小龍蝦細(xì)菌病害研究進(jìn)展

趙楠，武秀麗，趙桂華,3

（1.江蘇農(nóng)林職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 句容 212400；2.句容市人民醫(yī)院，江蘇 句容 212400；3.句容市潤(rùn)泰生物科技有限公司，江蘇 句容 212400）

細(xì)菌屬于原核生物，種類(lèi)眾多，絕大多數(shù)對(duì)人類(lèi)有益，極少數(shù)可引起動(dòng)物病害和植物病害，是兼性寄生菌。小龍蝦細(xì)菌病是最常見(jiàn)、分布最廣的一類(lèi)病害，由許多兼性寄生細(xì)菌侵染引起。從小龍蝦上分離到的細(xì)菌有10屬，包括不動(dòng)桿菌屬（Acinetobacter）、氣單胞菌屬（Aeromonas）、芽孢桿菌屬（Bacillus）、枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）、棒狀桿菌屬（Corynebacterium）、黃桿菌屬（Flavobacterium）、微球菌屬（Micrococcus）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、葡萄球菌屬（Staphylococcus）和弧菌屬（Vibrio）[1-7]。在一些情況下，在人工養(yǎng)殖場(chǎng)和處于野生狀態(tài)的小龍蝦，細(xì)菌感染會(huì)導(dǎo)致死亡，特別是在不良水體環(huán)境條件下的病死率更高[2-3]。

目前，國(guó)內(nèi)針對(duì)小龍蝦細(xì)菌性疾病的報(bào)道較少。病原細(xì)菌和所致病害具有多樣性，一種細(xì)菌可引起多種甲殼動(dòng)物的疾病，一種疾病也可由多種細(xì)菌引起，如腸道細(xì)菌性感染有5屬細(xì)菌引起，細(xì)菌性甲殼病和淡水螯蝦菌血癥分別由3屬細(xì)菌引起[6]。假單胞細(xì)菌（Pseudomonas sp.）可引起腸道細(xì)菌性感染和細(xì)菌性甲殼病。小龍蝦菌血癥（Bacteraemia）表現(xiàn)為血管周?chē)牧馨脱芗?xì)胞聚合、形成結(jié)節(jié)[3,7-9]。事實(shí)上，任何一種小龍蝦病害都不是由單一因素引起的，它與水環(huán)境中的多因素有關(guān)，故養(yǎng)殖水體是一個(gè)復(fù)合體。

長(zhǎng)期以來(lái)，小龍蝦的細(xì)菌性疾病被認(rèn)為是小龍蝦的次要病害，或者是與養(yǎng)殖環(huán)境惡化有關(guān)的一類(lèi)病害，導(dǎo)致人們出現(xiàn)這種看法的主要原因，可能是因?yàn)榇蠖鄶?shù)病原菌都是屬于堿性寄生細(xì)菌的緣故。當(dāng)養(yǎng)殖池塘環(huán)境惡化時(shí)，細(xì)菌致病力就可能發(fā)生變化而導(dǎo)致小龍蝦發(fā)生各種細(xì)菌性疾病。

1 細(xì)菌疾病的種類(lèi)

1.1 腸道細(xì)菌性感染

由多種細(xì)菌組成小龍蝦腸道內(nèi)的正常微生物菌群，主要有枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、不動(dòng)桿菌屬（Acinetobacter）、腸桿菌屬（Enterobacter）和產(chǎn)堿桿菌屬（Alcaligenes）的細(xì)菌。當(dāng)小龍蝦受到外界比較強(qiáng)烈的應(yīng)激性刺激，或者受到環(huán)境中某種強(qiáng)毒菌株侵染，就有可能導(dǎo)致其腸道內(nèi)正常微生物菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，部分細(xì)菌可能會(huì)在胃、腸道，甚至肝胰腺中異常增殖，導(dǎo)致腸上皮組織壞死，大部分肝胰腺組織也可能因此而受到損傷[6，10]。

