防治小麥赤霉病有效藥劑的篩選與田間藥效試驗(yàn)

徐娜娜，宋化穩(wěn)，莊占興，高德良，徐 英

（山東省農(nóng)藥科學(xué)研究院，山東省化學(xué)農(nóng)藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東濟(jì)南250033）

小麥赤霉病由禾谷鐮孢菌（Fusarium graminearum）引起，是中國(guó)小麥生產(chǎn)中最為嚴(yán)重的病害之一[1]。近年來(lái)，亞洲、歐洲和南美等地小麥赤霉病發(fā)展呈蔓延上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響小麥產(chǎn)量[2-3]。小麥赤霉病的發(fā)生，不僅嚴(yán)重降低小麥產(chǎn)量，而且病菌產(chǎn)生的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）和雪腐鐮刀菌烯醇（nivalenol，NIV）毒素可影響人、畜的健康安全[4]。目前還必須依賴(lài)化學(xué)防治來(lái)主動(dòng)干預(yù)，以控制小麥赤霉病危害[5]。為此，本試驗(yàn)在選取部分藥劑及將咪鮮胺與戊唑醇不同配比進(jìn)行毒力測(cè)定的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了田間藥效試驗(yàn)，為小麥赤霉病的進(jìn)一步防治提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

小麥赤霉病菌為山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定，保存于4℃PDA斜面，于試驗(yàn)前接種于PDA平板，26℃培養(yǎng)3 d，備用。

1.2 供試藥劑

供試藥劑（生產(chǎn)廠家）分別為：97%咪鮮胺原藥（天津市華宇農(nóng)藥有限公司），97%戊唑醇原藥（上海禾本藥業(yè)有限公司），95%苯醚甲環(huán)唑原藥（上海生農(nóng)生化制品有限公司），95%噻呋酰胺原藥（寧波三江益農(nóng)化學(xué)有限公司），95%甲基硫菌靈原藥（山東濰坊潤(rùn)豐化工股份有限公司），70.3%春雷霉素原藥（陜西康禾立豐生物科技藥業(yè)有限公司），25%咪鮮胺乳油（江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司），25%戊唑醇可濕性粉劑（江蘇省鹽城雙寧農(nóng)化有限公司），10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑（瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司），240 g/L噻呋酰胺懸浮劑（山東兆豐年生物科技有限公司），70%甲基硫菌靈可濕性粉劑（江蘇藍(lán)豐生物化工股份有限公司），40%多菌靈懸浮劑（江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司）。400 g/L咪鮮胺·戊唑醇（2∶1）水乳劑，本實(shí)驗(yàn)室用上述原藥加工而成。

1.3 幾種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

采用菌絲生長(zhǎng)速率法[6]測(cè)定97%咪鮮胺原藥、97%戊唑醇原藥、95%苯醚甲環(huán)唑原藥、95%噻呋酰胺原藥、95%甲基硫菌靈原藥和70.3%春雷霉素原藥6種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的抑制作用。在無(wú)菌操作下，將供試藥劑分別配成不同濃度的藥液，并將97%咪鮮胺原藥與97%戊唑醇原藥以（1∶3）、（1∶2）、（1∶1）、（2∶1）、（3∶1）比例復(fù)配，分別制作含藥PDA平板，將直徑5 mm的菌餅置于含藥平板中央，每個(gè)藥劑設(shè)置5個(gè)濃度處理，每處理設(shè)置3個(gè)重復(fù)，以不加藥劑的PDA平板作為空白對(duì)照。置于26℃培養(yǎng)72 h，用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算各處理菌落增長(zhǎng)直徑及抑制率。數(shù)據(jù)采用DPS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

抑制率（%）＝（對(duì)照區(qū)菌落增長(zhǎng)直徑-處理區(qū)菌落增長(zhǎng)直徑）／對(duì)照區(qū)菌落增長(zhǎng)直徑×100。

