過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病的治療實驗

區(qū)超華 鐘楚俊 賀順連

摘 要：?? 為了減輕小瓜蟲病對觀賞魚養(yǎng)殖的嚴(yán)重危害，試驗選擇過氧乙酸對七彩神仙魚進(jìn)行殺滅小瓜蟲的有效性試驗，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行過氧乙酸對神仙魚急性毒性試驗，并在安全濃度下對患有小瓜蟲病的神仙魚進(jìn)行治療試驗。結(jié)果顯示：過氧乙酸對七彩神仙魚的安全濃度為8.55 mg/L，過氧乙酸在神仙魚安全濃度內(nèi)對小瓜蟲的幼蟲和包囊都具有較好的殺滅效果，過氧乙酸濃度在4.26～8.55 mg/L的治愈率達(dá)70%。

關(guān)鍵詞： 七彩神仙魚;小瓜蟲病;過氧乙酸;有效性;急性毒性

?多子小瓜蟲（ Ichthyophthirius marinus ）屬原生動物門，小瓜蟲屬，主要寄生在體表和鰓，形成肉眼可見的白色小點狀胞囊 ?[1] 。小瓜蟲廣泛分布各大水域，感染淡水魚類、海水魚類和兩棲動物，感染力強(qiáng)，病程急，容易在春末夏初和夏秋交替季節(jié)突發(fā)，造成繼發(fā)感染和交叉感染，對養(yǎng)殖業(yè)尤其是觀賞魚養(yǎng)殖帶來嚴(yán)重的危害 ?[2-7] 。

被稱之為“熱帶魚之后”的神仙魚 ?[8] ，是熱帶觀賞魚家族的主要成員之一，深受廣大觀賞魚愛好者喜歡。但神仙魚經(jīng)常受到小瓜蟲病的危害，給養(yǎng)殖生產(chǎn)造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前有些藥物對殺滅離體的小瓜蟲取得了較好的療效 ?[9-15] ，但對于小瓜蟲病的防治仍以化學(xué)藥物防治為主 ?[2-7，16] ，能殺滅神仙魚身上的小瓜蟲的藥物和試驗暫未見報道。

過氧乙酸對不同發(fā)育時期的離體小瓜蟲及包囊都有一定的殺滅作用 ?[17] 。而過氧乙酸既是良好氧化劑，又是廣譜、高效、速效、廉價的滅菌劑，具備增氧、殺菌、殺蟲、抑藻、改善水質(zhì)等多種作用，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中已有一定應(yīng)用 ?[18] 。因此我們選擇了過氧乙酸對神仙魚進(jìn)行殺滅小瓜蟲的有效性試驗，在此基礎(chǔ)上再進(jìn)行急性毒性試驗，并在安全濃度下對患有小瓜蟲病的神仙魚進(jìn)行治療試驗。

1 材料

1.1 實驗材料

試驗藥劑：天津福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)的過氧乙酸，按照說明書A液和B液（1∶1）混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。試驗魚為七彩神仙魚，購自廣州芳村花鳥蟲魚市場，平均體重為1.7 g，全長約為4～5 cm，試驗魚暫養(yǎng)7 d，待適應(yīng)環(huán)境且確認(rèn)健康無疾病后用于試驗。

1.2 實驗容具

塑料方形桶（長59 cm，寬49 cm，高40 cm）、增氧機(jī)、過濾泵、溫度計、飼料、25目撈網(wǎng)、燒杯、量筒、廣口瓶、注射器等。

2 實驗方法與結(jié)果

2.1 過氧乙酸對小瓜蟲有效性預(yù)試驗

實驗室養(yǎng)殖的5 cm左右的金魚魚體和鰓部均有白點，病魚食欲減退，活動能力較弱，相繼出現(xiàn)死亡，鏡檢后發(fā)現(xiàn)符合小瓜蟲形態(tài)特征。取10尾已感染小瓜蟲的金魚和250尾健康神仙魚混養(yǎng)?；祓B(yǎng)7 d后，可觀察到所有魚的魚鰓、體表皆有白點，同時分泌大量黏液，活動能力減弱，攝食量減少，符合小瓜蟲病的特征，并隨機(jī)取樣進(jìn)行鏡檢，可見小瓜蟲活蟲蟲體，表明所有試驗魚均感染小瓜蟲病，且原用作感染用的病魚已經(jīng)死亡。

