急性心肌梗死后血管新生相關(guān)分子機(jī)制的研究進(jìn)展

崔加敏，劉婷婷，孫芳玲，郭德玉，王 文*，石京山*

(1.遵義醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)藥理教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨特色民族藥教育部國際合作聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室， 貴州 遵義 563099； 2.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物室，北京 100053)

心血管疾病因其高發(fā)病率和高死亡率而備受關(guān)注，其中急性心肌梗死的死亡率總體上呈上升態(tài)勢[1]，其治療手段主要有溶栓治療與心臟冠狀動脈側(cè)支循環(huán)的形成和開放，如經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(percutaneous coronary intervention，PCI)和溶栓[2-3]。然而，缺血心肌血流恢復(fù)可能引起心肌再灌注損傷，反而降低了治療手段的療效[4]。近年來，治療性血管新生是缺血性心臟病治療研究的新領(lǐng)域，在阻止心室重構(gòu)和恢復(fù)血流方面起到重要作用[5]。目前，治療性血管新生機(jī)制研究主要集中在血管形成過程中，并正逐步傾向于通過調(diào)節(jié)促血管生成因子，調(diào)控內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells，EPCs)分化為血管的血管生成機(jī)制研究[6]。促血管生成的因子主要包括多肽類生長因子和脂類介質(zhì)，多肽類生長因子包括：血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor，F(xiàn)GF)、血小板衍生生長因子(platelet derived growth factor，PDGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)、肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1，Ang-1)等。脂類介質(zhì)包括：溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid，LPA)以及鞘氨醇-1-磷酸酯(sphingosine-1-phosphate，S1P)等。目前，心肌梗死后血管新生的研究大多集中在多肽類生長因子方面。本文主要介紹多肽類生長因子及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后血管新生中的作用和脂類介質(zhì)對血管新生的影響。

1 多肽類生長因子

1.1 VEGF-VEGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)促血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移

現(xiàn)今認(rèn)為血管新生來源于組織源性的信號通路，其中最為重要的是VEGF-VEGFR信號傳導(dǎo)系統(tǒng)[7]。VEGF是分子量46×103的特異性肝素結(jié)合生長因子，是高度保守的同源二聚體糖蛋白，血管內(nèi)皮細(xì)胞的促有絲分裂劑[8]。在轉(zhuǎn)錄過程中，由于mRNA不同的剪切方式，形成6種VEGF異構(gòu)體，包括VEGFA、VEGFB、VEGFC、VEGFD、VEGFE、VEGFF，都是同源二聚體蛋白且具有相似的空間結(jié)構(gòu)[9]。VEGFA作為血管發(fā)生和血管新生的重要因子，在哺乳動物體內(nèi)主要有四種亞型，即VEGF121、VEGF145、VEGF165、VEGF189。VEGFA通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的細(xì)胞表面型受體VEGFR1、VEGFR2結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)作用[10]。對于基因敲除鼠的研究已證明VEGFA與其受體VEGFR2結(jié)合主要介導(dǎo)組織血管的形成，而VEGFC與其受體VEGFR3結(jié)合則主要表達(dá)在淋巴血管和血管芽生的過程中。VEGFA-VEGFR2信號的內(nèi)吞作用可受到多種跨膜蛋白的調(diào)控，如VEGFR3、NRP1、VE-cadherin、ephrin-B2、血小板反應(yīng)蛋白受體CD47和整合素[11-12]。