1.2 甲殼病

小龍蝦甲殼病與細(xì)菌和真菌有關(guān)。當(dāng)外骨骼被侵蝕時(shí)可致小龍蝦死亡。該病害由氣單胞菌屬（Aeromonas）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、黏細(xì)菌（Myxobacteria）、枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）的細(xì)菌引起[6,10]。

1.3 爛鰓病

小龍蝦鰓表面通常會(huì)附著絲狀藻類(lèi)或者革蘭陰性菌，還可能存在一些原生生物，在正常情況下，鰓上附著這些微生物不會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重后果。但是，小龍蝦爛鰓病的發(fā)生通常與養(yǎng)殖環(huán)境水質(zhì)惡化有關(guān)，如果不采取適當(dāng)措施控制養(yǎng)殖水質(zhì)，細(xì)菌就會(huì)在鰓部大量增殖而導(dǎo)致鰓組織腐爛，直接影響鰓組織對(duì)水過(guò)濾和對(duì)氧氣吸收功能，進(jìn)而導(dǎo)致小龍蝦機(jī)體缺氧而窒息死亡。

1.4 菌血癥

在小龍蝦的血淋巴中可以檢查到大量弧菌屬（Vibrio）、氣單胞菌屬（Aeromonas）和假單胞菌屬（Pseudomonas）的細(xì)菌，但是，現(xiàn)在還難以肯定在小龍蝦血淋巴中觀察到細(xì)菌是否意味著就是病原菌，因?yàn)樾↓埼r是并沒(méi)有顯示出任何生病癥狀。小龍蝦菌血癥的臨床癥狀只有在瀕臨死亡的小龍蝦中才能觀察到，主要表現(xiàn)為患病小龍蝦意識(shí)喪失，并呈現(xiàn)麻痹狀態(tài)。其實(shí)，即使最有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員也難以描述小龍蝦“菌血癥”的初期臨床癥狀，判斷這種疾病還需要依靠患病小龍蝦病程的進(jìn)一步發(fā)展[6]。

2 不同細(xì)菌引起的病害

2.1 螯蝦立克次體（Coxiella cheraxi）

感染小龍蝦的類(lèi)立克次體有兩種類(lèi)型：第一種類(lèi)型立克次體在小龍蝦體內(nèi)全身分布，屬于系統(tǒng)感染，這類(lèi)立克次體被命名為螯蝦立克次體（Coxiella cheraxi），除了感染小龍蝦外，也與澳洲淡水龍蝦（Cherax quadricarinatus）的大量死亡相關(guān)的。第二種類(lèi)型立克次體僅感染小龍蝦肝胰腺上皮，在其他的淡水螯蝦中尚未發(fā)現(xiàn)[6]。

2.2 螺原體（Spiroplasma）

螺原體是小的、螺旋形細(xì)菌，與節(jié)肢動(dòng)物，蜱蟲(chóng)和植物有關(guān)，至今已描述40種[13]。螺原體（Spiroplasma spp.）作為雄性昆蟲(chóng)上的微生物，能干擾一些昆蟲(chóng)種群的性別比[14-15]。至今，沒(méi)有提供證據(jù)證明，螺原體能干擾小龍蝦的性別比例的實(shí)例。在被侵染的小龍蝦（P.clarkii）上，螺原體是小龍蝦衰弱病的病原；也能引起中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）的顫抖病（tremor disease）。但無(wú)法證明淡水蟹把螺原體傳播給小龍蝦[16]。Bi K等[17]通過(guò)分子測(cè)序證明，中華絨螯蟹、小龍蝦、南美白對(duì)蝦上螺原體是同一個(gè)種，與非凡螺原體（Spiroplasma mirum）有關(guān)。在對(duì)照傳播試驗(yàn)中，細(xì)菌連續(xù)出現(xiàn)在血淋巴，性腺結(jié)締組織，腸肝胰腺，神經(jīng)，心臟和腮中[18]；土霉素對(duì)小龍蝦中的螺原體也有效[19]。