將感染了小瓜蟲的七彩神仙魚放入待試藥液中，藥液濃度參考趙飛等 ?[17] 所使用劑量，按等對數(shù)間距設(shè)計5個梯度濃度。試驗魚飼養(yǎng)在塑料方形桶，每桶放曝氣自來水50 L，每桶隨機(jī)放入30尾已感染小瓜蟲的七彩神仙魚，試驗期間水溫20.5～23℃，曝氣自來水pH值7.4，溶解氧4～5 mg/L。記錄觀察各組試驗魚的行為及死亡等效應(yīng)。試驗結(jié)果如表1所示。

2.2 過氧乙酸對神仙魚的急性毒性試驗

制定過氧乙酸對七彩神仙魚的急性毒性試驗濃度梯度，根據(jù)預(yù)試驗初步確定七彩神仙魚全死和全活的濃度范圍，按等對數(shù)間距設(shè)計5個梯度濃度試驗組和一個空白對照組 ?[19] 。隨機(jī)取200尾七彩神仙魚，每個處理隨機(jī)放20尾七彩神仙魚，實驗條件為曝氣自來水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24 ℃，溶解氧4～5 mg/L，采用半靜態(tài)喂食試驗法，每24 h更換一次藥液，觀察記錄各組試驗魚的中毒行為、癥狀及死亡率，試驗時間96 h，試驗結(jié)果如表2所示。計算過氧乙酸對神仙魚的半致死濃度LC 50 和安全濃度SC：實驗結(jié)果如表3所示。

X m ：最大劑量組劑量的對數(shù)值。 i ：相鄰兩組劑量（d）對數(shù)值之差，或相鄰兩組高劑量與低劑量之比的對數(shù)。 P ：各組動物的死亡率，用小數(shù)表示。Σ P ：為各組動物死亡率的總和。 n ：每組動物數(shù)。S x50 ：logLC 50 的標(biāo)準(zhǔn)誤。SC 50 ：安全濃度。

2.3 過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病治療試驗

用25目自制手抄網(wǎng)從水中采取蟲體，或魚體表病灶上采取病原體，在顯微鏡下進(jìn)行觀察，根據(jù)觀察結(jié)果確定小瓜蟲的發(fā)育階段和感染強(qiáng)度。實驗條件;曝氣自來水pH值7.2～7.4，水溫控制在23～24℃，溶解氧4～5 mg/L。試驗結(jié)果如表4所示。

3 結(jié)論和分析

3.1 過氧乙酸對小瓜蟲有效性預(yù)試驗

根據(jù)表1可知，空白對照組的試驗魚在24 h內(nèi)就全部死亡，而其他不同過氧乙酸濃度組在96 h內(nèi)都還有部分試驗魚存活，除藥液濃度為1.6 mg/L組，其他高濃度組的在2個月后仍有部分試驗魚存活，且死亡數(shù)并未增加，表明過氧乙酸對治療小瓜蟲是有效果的，也保證后面的試驗是有意義的。

3.2 過氧乙酸對神仙魚的急性毒性試驗

根據(jù)表3可知，過氧乙酸對七彩神仙魚的安全濃度為8.55 mg/L，用過氧乙酸治療患病的七彩神仙魚時，藥液濃度不可大于安全濃度8.55 mg/L，否則會危害到魚也會影響水環(huán)境。