心肌梗死發(fā)生后，在缺血缺氧的刺激下，梗死區(qū)心肌釋放大量的HIF-1α。作為心肌缺血調(diào)控的總開關(guān)，HIF-1α不僅在血管形成初期過程中發(fā)揮其作用，在血管形成的后期通過調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞和周細(xì)胞對血管內(nèi)皮細(xì)胞的被覆，誘導(dǎo)新生血管發(fā)育為成熟的血管[13-14]。在低氧情況下，HIF-1α與HIF-1β結(jié)合而成有活性的HIF-1，HIF-1能夠與VEGF上的HRE相結(jié)合，從而激活VEGFA/VEGFR2信號通路。VEGFR2可通過下游JAK2、PLCγ1信號通路調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，通過Src、FAK信號通路調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，通過JAK2、Akt信號通路調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的存活[15]。Tang等[16]研究表明，給予間充質(zhì)干細(xì)胞治療Sprague-Dawley大鼠心肌梗死，由于心梗初期炎癥反應(yīng)導(dǎo)致心肌血管內(nèi)皮細(xì)胞大量死亡，不能提供充足的血流供應(yīng)，達(dá)不到重塑缺血心肌的治療目的。但當(dāng)對心肌梗死動物尾靜脈注射靶向釋放的VEGF時，VEGF可促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞治療中的血管新生，從而達(dá)到治療目的。

1.2 FGF及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)

成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)家族是多功能多效應(yīng)的蛋白分子家族，包括22個成員，共用對肝素具有高親和力，包括120個氨基酸中心域的高序列同源性區(qū)域。FGFs在多種細(xì)胞和組織的遷移、分化進(jìn)程中起著重要的作用。已報道FGFs在病理狀態(tài)下如腫瘤組織中，可促進(jìn)血管新生[17]。在FGF家族中，酸性成纖維生長因子aFGF和堿性成纖維生長因子bFGF被認(rèn)為是刺激內(nèi)皮細(xì)胞遷移形成管狀結(jié)構(gòu)，促進(jìn)血管新生最重要的細(xì)胞因子。哺乳類動物FGFR有四種亞型，F(xiàn)GFR-1、FGFR-2、FGFR-3、FGFR-4[18]。與其他受體酪氨酸激酶相似，F(xiàn)GFR與配體結(jié)合，通過酪氨酸磷酸化傳導(dǎo)細(xì)胞外信號。FGFs與FGFR結(jié)合，使受體二聚化，激活酪氨酸激酶活性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域自身磷酸化。bFGF通過上調(diào)整合素αvβ3的表達(dá)，穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和粘附，最終形成成熟的血管。FGF信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)可通過Ras/MAPK、PI-3 K/Akt、PLCγ/Ca2+三條信號通路調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移，參與到形成血管腔的過程中[19]。已證明FGF-1/FGF-2和FGFR在梗死后心肌上表達(dá)，并促進(jìn)AMI后血管新生，其中，F(xiàn)GF-2顯著促進(jìn)AMI后動脈形成[20-21]。對豬應(yīng)激性心肌梗死模型冠狀動脈內(nèi)注射腺病毒轉(zhuǎn)染的FGF-4，可改善心肌灌注、增加區(qū)域性功能[22]。臨床前研究已證明，通過聯(lián)合應(yīng)用幾種促血管生成因子如VEGFs、FGFs，增加心肌缺血區(qū)的局部灌注，改善組織的能量代謝和心肌功能，最終可達(dá)到預(yù)防缺血性損傷的目的[23]。

1.3 HGF促血管新生作用

肝細(xì)胞生長因子(HGF)是一種二硫鍵連接的異二聚體多功能細(xì)胞生長因子，屬于纖溶酶原依賴的生長因子家族，分子量為80×103，是間質(zhì)細(xì)胞衍生的多效性因子，通過自分泌和旁分泌的途徑可調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用，同時也表現(xiàn)出AMI后強(qiáng)大的促血管生成作用[24-25]。HGF受體c-Met是跨模型酪氨酸激酶受體，HGF的生物學(xué)效應(yīng)均是通過與其受體作用而完成的[26]。研究表明，在實(shí)驗(yàn)動物及人類心肌梗死后，盡管缺血心肌上c-Met受體上調(diào)，但缺氧的環(huán)境減少心肌HGF的釋放量[24]。

