血清膽紅素濃度及氧化修飾低密度脂蛋白濃度對冠狀動脈性疾病的影響與檢驗學(xué)研究

高艷麗　榮 陽　鄒 偉　榮根滿

（1 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 遼陽 111000；2 遼寧省遼陽市中心醫(yī)院醫(yī)務(wù)處，遼寧 遼陽 111000；3 遼寧省瓦房店市中心醫(yī)院，遼寧 瓦房店 116300；4 中鐵十九局集團中心醫(yī)院醫(yī)務(wù)科，遼寧 遼陽 111000）

冠狀動脈性疾?。╟oronary heart disease，CHD），據(jù)我們已知與發(fā)病有關(guān)的因素有高血壓、吸煙、飲酒、飲食、氣候等。有報道稱，低膽紅素濃度在冠心病患者中可視為與吸煙、高收縮壓一樣具有獨立的影響因素，而膽紅素是一種內(nèi)源性抗氧化物，可參與抗人體血清中低密度脂蛋白（LDL）的氧化修飾，從而減少粥樣斑塊脂質(zhì)含量。筆者對2015年在本院住院的冠心病患者血清膽紅素濃度及氧化修飾低密度脂蛋白濃度作了統(tǒng)計學(xué)方法及二者關(guān)系的分析，報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：2015年1月至2016年8月本院收治的冠心病患者160例，男96例，女64例，年齡52～73歲，平均60.5歲。均符合WHO冠心病診斷標準[1-2]且無腦、肝、膽、腎等方面疾??；對照組160例為本院健康體檢人群，其中男90例，女70例，年齡41～55歲，平均48.2歲。均排除心、腦、肝、膽、腎等疾病。所有受檢人員均抽取清晨空腹靜脈血2 mL，分別加于干燥速凝管中?；靹蚝笥?000轉(zhuǎn)/分鐘低速離心機中離心10 min，取上清液分別進行測定。

1.2儀器與試劑

1.2.1血清膽紅素：OLYMPUS AU-640全自動生化分析儀；標準品：奧林巴斯系統(tǒng)校準物，Cat No:66300。校準物中總膽紅素的值可溯源至美國標準物質(zhì)研究院（NIST）標準參考物質(zhì)（SRM）916a；試劑：奧林巴斯系統(tǒng)原裝試劑，樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上，批內(nèi)與批間分別小于9%和11%。

1.2.2OX-LDL試劑由廈門慧嘉生物科技有限公司提供，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗雙抗體夾心法檢測。

1.3方法

1.3.1奧林巴斯生化儀測定膽紅素應(yīng)用的是改良的重氮法，同時做獨立的樣品空白來消除標本中的內(nèi)源性干擾。

1.3.2應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中人氧化修飾低密度脂蛋白水平。

2　結(jié)　果

檢驗結(jié)果顯示，冠心病患者血清膽紅素濃度明顯低于正常健康人群血清膽紅素濃度，具有顯著可比性（P＜0.05）；冠心病患者血清氧化修飾低密度脂蛋白濃度明顯高于正常健康人群血清氧化修飾低密度脂蛋白濃度，具有顯著可比性（P＜0.05）。冠心病患者血清膽紅素濃度與氧化修飾低密度脂蛋白濃度較正常健康人群二者呈顯著可比的負相關(guān)（P＜0.05）。

3　討　論

膽紅素是一種內(nèi)源性抗氧化物，在生理氧濃度下的抗氧化能力比維生素C、E強。膽紅素在血漿中與白蛋白結(jié)合后，促使膽紅素C-10上的氫轉(zhuǎn)化為活性氫原子，極易與超氧陰離子等自由基結(jié)合，從而具有清除自由基的功能，參與維持人體氧化與抗氧化平衡[3-4]。因此，膽紅素降低、自由基升高將會導(dǎo)致體內(nèi)氧化能力增強，從而導(dǎo)致大量LDL被氧化。研究發(fā)現(xiàn)，血清膽紅素濃度和冠心病發(fā)病率呈反比關(guān)系，當(dāng)膽紅素濃度下降50%，發(fā)生動脈病變的危險性就增加47%。因此認為膽紅素可通過抗氧化作用延緩動脈粥樣硬化的形成。

CHD病理基礎(chǔ)是冠狀動脈粥樣硬化，低密度脂蛋白（LDL）是由極低密度脂蛋白（VLDL）轉(zhuǎn)變而來的。體內(nèi)2/3的LDL是通過受體介導(dǎo)途徑吸收入肝和肝外組織，而余下的1/3是通過一條“清掃者”通路而被清除的，在這一非受體通路中，巨噬細胞與LDL結(jié)合，吸收LDL中的膽固醇，這樣膽固醇就留在細胞內(nèi)，變成“泡沫”細胞。因此，LDL能夠進入動脈壁細胞，并帶入膽固醇。故LDL水平過高能致動脈粥樣硬化，使個體處于易患冠心病的危險中。膽紅素能中斷LDL脂質(zhì)過氧化物增殖鏈式反應(yīng)，抑制血漿中LDL氧化修飾，具有抑制OX-LDL所誘導(dǎo)的單核細胞的趨化性，血漿中低濃度的膽紅素可能是冠心病的一個獨立危險因素。體內(nèi)膽紅素與白蛋白結(jié)合后，存在于心室肌細胞部位，能阻止該部位產(chǎn)生氧自由基。膽紅素在體外能阻止LDL被2，2'-偶氮（2-丙基脒）的雙鹽酸鹽在37 ℃產(chǎn)生的氧自由基氧化修飾，從而抑制OX-LDL的形成。目前研究已經(jīng)證實，炎性反應(yīng)引起冠狀動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性降低并導(dǎo)致破裂是急性冠狀動脈綜合征發(fā)生的重要機制。隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)LDL被氧化修飾形成OX-LDL后其生物活性發(fā)生明顯改變，OX-LDL可激活血管內(nèi)皮細胞使其表達細胞黏附分子，促進炎性細胞的黏附和浸潤。同時單核（巨噬）細胞通過清道夫受體大量吞噬OX-LDL形成泡沫細胞，而泡沫細胞死亡可增加粥樣斑塊脂質(zhì)含量，使斑塊穩(wěn)定性降低[5-6]。此實驗可證明膽紅素是獨立影響冠狀動脈性疾病發(fā)生發(fā)展的因子，認為膽紅素具有防治冠狀動脈性疾病的作用，是一種潛在的防治冠心病的有效物質(zhì)。但其相互影響的機制尚未完全被揭示。由于血清膽紅素檢測方法簡便、可靠、直觀，標本來源方便，創(chuàng)傷小，易于接受。希望通過膽紅素的檢測可給臨床提供更多的診斷治療冠狀動脈性疾病的理論依據(jù)，及為健康體檢中血清膽紅素濃度低于平均參考范圍的亞健康人群提供警示及積極改善的作用，減少或消除產(chǎn)生疾病的痛苦，降低治療成本及不必要的醫(yī)療浪費。對低膽紅素代謝紊亂進行早期干預(yù)有可能預(yù)防心血管事件的發(fā)生，定期檢測CHD患者血清膽紅素，對評估CHD患者的預(yù)后和療效，從而改善并提高生存質(zhì)量有一定的價值，如何適當(dāng)提高CHD血清膽紅素濃度可能減緩或消除動脈粥樣硬化發(fā)生，從而為臨床治療CHD提供了一個新思路，值得進一步探索及研究[7-8]。