黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)東北黑腳麻雞免疫功能的影響

金 東 春

(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林 延吉 133002)

東北黑腳麻雞以“三高一低”，即可食部、氨基酸及維生素含量高，膽固醇含量低微而深受歡迎，尤其東北黑腳麻雞對(duì)東北氣候環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng),抗病力強(qiáng)，死亡率低，同時(shí)，因其肉質(zhì)嫩滑、皮爽、骨軟、鮮嫩味美，風(fēng)味獨(dú)特而廣受歡迎。但近年來(lái)，在抗生素和化學(xué)藥物等飼料添加劑所造成的畜禽產(chǎn)品的負(fù)面影響，人們對(duì)畜禽產(chǎn)品品質(zhì)的要求越來(lái)越苛刻。消費(fèi)者不但追求無(wú)污染、無(wú)殘留、無(wú)副作用，能增強(qiáng)機(jī)體免疫力，安全可靠、營(yíng)養(yǎng)豐富的無(wú)公害綠色食品，而且更關(guān)注純天然飼料飼養(yǎng)的禽類(lèi)產(chǎn)品。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)許多學(xué)者對(duì)中草藥添加劑進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)中草藥添加劑不但能夠增強(qiáng)畜禽的免疫器官，而且對(duì)提高機(jī)體免疫力有一定作用。因?yàn)樘烊恢胁菟幘哂刑烊恍浴⒍喟悬c(diǎn)、多功能性、毒副作用小、無(wú)環(huán)境污染、無(wú)殘留、無(wú)副作用，又能增強(qiáng)機(jī)體免疫力等特點(diǎn)，已成為國(guó)內(nèi)外研究飼料添加劑的研究熱點(diǎn)。

黃芪(Radix Astragali)是多年生草本植物，特別是東北黃芪具有喜冷涼，耐寒性強(qiáng)，含有甙類(lèi)、多糖、氨基酸及微量元素等多種有效成分，其中多糖含量較多。它不僅可以影響免疫器官的重量，而且促進(jìn)免疫細(xì)胞的增值分化，提高機(jī)體的體液免疫功能，促進(jìn)抗體的生成。黃芪多糖是黃芪的天然活性成分，能促進(jìn)機(jī)體非特異性和特異性免疫，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，黃芪成分中的黃芪多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能作用，目前黃芪多糖的研究主要集中在提高免疫器官指數(shù)[1-3]、增強(qiáng)免疫功能[4-9]、增加機(jī)體血清淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)、刺激淋巴細(xì)胞增殖影響免疫細(xì)胞信息傳導(dǎo)方面[10-15]及增加紅細(xì)胞分化成熟方面的研究[16]。

本試驗(yàn)以東北黑腳麻雞為研究對(duì)象，通過(guò)在基礎(chǔ)日糧中添加不同濃度的黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑，觀察對(duì)東北黑腳麻雞的血液生理生化指標(biāo)和免疫器官的影響，證實(shí)黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)東北黑腳麻雞的血液生理生化指標(biāo)和免疫器官有影響效果,為今后黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑的開(kāi)發(fā)研究提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

1) 雞飼養(yǎng)研究日糧組成 雞試驗(yàn)飼料是參照NRC(1994)，設(shè)計(jì)日糧和肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004版)[17]，并結(jié)合我國(guó)實(shí)際情況，執(zhí)行飼養(yǎng)配制，日糧配方及各組日糧營(yíng)養(yǎng)水平(表1、2)。

2) 復(fù)方中藥配方 黃芪復(fù)方中草藥由黃芪、東北人參莖、黨參、VA、VE等組成。

表1對(duì)照組基礎(chǔ)日糧組成

Table1Thebasaldietcompositionofthecontrolgroup(%)