有研究顯示在人類內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞中，HGF顯著刺激基質(zhì)降解通路，產(chǎn)生大量的基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)，同時HGF能明顯促進(jìn)VEGF對血管新生的作用，其可能機(jī)制是通過ets通路，尤其是ets-1途徑[27-28]。研究表明，HGF不僅具有促血管生成的作用，而且可通過PI-3 K信號通路上調(diào)Akt，起到抗細(xì)胞凋亡、阻止心室重構(gòu)和功能障礙的作用[26]。

1.4 TGF-β信號通路調(diào)節(jié)內(nèi)皮組織狀態(tài)

轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β是由兩個結(jié)構(gòu)相同或相近的、分子量為12.5×103的亞單位借二硫鍵連接的多功能二聚體多肽生長因子，可由單核細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞分泌，調(diào)控細(xì)胞的增殖、遷移、細(xì)胞外基質(zhì)的形成和多種細(xì)胞形態(tài)的分化。TGF-β誘導(dǎo)前驅(qū)細(xì)胞分化為周皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞，調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，促細(xì)胞外基質(zhì)的堆積作用，從而參與到血管新生的過程中。TGF-β有兩種受體，特異性跨膜一型受體(ALK-1)和絲氨酸/蘇氨酸激酶二型受體(ALK-5)，內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TGF-β一型受體(ALK-1)[29-30]。

TGF-β信號通路對血管形成起到至關(guān)重要的作用，根據(jù)環(huán)境不同，TGF-β具有促血管新生或者抑血管新生的作用[31]，在內(nèi)皮細(xì)胞中存在兩條不同的信號通路，即ALK-5-Smad2/3信號通路和ALK-1-Smad1/5信號通路。TGF-β通過平衡激活受體樣激酶ALK-1和ALK-5信號通路調(diào)節(jié)內(nèi)皮組織的狀態(tài)[32]。TGF-β與ALK-1結(jié)合導(dǎo)致Smad1/5的磷酸化，誘導(dǎo)Id1的表達(dá)，從而促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和增殖。TGF-β通過激活A(yù)LK-5，磷酸化Smad2/3，導(dǎo)致1型纖溶酶原激活物抑制物(PAI-1)和纖維連接蛋白的表達(dá)，從而抑制遷移、增殖和管腔形成。此外，活化的ALK-1途徑會抑制ALK-5信號通路，endoglin是TGF-β/ALK-5信號通路的負(fù)調(diào)節(jié)因子，在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cells，HUVECs)中，ALK可上調(diào)endoglin，在人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(human dermal microvascular endothelial cells，HDMECs)中缺氧可導(dǎo)致其上調(diào)[32-33]，但這其中的機(jī)制仍不清楚。

1.5 PDGF信號通路促血管成熟

血小板衍生生長因子(PDGF)，可由多種細(xì)胞分泌，如內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和血小板。由于形成二聚體結(jié)構(gòu)時二硫鍵連接的方式不同，PDGF可分為三種不同的異構(gòu)體，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB。三種PDGF配體通過與細(xì)胞膜上PDGF受體(PDGFR-A、PDGFR-B)的細(xì)胞外配體結(jié)合域結(jié)合，促使受體胞內(nèi)蛋白激酶結(jié)構(gòu)域二聚化，激活肽段具有酪氨酸蛋白激酶活性的結(jié)構(gòu)域，使酪氨酸殘基自身磷酸化并激活細(xì)胞內(nèi)一系列生化反應(yīng)，從而促進(jìn)周皮細(xì)胞的增殖[34-35]。