通過(guò)16 s rDNA序列分析證明了引起小龍蝦患病是螺原體，合成的171 bp PCR產(chǎn)物與中華絨螯蟹螺原體有99%一致，這表明它們之間有很近的血緣關(guān)系。

2.3 弧菌屬（Vibrio）

引起小龍蝦死亡的弧菌（Vibrio spp.）有2種。最小弧菌（Vibrio mimicus）是引起小龍蝦死亡的主要病原[20]，而霍亂弧菌（Vibrio cholerae）對(duì)小龍蝦的致病力弱，病死率低。該病害是系統(tǒng)性侵染，存在于血淋巴中，生病小龍蝦除了嗜睡外，沒(méi)有特殊外部的癥狀[20-21]。特別是在小龍蝦養(yǎng)殖過(guò)程中，最小弧菌的一些日博型（ribotypes）菌株經(jīng)常被分離到，它們都可能是小龍蝦的病原菌[21-22]。陳昌福等[6]從患暴發(fā)病的小龍蝦的肝胰腺中分離到具有高致病力的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），通過(guò)對(duì)養(yǎng)殖現(xiàn)場(chǎng)的調(diào)查證明，這種嗜鹽性弧菌（=副溶血弧菌）可能是由于養(yǎng)殖業(yè)者采用海水小雜魚(yú)喂養(yǎng)小龍蝦時(shí)帶入的；弧菌和其他桿菌的感染也能引起爛鰓病[6]。此外，人們?nèi)绻麛z食被弧菌侵染的未煮熟小龍蝦能導(dǎo)致人類(lèi)的腸胃炎[21]。

小龍蝦感染弧菌引起病害癥狀表現(xiàn)為全身無(wú)力、趴邊、離岸死亡，發(fā)病嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致整個(gè)池塘龍蝦全部死亡。發(fā)病期從4月底開(kāi)始。

2.4 氣單胞菌屬（Aeromonas）

在小龍蝦養(yǎng)殖環(huán)境中，嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）無(wú)處不在，它也與魚(yú)類(lèi)和甲殼類(lèi)動(dòng)物的病害有關(guān)，偶爾引起人類(lèi)疾病[23]。該細(xì)菌可從健康小龍蝦上分離到，被認(rèn)為是潛在的病原菌[24]。Jiravanichpaisal P等[25]從瑞典生病信號(hào)小龍蝦（Pasifastacus leniusculus）上分離到嗜水氣單胞菌和其他的細(xì)菌。隨后用肉湯培養(yǎng)細(xì)菌，在不同的溫度下，把細(xì)菌接種到該地小龍蝦上后，分離到了細(xì)菌的細(xì)胞外產(chǎn)物；而其他一些細(xì)菌不是引起小龍蝦病害的病原菌，但大多數(shù)小龍蝦死亡與嗜水氣單胞菌有關(guān)[9]。在22℃的條件下，用嗜水氣單胞菌注射小龍蝦，6小時(shí)開(kāi)始死亡。被感染的小龍蝦組織出現(xiàn)壞死斑，血液鼻竇內(nèi)血細(xì)胞聚集。氣單胞菌（Aeromonas caviae）引起出血病、爛眼癥、甲殼潰爛病[10]，嗜水氣單胞菌感染也能引起腸炎和水腫病、爛尾病和偷死癥[6,26]。

大多數(shù)小龍蝦細(xì)菌性病原都是兼性寄生菌，引起的病害種類(lèi)多、流行時(shí)間長(zhǎng)、危害大，具有再次侵染。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于小龍蝦細(xì)菌性疾病的報(bào)道相對(duì)較少，研究也不夠深入，缺乏細(xì)菌感染小龍蝦的致病機(jī)理、機(jī)體組織病理變化、機(jī)體免疫學(xué)等研究資料。

細(xì)菌性疾病的治療方法與其他水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的細(xì)菌性病害相同，應(yīng)正確選用抗生素藥物，對(duì)癥治療，中草藥飼料可有效預(yù)防小龍蝦細(xì)菌病的發(fā)生。