以設(shè)定的質(zhì)量濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)（x），抑制率的機(jī)率值為縱坐標(biāo)（y），求出各藥劑對(duì)供試菌株的毒力回歸方程及有效抑制中濃度（EC50值）；組合物配方的室內(nèi)篩選采用孫云沛共毒系數(shù)法[7]計(jì)算混配藥劑的共毒系數(shù)（CTC），評(píng)價(jià)藥劑混配效果。共毒系數(shù)大于120為增效作用，小于90為拮抗作用，90～120為加成作用。有關(guān)計(jì)算如下：

毒力指數(shù)（TI）=（標(biāo)準(zhǔn)藥劑的EC50/供試藥劑的EC50）×100；

混劑實(shí)際毒力指數(shù)（ATI）=（標(biāo)準(zhǔn)藥劑的EC50/藥劑A和B混用的EC50）×100；

混劑理論毒力指數(shù)（TTI）=ATI（A）×a+ATI（B）×b；

(a：表示藥劑A在混劑中的百分含量；b：表示藥劑B在混劑中的百分含量。)

共毒系數(shù)CTC=（混劑實(shí)際毒力指數(shù)ATI/混劑理論毒力指數(shù)TTI）×100。

1.4幾種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病的田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)地基本情況：試驗(yàn)設(shè)在山東省章丘市明水鎮(zhèn)宮王村冬小麥田，為小麥赤霉病多發(fā)地塊，常規(guī)水肥管理。

試驗(yàn)設(shè)計(jì)：每種供試藥劑選用常規(guī)質(zhì)量濃度，每處理15 m2，以清水為對(duì)照，重復(fù)4次。于2016年4月25日，小麥齊穗期進(jìn)行第1次施藥；2016年5月2日進(jìn)行第2次施藥，其中240 g/L噻呋酰胺懸浮劑僅在小麥齊穗期用藥1次，使用衛(wèi)士牌WS-16P背負(fù)式手動(dòng)噴霧器（山東衛(wèi)士植保機(jī)械有限公司生產(chǎn)）均勻噴霧，每小區(qū)用水量1.2 L。

防效調(diào)查方法：于2016年5月24日，小麥乳熟期，每小區(qū)對(duì)角線5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查100穗，以枯穗面積占整個(gè)穗面積的百分率來(lái)分級(jí)，記錄各級(jí)病穗數(shù)和調(diào)查總穗數(shù)。

小麥赤霉病分級(jí)方法如下[8]：

0級(jí)：全穗無(wú)??；1級(jí)：枯穗面積占全穗面積的1/4以下；3級(jí)：枯穗面積占全穗面積的1/4～1/2；5級(jí)：枯穗面積占全穗面積的1/2～3/4；7級(jí)：枯穗面積占全穗面積的3/4以上。

根據(jù)小麥赤霉病的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，以病情指數(shù)作為防治效果，計(jì)算公式如下：

病穗率＝病穗數(shù)／調(diào)查總穗數(shù)×100；

病情指數(shù)＝∑（各級(jí)病穗數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）／（調(diào)查總穗數(shù)×7）×100；

防治效果（%）＝（空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)－藥劑處理區(qū)病情指數(shù)）／空白對(duì)照區(qū)病情指數(shù)×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 幾種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

由表1可知，在6種供試藥劑中，97%咪鮮胺原藥的抑菌活性最高，EC50為0.054 3 mg/L，95%噻呋酰胺原藥、97%戊唑醇原藥、95%苯醚甲環(huán)唑原藥和95%甲基硫菌靈原藥活性依次降低，EC50分別為0.319 7、0.627 2、1.313 5 和 6.439 0 mg/L，70.3%春雷霉素原藥抑菌活性最低，EC50為17.521 9 mg/L。

表1 不同殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

2.2 咪鮮胺與戊唑醇不同配比對(duì)小麥赤霉病菌室內(nèi)聯(lián)合作用

咪鮮胺與戊唑醇不同配比對(duì)小麥赤霉病菌室內(nèi)聯(lián)合作用測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。從表2可見(jiàn)，97%咪鮮胺原藥與 97%戊唑醇原藥以（1∶3）、（1∶2）、（1∶1）、（2∶1）、（3∶1） 比例復(fù)配的共毒系數(shù)分別為122.83、126.41、129.50、136.61、127.26，均大于 120，表現(xiàn)出不同程度的增效作用，其中97%咪鮮胺原藥與97%戊唑醇原藥以2∶1比例復(fù)配時(shí)的共毒系數(shù)最高，增效作用最明顯。