許多研究表明，生長因子如bFGF、VEGF、Ang-2是引發(fā)血管生成的關(guān)鍵因素，但這些生長因子單獨(dú)作用時會導(dǎo)致早期心肌上新生血管滲漏和不成熟[36]。PDGF是促分裂和增殖活性的生長因子，能促進(jìn)多種細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，如在新生血管的成熟階段，內(nèi)皮細(xì)胞上的PDGFR-B通過招募壁細(xì)胞，刺激壁細(xì)胞的遷移和增殖，通過上調(diào)金屬蛋白酶抑制劑(TIMP-1)的作用，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)成分的合成，從而促血管成熟[37-38]。PDGFR-B信號通路有助于早期心臟發(fā)育與傳導(dǎo)系統(tǒng)的建立，在生理及病理狀態(tài)PDGFR參與到反應(yīng)性心肌肥大和心肌細(xì)胞增殖的過程中。PDGFR也可通過MAPK和PI-3 K信號通路調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞的增殖和存活。同時，還可以參與誘導(dǎo)生長的細(xì)胞分泌其他生長因子，在血流動力學(xué)過載狀態(tài)，應(yīng)激心肌細(xì)胞表面PDGFR表達(dá)水平上調(diào)，通過增加缺氧誘導(dǎo)因子HIF和VEGF的表達(dá)，阻止心肌細(xì)胞向擴(kuò)張型心肌病的進(jìn)展[38]。

1.6 血管生成素家族

目前發(fā)現(xiàn)的血管生成素主要有四個亞型，即Ang-1、Ang-2、Ang-3、Ang-4，與內(nèi)皮細(xì)胞選擇性酪氨酸激酶受體Tie-2結(jié)合，代表了一個促血管生成的家族。目前對Ang-1/Ang-2系統(tǒng)參與到血管新生及促新生血管成熟的作用研究相對深入。Ang-1由498個氨基酸組成，其中N端有一疏水分泌信號肽和α螺旋的結(jié)構(gòu)域，C端包含一纖維蛋白原類似結(jié)構(gòu)域。Ang-1與Tie-2結(jié)合形成二聚體，使Tie-2自身磷酸化從而被激活，活化的Tie-2通過激活調(diào)節(jié)亞基P85，進(jìn)而活化PI-3 K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與血管生成的調(diào)節(jié)[39]。同時，Ang-1可通過加強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞之間的連接，中和VEGF誘導(dǎo)的血管滲透性增加的現(xiàn)象，促新生血管成熟[40-41]。

Ang-2作為內(nèi)源性Tie-2受體拮抗劑，與Tie-2結(jié)合，但不引起Tie-2磷酸化，從而抑制Ang-1的活性。有文獻(xiàn)報導(dǎo)，Ang-2能明顯刺激內(nèi)皮祖細(xì)胞的移行，但對內(nèi)皮細(xì)胞的遷移無影響，Ang-2與內(nèi)皮祖細(xì)胞間的相互作用可能是新生血管形成的始動環(huán)節(jié)。缺乏Tie-2或者Ang-1的轉(zhuǎn)基因小鼠，都表現(xiàn)出胚胎致死性[42-43]。Sandhu等[44]證明，左冠狀動脈結(jié)扎的Sprague-Dawley大鼠，其Ang-2表達(dá)量持續(xù)增加，而Ang-1表達(dá)量減少，表明Ang-2在心肌梗死后血管新生方面占主導(dǎo)作用。Ang-1/Ang-2系統(tǒng)通過穩(wěn)定新生血管、促進(jìn)周皮細(xì)胞的招募和粘附，從而控制血管新生的多方面因素。

2 脂類介質(zhì)