組成成分日齡1～2122～4243～60玉米68．0068．0070．00豆粕21．0021．0021．00玉米麩6．707．005．00大豆油1．501．201．20檸檬酸鈉0．500．500．50碳酸鈣1．001．001．00碳酸氫鈣0．100．100．10DL蛋氨酸(40%)1．001．001．00礦物質(zhì)添加劑0．100．100．10維他命添加劑0．100．100．10總量100．00100．00100．00

表2 對(duì)照組基礎(chǔ)日糧營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

共設(shè)4個(gè)試驗(yàn)組，即3個(gè)試驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中分別添加1%、3%和6%的黃芪復(fù)方中草藥添加劑，試驗(yàn)期分別為40和60 d。

1.2.2 飼喂方法

試驗(yàn)選用健康1 d東北黑腳麻雞仔，將體重相近的120羽分為4組，每組30羽，飼養(yǎng)60 d對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)為實(shí)驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼料加復(fù)方中藥添加劑，采用舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食、飲水。

1.2.3 各組免疫器官指數(shù)測(cè)定

飼養(yǎng)60 d后，每組30羽東北黑腳麻雞中挑出體重相近的3羽?？崭? h后，在雞翅下靜脈采新鮮血液，脫臼致死，解剖剝離并摘取胸腺、脾臟和法氏囊，用濾紙拭去表面污血，稱(chēng)重/mg。

免疫器官指數(shù)的計(jì)算公式如下:

脾臟系數(shù)=[脾臟鮮重(mg)/活體重(g)]×10;

胸腺系數(shù)=[胸腺鮮重(mg)/活體重(g)]×10;

法氏囊系數(shù)=[法氏囊鮮重(mg)/活體重(g)]×10。

1.2.4 血液生化指標(biāo)的測(cè)定

分別在養(yǎng)殖40和60 d的東北黑腳麻雞各試驗(yàn)組中選取3羽體重相近的健康東北黑腳麻雞，空腹6 h后雞翅下靜脈真空管采血，用全自動(dòng)血液分析儀進(jìn)行測(cè)定。

1.2.5 血清中免疫球蛋白測(cè)定

分別在養(yǎng)殖40和60 d的東北黑腿麻雞中選取2羽體重相近的健康東北黑腳麻雞，空腹6 h后雞翅下靜脈采血，3 000 r/min離心10 min,分離血清，采用酶聯(lián)免疫技術(shù)測(cè)定,使用雞免疫球蛋白試劑盒(上海鈺博生物科技有限公司)，按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行測(cè)定。

1.2.6 數(shù)據(jù)處理與分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理，2組間比較用t檢驗(yàn)，以P<0.05,判斷為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫器官指數(shù)的檢測(cè)結(jié)果

對(duì)東北黑腳麻雞脾臟指數(shù)檢測(cè)結(jié)果如表3所示。試驗(yàn)Ⅰ組(40 d,15.00%)和試驗(yàn)Ⅰ組(60 d,17.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對(duì)照組,有顯著性差異(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,33.84%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,36.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對(duì)照組,有極顯著性差異(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,39.09%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,46.47%)的胸腺指數(shù)明顯高于對(duì)照組,有極顯著性差異(P<0.01)。說(shuō)明3%和6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)提高東北黑腳麻雞胸腺指數(shù)有影響。

表3東北麻雞免疫器官指數(shù)的影響

Table3TheeffectontheimmuneorgansoftheNortheastHeijiaoMAchicken

飼喂后天數(shù)/d項(xiàng)目指數(shù)對(duì)照組試驗(yàn)Ⅰ組試驗(yàn)Ⅱ組試驗(yàn)Ⅲ組40胸腺指數(shù)2．66±0．173．06±0．20b3．56±0．67a3．70±0．17a60胸腺指數(shù)2．69±0．113．16±0．20b3．66±0．37a3．94±0．24a40脾臟指數(shù)1．16±0．441．24±0．101．36±0．37b1．72±0．27a60脾臟指數(shù)1．34±0．171．26±0．201．46±0．671．62±0．15b40法氏囊指數(shù)1．03±0．421．06±0．471．13±0．14b1．17±0．34a60法氏囊指數(shù)0．93±0．421．03±0．121．09±0．221．13±0．42a

