean and moist cotton， and cut into thick slices （2-4 mm） after 12 h moistening until appropriate softness， then received blast drying for 4 h at 50 ℃， and turned over for 2 times during the drying. The process is practical and provides the experimental basis for the standardization of the processing of Notopterygii Rhizoma et Radix， with great significance to improve the quality of Notopterygii Rhizoma et Radix slices.

[Key words] Notopterygii Rhizoma et Radix； softening； cutting； drying； processing technology

羌活為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H. T. Chang或?qū)捜~羌活 N. franchetii H. de Boiss.的干燥根莖和根，具有解表散寒，祛風(fēng)除濕，止痛的功能，用于風(fēng)寒感冒，頭痛項(xiàng)強(qiáng)，風(fēng)濕痹痛，肩背酸痛[1]。2015年版《中國藥典》將揮發(fā)油、浸出物、羌活醇和異歐前胡素作為羌活質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，現(xiàn)代研究亦認(rèn)為羌活醇和異歐前胡素是羌活的主要有效成分[2-4]。目前羌活的加工工藝為凈制、軟化、切制和干燥，經(jīng)課題組調(diào)研發(fā)現(xiàn)，羌活在進(jìn)行加工時(shí)，不同企業(yè)采取的加工工藝差別較大，如進(jìn)行羌活藥材軟化時(shí)，有的企業(yè)規(guī)定軟化時(shí)間為12～24 h，但關(guān)于用水量卻沒有規(guī)定，有的企業(yè)只是規(guī)定藥透水盡，對(duì)于軟化時(shí)間和用水量均無規(guī)定；干燥時(shí)，多數(shù)企業(yè)采用的干燥方式為烘箱干燥，干燥溫度存在差異。由于采用的加工工藝沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，致使生產(chǎn)出來的飲片質(zhì)量相差較大，從而影響臨床應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)羌活藥材的性質(zhì)、現(xiàn)有羌活生產(chǎn)工藝規(guī)程及實(shí)驗(yàn)條件，并依據(jù)《中國藥典》并參考各地方炮制規(guī)范以及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[5-7]，以2015年版《中國藥典》羌活項(xiàng)下的指標(biāo)：浸出物、揮發(fā)油、羌活醇和異歐前胡素的含量，首次系統(tǒng)地對(duì)羌活的炮制加工工藝進(jìn)行研究，優(yōu)選出科學(xué)、合理、穩(wěn)定、可控的羌活加工工藝，滿足臨床用藥安全、穩(wěn)定、有效與可控。

1 材料

1.1 藥物與試劑

羌活藥材由蘭州佛慈制藥股份有限公司提供，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)孫志蓉教授鑒定為傘形科植物羌活N. incisum或?qū)捜~羌活N. franchetii的干燥根莖和根。endprint

羌活醇（批號(hào)111 820-201504，中國食品藥品檢定研究院），異歐前胡素（批號(hào)110 827-201611，中國食品藥品檢定研究院），乙腈（色譜純，F(xiàn)isher），其他試劑均為分析純。

1.2 儀器

日本島津高效液相色譜儀（SIL-20A自動(dòng)進(jìn)樣器，SPD-20A紫外可見檢測器，CTO-10A SVP柱溫箱）；BSI10型1/1 萬電子天平（SARTORIUS A6 Made by Sartorius）；KH7200DB型數(shù)控超聲波清洗機(jī)（昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司）；ZN-02小型粉碎機(jī)（北京興時(shí)利和科技發(fā)展有限公司）；Research plus 單道可調(diào)量程移液器（312 000 0267，德國Eppendorf）；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（DHG-9030A，北京北方利輝實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司）。

2 方法

2.1 浸出物的測定

分別用乙醇和水作溶劑，照浸出物測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2201）項(xiàng)下的熱浸法測定。

2.2 揮發(fā)油的測定

照揮發(fā)油測定法（《中國藥典》2015年版四部通則2204）項(xiàng)下的甲法測定。

2.3 羌活醇和異歐前胡素的含量測定

2.3.1 色譜條件 Agilent Extend-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動(dòng)相乙腈-水（44∶56），流速1.0 mL·min-1，檢測波長310 nm，色譜圖見圖1。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 取羌活醇和異歐前胡素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含羌 活醇60 μg、異歐前胡素30 μg的混合溶液，即得。

2.3.3 樣品溶液的制備 取本品粉末（過3號(hào)篩）約0.4 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率50 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足失重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

方法學(xué)研究表明，羌活醇和異歐前胡素在0.120～2.400，0.060～1.200 μg與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。樣品溶液在4 ℃條件下放置24 h性質(zhì)穩(wěn)定（RSD分別為2.1%，0.50%）。方法的精密度（RSD分別為2.3%，0.49%，n=6）、重復(fù)性（RSD分別為1.9%，0.46%，n=6）和加樣回收率（平均回收率分別為100.5%，100.9%，RSD分別為1.2%，0.88%，n=6）均符合要求。