血小板和巨噬細(xì)胞等釋放的多種脂類介質(zhì)在血管生成方面起關(guān)鍵作用，如溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid，LPA)、磷脂酸(phosphatidic acid，PA)、1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate，S1P)。在凝血過程中，血清對內(nèi)皮細(xì)胞化學(xué)趨化活性的80%以上是由血小板來源的S1P產(chǎn)生的[45]。S1P可由血小板或吞噬細(xì)胞等多種細(xì)胞成分儲存和釋放，通過自分泌和旁分泌的形式調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、遷移、分化。S1P與G蛋白偶聯(lián)受體家族EDG-1、-3、-5、-6、-8結(jié)合，可激活Gq-、Gi-、G12-、G13-和Rho依賴的信號通路。S1P可調(diào)節(jié)多種蛋白和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的表達(dá)，如胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)、p38-MAPK信號通路、磷脂酶C和D(phospholipases C and D)、腺苷酸環(huán)化酶和粘著斑激酶(focal adhesion kinase，F(xiàn)AK)。S1P參與到血管新生的多個過程中，包括細(xì)胞外基質(zhì)降解、內(nèi)皮細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞的增殖與遷移。在體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)中，均證實(shí)S1P能增加毛細(xì)血管的形成。S1P調(diào)節(jié)血管發(fā)生是通過EDG-1耦合ERK信號通路實(shí)現(xiàn)的，同時，S1P能協(xié)同多肽類生長因子，刺激血管生成[46]。

3 展望

急性心肌梗死作為一種嚴(yán)重的缺血性心臟病，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢。早期采取措施恢復(fù)缺血區(qū)心肌組織血流供應(yīng)是減少病死率的關(guān)鍵。目前，治療急性心肌梗死的方法主要有溶栓治療和心臟冠狀動脈側(cè)支循環(huán)的形成和開放。心臟冠脈側(cè)支循環(huán)的形成能有效減輕心肌缺血，防止心肌細(xì)胞壞死，而血管新生可促進(jìn)缺血心肌周邊組織建立側(cè)支循環(huán)。隨著對血管新生相關(guān)分子機(jī)制研究的深入，治療性血管新生將成為未來急性心肌梗死的有效治療手段。

[1] 陳偉偉, 高潤霖, 劉力生, 等. 《中國心血管病報告2016》概要 [J]. 中國循環(huán)雜志, 2017, 32(6): 521-530.

[2] Hausenloy DJ, Yellon DM. Myocardial ischemia-reperfusion injury: a neglected therapeutic target [J]. J Clin Invest, 2013, 123(1): 92-100.

[3] Ng R, Yeghiazarians Y. Post myocardial infarction cardiogenic shock: a review of current therapies [J]. J Intensive Care Med, 2013, 28(3): 151-165.

[4] Yellon DM, Hausenloy DJ. Myocardial reperfusion injury [J]. N Engl J Med, 2007, 357(11): 1121-1135.

[5] Nessa A, Latif SA, Siddiqui NI, et al. Angiogenesis — a novel therapeutic approach for ischemic heart disease [J]. Mymensingh Med J, 2009, 18(2): 264-272.

[6] Zheng Y, Xiao M, Li L, et al. Remote physiological ischemic training promotes coronary angiogenesis via molecular and cellular mobilization after myocardial ischemia [J]. Cardiovasc Ther, 2017, 35(3): e12257.

[7] Heba G, Krzemiński T, Porc M, et al. The time course of tumor necrosis factor-α, inducible nitric oxide synthase and vascular endothelial growth factor expression in an experimental model of chronic myocardial infarction in rats [J]. J Vasc Res, 2001, 38(3): 288-300.

[8] Harada K, Friedman M, Lopez JJ, et al. Vascular endothelial growth factor administration in chronic myocardial ischemia [J]. Am J Physiol, 1996, 270(5 Pt 2): H1791-H1802.

[9] Eichmann A, Simons M. VEGF signaling inside vascular endothelial cells and beyond [J]. Curr Opin Cell Biol, 2012, 24(2): 188-193.

[10] Zhao T, Zhao W, Chen Y, et al. Vascular endothelial growth factor (VEGF)-A: role on cardiac angiogenesis following myocardial infarction [J]. Microvasc Res, 2010, 80(2): 188-194.

[11] Koch S, Tugues S, Li X, et al. Signal transduction by vascular endothelial growth factor receptors [J]. Biochem J, 2011, 437(2): 169-183.