注：組間t檢驗(yàn)，同一行與對(duì)照組比較，b有顯著性差異P<0.05；a有極顯著性差異P<0.01,下同。

由表3可知，試驗(yàn)Ⅰ組(40 d,6.89%)和試驗(yàn)Ⅰ組(60 d,1.34%)的脾臟指數(shù)與對(duì)照組之間沒(méi)有顯著性差異；試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,17.24%)脾臟指數(shù)與對(duì)照組之間有顯著性差異(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,48.28%)脾臟指數(shù)明顯高于對(duì)照組，有極顯著性差異(P<0.01)，而試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,20.09%)的脾臟指數(shù)明顯高于對(duì)照組，有顯著性差異(P<0.01)。說(shuō)明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)提高60 d東北黑腳麻雞脾臟指數(shù)有影響。

由表3可知，試驗(yàn)Ⅰ組(40 d,13.00%)和試驗(yàn)Ⅰ組(60,8.00%)的法氏囊指數(shù)與對(duì)照組之間有顯著性差異；試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,8.00%)的法氏囊指數(shù)與對(duì)照組之間沒(méi)有顯著性差異，而試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,26%)的法氏囊指數(shù)與對(duì)照組有極顯著性差異(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,18.5%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,18.3%)的法氏囊指數(shù)與對(duì)照組比較，有極顯著性差異(P<0.01)。說(shuō)明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯延長(zhǎng)60 d東北黑腳麻雞法氏囊萎縮時(shí)間。

2.2 東北黑腳麻雞血象指標(biāo)測(cè)定

紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明(表4)，第40天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組(24.19%)與對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.01)；第60天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組(13.41%)與對(duì)照組相比有顯著差異(P<0.05)。說(shuō)明3%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d紅細(xì)胞數(shù)值。

白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明(表4)，第40天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組(13.65%)與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅲ組(33.90%)與對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01)；第60天時(shí)，試驗(yàn)Ⅱ組(14.14%)與對(duì)照組比較差異顯著(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅲ組(41.97%)與對(duì)照組比較差異極顯著(P<0.01)。說(shuō)明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑可明顯增加40和60 d的白細(xì)胞數(shù)值。

表4 對(duì)東北黑腳麻雞紅白細(xì)胞數(shù)量的影響

2.3 對(duì)東北黑腳麻雞的白細(xì)胞數(shù)量的影響

40和60 d東北黑腳麻雞血液中嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明(表5)，40和60 d試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組與對(duì)照組相比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)；而40和60 d淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明(表5)，試驗(yàn)Ⅲ組(7.60%,40 d)和試驗(yàn)Ⅲ組(8.03%,60 d)對(duì)照組比較呈顯著性差異(P<0.05)。說(shuō)明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)東北黑腳麻雞淋巴細(xì)胞有影響。

表5 對(duì)東北黑腳麻雞的白細(xì)胞亞群數(shù)量變化影響

2.4 對(duì)東北黑腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響

40和60 d組中總蛋白血清生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果表明(表6)，試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,15.78%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,16.33%)的總蛋白指數(shù)明顯高于對(duì)照組，且差異顯著(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,19.28%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,20.97%)的總蛋白指數(shù)明顯高于對(duì)照組，且差異顯著(P<0.01)。

由表6可知，試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,21.75%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,34.55%)的白蛋白指數(shù)明顯高于對(duì)照組，且差異極顯著(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,35.35%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,44.24%)的白蛋白指數(shù)明顯高于對(duì)照組，且差異極顯著(P<0.01)。

由表6可知，試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,14.24%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,19.14%)的球蛋白指數(shù)高于對(duì)照組，且差異顯著(P<0.01)。

說(shuō)明3%和6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑可顯著提高東北黑腳麻雞總蛋白、白蛋白和球蛋白指數(shù)。