2.4 數(shù)據(jù)分析

為綜合評(píng)價(jià)羌活飲片的質(zhì)量，且便于統(tǒng)計(jì)，采用歸一距離評(píng)價(jià)法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行處理。首先，對(duì)各指標(biāo)數(shù)據(jù)做歸一化處理，然后針對(duì)每個(gè)指標(biāo)取其最大值，得到理想樣品，計(jì)算每個(gè)樣品與理想樣品之間的距離，距離越小，對(duì)應(yīng)的方法評(píng)價(jià)越好，距離越大，對(duì)應(yīng)的方法評(píng)價(jià)越差。計(jì)算公式為：綜合指標(biāo)=[∑（dmax-di ） 2]1/2，其中d=（Ymax-Yi）/（Ymax-Ymin），Y代表各指標(biāo)成分的含量。綜合指標(biāo)代表對(duì)應(yīng)方法距離理想化值的距離，越接近0效果越好，越大效果越差。

3 結(jié)果

3.1 軟化工藝的考察

3.1.1 泡法 取羌活凈藥材500 g至容器內(nèi)，加水1 500 mL沒過藥材，室溫浸泡直至內(nèi)外濕度一致，取出，用切藥刀切成厚片，50 ℃鼓風(fēng)干燥烘干。

3.1.2 悶潤法 取羌活凈藥材500 g至容器內(nèi)，上覆蓋濕布，每隔2 h噴灑1/8量水，悶潤12 h，取出，用切藥刀切成厚片，50 ℃鼓風(fēng)干燥烘干。

3.1.3 結(jié)果 依據(jù)各指標(biāo)項(xiàng)下的測定方法對(duì)2種不同軟化方法制得的飲片進(jìn)行測定，結(jié)果見表1。

通過比較發(fā)現(xiàn)，悶潤法的平均綜合指標(biāo)為1.37，泡法的平均綜合指標(biāo)為1.60，且羌活采用泡法進(jìn)行軟化，測得的揮發(fā)油平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.24%，不符合2015年版《中國藥典》的要求[規(guī)定含揮發(fā)油不得少于1.4%（mL·g-1）]，而悶潤法工藝簡便易行，悶潤時(shí)間和悶潤水量的標(biāo)準(zhǔn)化使羌活飲片的制備工藝更便于規(guī)范化操作，因此選擇悶潤法作為羌活藥材的軟化方法。

3.2 切片厚度的考察

取羌活凈藥材，按照優(yōu)選出來的軟化方法進(jìn)行軟化，分別切制成2，3，4 mm的羌活厚片，50 ℃鼓風(fēng)干燥烘干，依據(jù)各指標(biāo)項(xiàng)下的測定方法對(duì)2種不同軟化方法制得的飲片進(jìn)行測定，結(jié)果見表2。

不同切片厚度下各個(gè)指標(biāo)均符合2015年版《中國藥典》要求，不同切片厚度的平均綜合指標(biāo)為1.56，1.53，1.36，使用SAS 9.4軟件對(duì)不同切片厚度的綜合指標(biāo)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示2，3，4 mm不具有顯著性差異，說明厚度為 2，3，4 mm時(shí)，羌活中總含量差別不大。綜合生產(chǎn)實(shí)際，羌活的切片厚度以厚片（2～4 mm）為佳，結(jié)論與2015年版《中國藥典》一致。

3.3 干燥工藝的考察

在預(yù)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇40 ℃鼓風(fēng)干燥6 h，45 ℃鼓風(fēng)干燥5 h，50 ℃鼓風(fēng)干燥4 h和55 ℃鼓風(fēng)干燥3 h作為考察對(duì)象，研究羌活飲片鼓風(fēng)干燥的最佳工藝。具體為：取凈羌活藥材適量，按照優(yōu)選出的軟化工藝進(jìn)行處理，分別采用不同干燥工藝進(jìn)行干燥，干燥結(jié)束后依據(jù)各指標(biāo)項(xiàng)下的測定方法對(duì)2種不同軟化方法制得的飲片進(jìn)行測定，結(jié)果見表3。