[12] Kaur S, Martin-Manso G, Pendrak ML, et al. Thrombospondin-1 inhibits VEGF receptor-2 signaling by disrupting its association with CD47 [J]. J Biol Chem, 2010, 285(50): 38923-38932.

[13] Cheng C, Li P, Wang YG, et al. Study on the expression of VEGF and HIF-1α in infarct area of rats with AMI [J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci, 2016, 20(1): 115-119.

[14] Ai F, Chen M, Li W, et al. Danshen improves damaged cardiac angiogenesis and cardiac function induced by myocardial infarction by modulating HIF1α/VEGFA signaling pathway [J]. Int J Clin Exp Med, 2015, 8(10): 18311-18318.

[15] Luan X, Gao YG, Guan YY, et al. Platycodin D inhibits tumor growth by antiangiogenic activity via blocking VEGFR2-mediated signaling pathway [J]. Toxicol Appl Pharmacol, 2014, 281(1): 118-124.

[16] Tang Y, Gan X, Cheheltani R, et al. Targeted delivery of vascular endothelial growth factor improves stem cell therapy in a rat myocardial infarction model [J]. Nanomedicine, 2014, 10(8): 1711-1718.

[17] Korc M, Friesel RE. The role of fibroblast growth factors in tumor growth [J]. Curr Cancer Drug Targets, 2009, 9(5): 639-651.

[18] Powers CJ, McLeskey SW, Wellstein A. Fibroblast growth factors, their receptors and signaling [J]. Endocr Relat Cancer, 2000, 7(3): 165-197.

[19] B?ttcher RT, Niehrs C. Fibroblast growth factor signaling during early vertebrate development [J]. Endocr Rev, 2005, 26(1): 63-77.

[20] Zhao T, Zhao W, Chen Y, et al. Acidic and basic fibroblast growth factors involved in cardiac angiogenesis following infarction [J]. Int J Cardiol, 2011, 152(3): 307-313.

[21] Chen WC, Lee BG, Park DW, et al. Controlled dual delivery of fibroblast growth factor-2 and Interleukin-10 by heparin-based coacervate synergistically enhances ischemic heart repair [J]. Biomaterials, 2015, 72: 138-151.

[22] Gao MH, Lai NC, McKirnan MD, et al. Increased regional function and perfusion after intracoronary delivery of adenovirus encoding fibroblast growth factor 4: report of preclinical data [J]. Hum Gene Ther, 2004, 15(6): 574-587.

[23] Dragneva G, Korpisalo P, Yl?-Herttuala S. Promoting blood vessel growth in ischemic diseases: challenges in translating preclinical potential into clinical success [J]. Dis Model Mech, 2013, 6(2): 312-322.

[24] Jayasankar V, Woo YJ, Pirolli TJ, et al. Induction of angiogenesis and inhibition of apoptosis by hepatocyte growth factor effectively treats postischemic heart failure [J]. J Card Surg, 2005, 20(1): 93-101.

[25] Ruvinov E, Leor J, Cohen S. The promotion of myocardial repair by the sequential delivery of IGF-1 and HGF from an injectable alginate biomaterial in a model of acute myocardial infarction [J]. Biomaterials, 2011, 32(2): 565-578.

[26] Wang Y, Ahmad N, Wani MA, et al. Hepatocyte growth factor prevents ventricular remodeling and dysfunction in mice via Akt pathway and angiogenesis [J]. J Mol Cell Cardiol, 2004, 37(5): 1041-1052.

[27] Tomita N, Morishita R, Taniyama Y, et al. Angiogenic property of hepatocyte growth factor is dependent on upregulation of essential transcription factor for angiogenesis, ets-1 [J]. Circulation, 2003, 107(10): 1411-1417.

[28] Kappel A, Schlaeger TM, Flamme I, et al. Role of SCL/Tal-1, GATA, and Ets transcription factor binding sites for the regulation ofFlk-1 expression during murine vascular development [J]. Blood, 2000, 96(9): 3078-3085.