表6 對(duì)東北黑腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響

2.5 血清中免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)含量測(cè)定結(jié)果

IgA的檢測(cè)結(jié)果表明(表7)，試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,19.4%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,20.6%)的IgA明顯高于對(duì)照組，且差異顯著(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,34.4%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,50.0%)的IgA明顯高于對(duì)照組,且差異極顯著(P<0.01)。表明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d組血清中IgA數(shù)值。

IgM的檢測(cè)結(jié)果表明(表7)，試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,28.13%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,43.01%)的IgM明顯高于對(duì)照組，且差異極顯著(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,34.71%)的Ig明顯高于對(duì)照組，且差異極顯著(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,20.0%)的IgM指數(shù)明顯高于對(duì)照組，差異顯著(P<0.05)。證明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯提高40和60 d血清中IgM數(shù)值。

IgG的檢測(cè)結(jié)果表明(表7)，試驗(yàn)Ⅱ組(40 d,21.38%)和試驗(yàn)Ⅱ組(60 d,20.25.01%)的IgG指數(shù)高于對(duì)照組,且差異顯著(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅲ組(40 d,13.10%)和試驗(yàn)Ⅲ組(60 d,3.17%)的IgG有顯著性差異(P<0.05)。說(shuō)明6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯提高40 d組血清中的IgG數(shù)值。

表7 對(duì)東北黑腳麻雞血清免疫球蛋白含量的影響

3 討論與分析

試驗(yàn)主要以黃芪為主，配以人參莖、黨參等組成的自擬中藥復(fù)方飼料添加劑，研究其對(duì)東北黑腳麻雞免疫功能的影響,觀察東北黑腿麻雞免疫器官指數(shù)和血清生化指標(biāo)。從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，40 d,6%和60 d,6%的黃芪復(fù)方中藥飼料添加劑可以明顯提高東北黑腳麻雞脾臟和胸腺指標(biāo)，進(jìn)而增強(qiáng)機(jī)體體液免疫功能，這與王福傳等[18]對(duì)黃芪、金銀花的研究結(jié)果一致。本文首次發(fā)現(xiàn)，60 d,6%的黃芪復(fù)方中草藥添加劑可以明顯延長(zhǎng)法氏囊萎縮時(shí)間，能明顯促進(jìn)東北黑腳麻雞生長(zhǎng)期法氏囊的生長(zhǎng)發(fā)育，這可能與添加維生素A和維生素E，提高了淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)換率和免疫功能的增加有關(guān)，但還有待于進(jìn)一步研究。

試驗(yàn)中6%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯有助于提高淋巴細(xì)胞的免疫水平，說(shuō)明黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)東北黑腳麻雞生理機(jī)能具有促進(jìn)作用。這與高微微等[14]的報(bào)道一致。3%黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑明顯提高了紅細(xì)胞免疫水平，說(shuō)明黃芪復(fù)方中草藥飼料添加劑對(duì)東北黑腳麻雞的生理機(jī)能具有促進(jìn)作用,這與楊海燕等[19]的報(bào)道一致。

該研究也發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)日糧中添加3%,6%黃芪復(fù)方中草藥添加劑明顯提高了40和60 d東北黑腳麻雞血清中的IgG和IgM含量，這表明3%和6%的黃芪復(fù)方添加劑可明顯促進(jìn)東北黑腳麻雞生長(zhǎng)后期免疫球蛋白的分泌，促進(jìn)免疫器官生長(zhǎng)發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體免疫細(xì)胞功能。

4 結(jié)論

6%黃芪復(fù)合中草藥飼料添加劑作用效果最明顯,不僅明顯提高東北黑腳麻雞胸腺免疫功能指數(shù)，免疫器官指數(shù)，也明顯地延長(zhǎng)了法氏囊萎縮時(shí)間，為今后黃芪為主方的復(fù)合中草藥飼料添加劑開(kāi)發(fā)研究提供理論依據(jù)。

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