表2 97%咪鮮胺原藥(A)與97%戊唑醇原藥(B)不同配比對(duì)小麥赤霉病菌室內(nèi)聯(lián)合作用

2.3 幾種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病的田間藥效試驗(yàn)

表3田間試驗(yàn)結(jié)果表明，不同殺菌劑2次施藥后對(duì)小麥赤霉病的防治效果，以400 g/L咪鮮胺·戊唑醇水乳劑最好（74.92%），顯著高于25%咪鮮胺乳油和25%戊唑醇可濕性粉劑單劑的防治效果。6種單劑中，以25%戊唑醇可濕性粉劑防治效果最好（70.97%），與其他各處理差異顯著（P＜0.05），其次為10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、25%咪鮮胺乳油、70%甲基硫菌靈可濕性粉劑、40%多菌靈懸浮劑和240 g/L噻呋酰胺懸浮劑，防治效果分別為66.62%、66.60%、64.95%、63.87%和61.78%。

表3 不同殺菌劑對(duì)小麥赤霉病的防治效果

3 討論與結(jié)論

本試驗(yàn)采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了6種殺菌劑對(duì)小麥赤霉病菌菌絲的生長(zhǎng)抑制作用，97%咪鮮胺原藥、97%戊唑醇原藥、95%噻呋酰胺原藥和95%苯醚甲環(huán)唑原藥對(duì)小麥赤霉病菌抑制效果較好，與宋陽(yáng)陽(yáng)[9]、馬雪麗等[10]對(duì)于小麥赤霉病菌敏感性的研究結(jié)果一致，70.3%春雷霉素原藥抑制效果較差。

97%咪鮮胺原藥與97%戊唑醇原藥復(fù)配用于防治小麥赤霉病已有多家企業(yè)進(jìn)行了登記[11]，但配比存在很大差異，為此筆者測(cè)定了97%咪鮮胺原藥與97%戊唑醇原藥不同配比對(duì)小麥赤霉病菌室內(nèi)聯(lián)合作用，各配比均表現(xiàn)出不同程度的增效作用，其中97%咪鮮胺原藥與97%戊唑醇原藥以2∶1比例復(fù)配時(shí)的共毒系數(shù)最高，增效作用最顯著，因此，按此比例加工的400 g/L咪鮮胺·戊唑醇水乳劑進(jìn)行大田藥效試驗(yàn)有較大應(yīng)用價(jià)值。

田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明，25%咪鮮胺乳油、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑、25%戊唑醇可濕性粉劑、70%甲基硫菌靈可濕性粉劑、40%多菌靈懸浮劑和240 g/L噻呋酰胺懸浮劑6種單劑對(duì)小麥赤霉病均有較好防效，可以用于大田小麥赤霉病防治。其中400 g/L咪鮮胺·戊唑醇水乳劑對(duì)小麥赤霉病防治效果最好，顯著高于25%咪鮮胺乳油或25%戊唑醇可濕性粉劑單獨(dú)使用的防治效果，建議在大田中推廣應(yīng)用，以延長(zhǎng)咪鮮胺與戊唑醇2種藥劑的使用壽命。

室內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果與田間藥效試驗(yàn)結(jié)果基本相吻合，EC50較小的97%咪鮮胺原藥和97%戊唑醇原藥在大田試驗(yàn)中表現(xiàn)出較好的防治效果[12-13]，兩者復(fù)配后效果更佳[14-15]。而室內(nèi)篩選的對(duì)小麥赤霉病菌有較好抑制作用的95%噻呋酰胺原藥，在田間使用效果一般，可進(jìn)一步探索其與效果較好的97%戊唑醇原藥、97%咪鮮胺原藥等混配使用，提高小麥赤霉病的防治效果，并延緩赤霉病菌抗藥性產(chǎn)生。

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