[29] Lupo G, Motta C, Salmeri M, et al. Aninvitroretinoblastoma human triple culture model of angiogenesis: a modulatory effect of TGF-β [J]. Cancer Lett, 2014, 354(1): 181-188.

[30] Goumans MJ, Lebrin F, Valdimarsdottir G. Controlling the angiogenic switch: a balance between two distinct TGF-β receptor signaling pathways [J]. Trends Cardiovasc Med, 2003, 13(7): 301-307.

[31] Frangogiannis NG. The role of transforming growth factor (TGF)-β in the infarcted myocardium [J]. J Thorac Dis, 2017, 9(Suppl 1): S52-S63.

[32] Ota T, Fujii M, Sugizaki T, et al. Targets of transcriptional regulation by two distinct type I receptors for transforming growth factor-β in human umbilical vein endothelial cells [J]. J Cell Physiol, 2002, 193(3): 299-318.

[33] Pepper MS. Transforming growth factor-β: vasculogenesis, angiogenesis, and vessel wall integrity [J]. Cytokine Growth Factor Rev, 1997, 8(1): 21-43.

[34] Potente M, Gerhardt H, Carmeliet P. Basic and therapeutic aspects of angiogenesis [J]. Cell, 2011, 146(6): 873-887.

[35] Gaengel K, Genové G, Armulik A, et al. Endothelial-mural cell signaling in vascular development and angiogenesis [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol, 2009, 29(5): 630-638.

[36] Awada HK, Johnson NR, Wang Y. Sequential delivery of angiogenic growth factors improves revascularization and heart function after myocardial infarction [J]. J Control Release, 2015, 207: 7-17.

[37] Carmeliet P, Jain RK. Molecular mechanisms and clinical applications of angiogenesis [J]. Nature, 2011, 473(7347): 298-307.

[38] Alameddine RS, Yakan AS, Skouri H, et al. Cardiac and vascular toxicities of angiogenesis inhibitors: the other side of the coin [J]. Crit Rev Oncol Hematol, 2015, 96(2): 195-205.

[39] Kim I, Kim HG, So JN, et al. Angiopoietin-1 regulates endothelial cell survival through the phosphatidylinositol 3’-Kinase/Akt signal transduction pathway [J]. Circ Res, 2000, 86(1): 24-29.

[40] Lee SW, Kim WJ, Jun HO, et al. Angiopoietin-1 reduces vascular endothelial growth factor-induced brain endothelial permeability via upregulation of ZO-2 [J]. Int J Mol Med, 2009, 23(2): 279-284.

[41] Zhang H, Yuan YL, Wang Z, et al. Sequential, timely and controlled expression of hVEGF165 and Ang-1 effectively improves functional angiogenesis and cardiac functioninvivo[J]. Gene Ther, 2013, 20(9): 893-900.

[42] Davis S, Aldrich TH, Jones PF, et al. Isolation of angiopoietin-1, a ligand for the TIE2 receptor, by secretion-trap expression cloning [J]. Cell, 1996, 87(7): 1161-1169.

[43] Maisonpierre PC, Suri C, Jones PF, et al. Angiopoietin-2, a natural antagonist for Tie2 that disruptsinvivoangiogenesis [J]. Science, 1997, 277(5322): 55-60.

[44] Sandhu R, Teichert-Kuliszewska K, Nag S, et al. Reciprocal regulation of angiopoietin-1 and angiopoietin-2 following myocardial infarction in the rat [J]. Cardiovasc Res, 2004, 64(1): 115-124.

[45] English D, Garcia JG, Brindley DN. Platelet-released phospholipids link haemostasis and angiogenesis [J]. Cardiovasc Res, 2001, 49(3): 588-599.

[46] Pyne S, Pyne N. Sphingosine 1-phosphate signalling via the endothelial differentiation gene family of G-protein-coupled receptors [J]. Pharmacol Ther, 2000, 88(2): 115-131.