55 ℃鼓風(fēng)干燥制得的羌活飲片中羌活醇和異歐前胡素的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)和為0.12%，低于2015年版《中國藥典》的標(biāo)準(zhǔn)（不得小于0.4%），因此55 ℃鼓風(fēng)干燥不適合羌活飲片的干燥。40，45，50 ℃的平均綜合指標(biāo)為0.74，1.18，0.64，使用SAS 9.4軟件對(duì)不同干燥溫度的綜合指標(biāo)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示45 ℃與40，50 ℃存在顯著性差異（P<0.01），40 ℃與50 ℃之間無顯著性差異，但考慮到生產(chǎn)實(shí)際和降低能耗，因此選擇50 ℃鼓風(fēng)干燥4 h作為羌活飲片的干燥方法。endprint

4 討論

中藥成分復(fù)雜，產(chǎn)生的藥效是各個(gè)成分的共同作用，用某個(gè)單一成分作為工藝考察的指標(biāo)，不能體現(xiàn)其總體質(zhì)量。因此采用多個(gè)指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)加工工藝可以使分析結(jié)果更為科學(xué)和客觀，使趨于加工工藝優(yōu)化合理、可信[8]。“歸一距離評(píng)價(jià)法”將樣品的多個(gè)指標(biāo)歸一化處理為一個(gè)綜合指標(biāo)，并得到一個(gè)理想模型，每個(gè)樣品的綜合指標(biāo)與理想模型進(jìn)行對(duì)比分析，這樣既考慮到每個(gè)指標(biāo)，又避免在處理數(shù)據(jù)時(shí)的主觀性，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性[9-10]，因此本實(shí)驗(yàn)采用“歸一距離評(píng)價(jià)法”對(duì)數(shù)據(jù)處理分析。

實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，羌活在使用泡法軟化時(shí)，由于藥材長時(shí)間浸泡在水中，使羌活中水溶性成分流失，揮發(fā)油含量降低，且藥材易傷水；采用悶潤法，可以有效的避免藥材傷水等問題，且指標(biāo)性成分損失較少；采用每1 kg藥材每隔2 h噴灑1/8量水，悶潤12 h軟化藥材，容器中水分無殘留，做到“藥透水盡”，且軟化后的羌活藥材達(dá)到切制要求，無傷水出現(xiàn)，故采用悶潤法作為羌活藥材的軟化方法。

2015年版《中國藥典》規(guī)定羌活飲片的炮制為“除去雜質(zhì)，洗凈，潤透，切厚片，干燥”，由于羌活中含有較多揮發(fā)油，且揮發(fā)油是羌活的主要藥效成分[11-12]，因此在考慮進(jìn)行羌活飲片干燥時(shí)不宜選擇過高溫度，以免對(duì)羌活的揮發(fā)油含量造成損失。在進(jìn)行干燥考察時(shí)，首先以羌活飲片的含水量作為干燥溫度和干燥時(shí)間的選擇條件，通過前期預(yù)實(shí)驗(yàn)確定為40 ℃鼓風(fēng)干燥6 h，45 ℃鼓風(fēng)干燥5 h，50 ℃鼓風(fēng)干燥4 h和55 ℃鼓風(fēng)干燥3 h。根據(jù)文獻(xiàn)[13]報(bào)道，羌活醇通過化學(xué)反應(yīng)可以轉(zhuǎn)化生成異羌活醇（羌活酚）和脫水羌活酚，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，45 ℃羌活醇含量較其他組具有較大差異，分析原因可能是羌活醇在45 ℃干燥5 h時(shí)，羌活醇的轉(zhuǎn)化程度最大，導(dǎo)致其含量最低，在其他溫度下羌活醇的轉(zhuǎn)化受到抑制，含量上升；異歐前胡素屬于補(bǔ)骨脂型香豆素，分子中具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu)，在加熱條件下可水解開環(huán)，生成順式鄰羥基桂皮酸鹽，但此反應(yīng)為可逆反應(yīng)，順式鄰羥基桂皮酸鹽可以閉環(huán)恢復(fù)為內(nèi)酯結(jié)構(gòu)[14]，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)55 ℃異歐前胡素的含量較其他組具有較大差異，分析原因可能是異歐前胡素55 ℃干燥3 h時(shí)，異歐前胡素分子的內(nèi)酯結(jié)構(gòu)打開，導(dǎo)致測得的含量降低，因此在干燥溫度最終優(yōu)選時(shí)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室結(jié)果和藥廠生產(chǎn)規(guī)范選擇50 ℃鼓風(fēng)干燥4 h作為羌活飲片的干燥方法。

加強(qiáng)中藥加工工藝的研究，規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化的生產(chǎn)是控制中藥材和中藥飲片質(zhì)量的重要途徑。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)羌活生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行考察研究，建立了穩(wěn)定可控且具有操作性的羌活加工工藝標(biāo)準(zhǔn)，為企業(yè)中藥材炮制的流程化、標(biāo)準(zhǔn)化、精細(xì)化提供了一定的參考。

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[責(zé)任編輯 孔晶晶]endprint