3.3 過氧乙酸對神仙魚小瓜蟲病治療試驗

根據(jù)表4，試驗開始12 h后，Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）中可用肉眼觀察到實驗魚體表白點變淡。24 h后Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）實驗魚體表白點消失，Ⅳ組（1.07 mg/L）實驗魚體表白點變淡。Ⅴ組（0.55 mg/L）1尾魚出現(xiàn)死亡，對照組2尾魚出現(xiàn)死亡。36 h后Ⅰ組（8.55 mg/L）、Ⅱ組（4.26 mg/L）、Ⅲ組（2.14 mg/L）、Ⅳ組（1.07 mg/L）均無異?，F(xiàn)象，Ⅴ組（0.55 mg/L）及對照組實驗魚全部死亡，鏡檢后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組雖觀察到小瓜蟲蟲體，但纖毛不動，確認(rèn)已死亡。在Ⅴ組及對照組中，發(fā)現(xiàn)大量游動小瓜蟲。在安全濃度下，治療效果與藥液濃度呈正比。本實驗結(jié)果表明，過氧乙酸在神仙魚安全濃度內(nèi)對小瓜蟲的幼蟲和包囊都具有較好的殺滅效果，治愈率達(dá)70%。

參考文獻(xiàn)：

[1] ?陳達(dá)麗.淡水魚小瓜蟲病的病原、病理及藥物和免疫預(yù)防研究 [D].重慶：西南師范大學(xué)，2004：13-16.

[2] 伍惠生.觀賞魚類的小瓜蟲病及防治方法 [J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，1990（6）：19-20.

[3] 馮桂榕，王玉群.小瓜蟲的生活史和防治 [J].齊魯漁業(yè)，2008（6）：7-9.

[4] 王玉群，彭勁松，楊土金.金鯧感染刺激隱核蟲（海水小瓜蟲）的診斷和防治[J].科學(xué)養(yǎng)魚.2010 （12） ：6

[5] 朱瑜，覃棟明，林崗.臺灣泥鰍小瓜蟲病的防治 [J].科學(xué)養(yǎng)魚.2016（9）：59-60

[6] 樊海平，林煜，薛凌展.一例大刺鰍小瓜蟲病的有效治療[J].科學(xué)養(yǎng)魚.2016（7）：6

[7] 楊成輝，隋波.金鱒幼魚小瓜蟲病治療試驗[J].科學(xué)養(yǎng)魚，2007，（5）：59，85.

[8] 海盜，劉宇吳，勐白明，等.“熱帶魚之后”—神仙魚[J].水族世界，2009（2）：24-37.

[9] 鉏超，張其中，羅芬.20 種中草藥殺滅離體小瓜蟲的藥效研究[J].淡水漁業(yè)，2010，40（1）：55-60.

[10] ?張善忠，張玉貴，李成.不同發(fā)育階段多子小瓜蟲對幾種藥物的敏感性[J].長江大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2013，10（17）：51-54.

[11] 陳達(dá)麗，張其中.殺滅離體小瓜蟲的藥物試驗[J].淡水漁業(yè)，2005，35（1）：45-46.

[12] 黃江峰，鄧勇輝，饒毅，等.環(huán)烷酸銅對離體小瓜蟲殺滅效果的研究[J].江西水產(chǎn)科技，2015（02）：30-31.

[13] 姚嘉赟，徐洋，袁雪梅，等.丁香酚的分離及其殺多子小瓜蟲活性研究[J].水產(chǎn)科學(xué)，2016（06）：669-674.

[14] 徐先棟，周智勇，盛銀平，等.青蒿末水浸提液對多子小瓜蟲殺滅效果的研究[J].水產(chǎn)科技情報，2012，39（2）：70-72.

[15] 梁靖涵，張其中，付耀武，等.肉桂活性成分肉桂醛殺滅離體多子小瓜蟲效果[J].水產(chǎn)學(xué)報，2014，38（3）：457-463.

[16] 黃斌，常紅軍.不同藥物對金魚小瓜蟲病的防治效果[J].水產(chǎn)科學(xué)，2003（02）：18-20.

[17] 趙飛，韓剛，譚愛萍，等.過氧乙酸對小瓜蟲幼蟲和包囊的殺滅效果[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，15：29-30.

[18] 張帥，潘連德.過氧乙酸在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2017，38（1）：7-10.

[19] 周永欣，章宗涉.1989.水生生物毒性試驗方法[M].北京：農(nóng)業(yè)出版社：109-133.