PTEN在子宮內(nèi)膜癌診刮組織中的表達(dá)和臨床意義

陳鈺 李建英

[摘要] 目的 回顧性分析子宮內(nèi)膜癌診刮組織中PTEN表達(dá)情況，探討臨床意義。 方法 2013年1月—2017年12月方便選取子宮內(nèi)膜癌術(shù)前行診刮術(shù)的 100例納入研究對(duì)象，比較PTEN在不同研究組的陽(yáng)性表達(dá)差異，并行病理分級(jí)、病理分期和浸潤(rùn)深度的相關(guān)性分析。 結(jié)果 PTEN在子宮內(nèi)膜癌不同發(fā)病年齡組、絕經(jīng)狀態(tài)、有無(wú)合并癥、組織學(xué)類型的陽(yáng)性表達(dá)中無(wú)差異性；在病理學(xué)分級(jí)分別為30（93.8%）、38（80.9%）、14（66.7%）、5（55.6%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.38，P<0.05）；肌層浸潤(rùn)程度分別為59（83.1%）、12（60.1%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=8.55，P<0.05）；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分別86（91.5%）、4（66.7%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.86，P<0.05）。 結(jié)論 通過(guò)對(duì)PTEN在子宮內(nèi)膜癌診刮組織中的表達(dá)進(jìn)行研究，對(duì)子宮內(nèi)膜癌的后期治療有積極的意義。

[關(guān)鍵詞] PTEN；子宮內(nèi)膜癌；診刮組織

[中圖分類號(hào)] R5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）11（a）-0032-03

[Abstract] Objective To retrospectively analyze the expression of PTEN in the diagnosis of endometrial cancer and to explore its clinical significance. Methods 100 patients with endometrial cancer before operation from January 2013 to December 2017 were enrolled in the study. The positive expression of PTEN in different study groups was compared， and the correlation between pathological grade， pathological stage and depth of invasion was analyzed. Results There was no difference in the positive expression of PTEN in different age groups， menopausal status， comorbidities and histological types of endometrial cancer. The pathological grades were 30 （93.8%）， 38 （80.9%）， and 14 （66.7%）. 5（55.6%）， statistically significant（χ2=6.38， P<0.05）； myometrial invasion was 59（83.1%）， 12（60.1%）， statistically significant（χ2=8.55， P<0.05）； lymph node metastasis was 86 （91.5%）， 4 （66.7%）， which was statistically significant（χ2=3.86， P<0.05）. Conclusion By studying the expression of PTEN in the diagnosis of endometrial cancer， it has positive significance for the late treatment of endometrial cancer.

[Key words] PTEN； Endometrial cancer； Diagnosis tissue

子宮內(nèi)膜癌（ endometrial carcinoma，EC）， 為原發(fā)于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，多發(fā)生于圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后女性[1-2]。目前，關(guān)于子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明，多數(shù)研究認(rèn)為抑癌基因的失活或者丟失在腫瘤的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用[3-4]。PTEN 是一種重要的抑癌基因，其在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)有一定的作用，國(guó)內(nèi)外少見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。該研究通過(guò)分析將 2013 年 1 月— 2017 年 12 月期間在該院接受診斷性刮宮的100例完整子宮內(nèi)膜癌資料作為研究對(duì)象，研究宮內(nèi)膜癌診刮組織的PTEN病理學(xué)表達(dá)情況，探討其與內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系，為臨床診斷與治療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取在該院接受診斷性刮宮的100例完整子宮內(nèi)膜癌資料作為研究對(duì)象，且符合醫(yī)院倫理學(xué)要求。根據(jù)國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（FIGO，2009）推薦手術(shù)-病理分期的標(biāo)準(zhǔn)，100例患者中I期65例（65%），Ⅱ期15例（15%），Ⅲ期18例（18%），Ⅳ期2例（2%）。組織類型：子宮內(nèi)膜樣腺癌92例（92%），漿液性乳頭狀癌4例（4%），透明細(xì)胞癌2例（2%），移行細(xì)胞癌1例（1%），混合性腺癌1例（1%）。組織學(xué)分級(jí)：G1（高分化）32例（32%），G2（中分化）47例（47%），G3（低分化）21例（21%）。肌層浸潤(rùn)程度：無(wú)肌層浸潤(rùn)患者9例（9%），浸潤(rùn)深度≤1/2患者69例（69%），浸潤(rùn)深度>1/2患者20例（20%），不詳患者2例（2%）。盆腔或腹主動(dòng)脈淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移6例。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 主要儀器： 型號(hào)HYC-68 低溫冰箱（青島市海爾公司），型號(hào)RM-2235石蠟切片機(jī)（上海市徠卡儀器有限公司），組織包埋機(jī)NP-B （湖北孝感市亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司），烘攤烤片機(jī)YT-7FB （孝感市諾普電子科技有限責(zé)任公司 ），顯微鏡BX51（德國(guó)萊卡公司），電熱恒溫培育箱DHP-9052型 （上海一恒科技有限公司）。

主要試劑： PTEN單克隆抗體 （ 福州邁新生物公司），免疫組化Envision法試劑盒（廣州深達(dá)生物制品技術(shù)有限公司），DAB試劑盒（廣州深達(dá)生物制品技術(shù)有限公司）。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 所有診刮標(biāo)本存檔蠟塊均重新制成 4 μm 厚切片 2 份，其中 1 份進(jìn)行 HE 染色，在光鏡下復(fù)查病理結(jié)果； 另一份進(jìn)行免疫組化 SP 法染色，染色方法按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，抗體為 PTEN 單克隆抗體，抗體濃度為 1： 100，以 PBS 磷酸鹽緩沖液代替一抗作陰性對(duì)照，使用已知陽(yáng)性片作為陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果判定 PTEN 陽(yáng)性染色標(biāo)志：其是通過(guò)細(xì)胞漿而進(jìn)行陽(yáng)性表達(dá)，如果它展示出棕黃色顆粒狀，那么表明為陽(yáng)性。在顯微鏡幫助下，選定十個(gè)視野（20×10倍），計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，小于30%記為陰性（-）； >30%記為陽(yáng)性（+）。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用 SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件錄入和分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)[n（%）]表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

PTEN在不同年齡組、絕經(jīng)狀態(tài)和有無(wú)并發(fā)癥的診刮組織中所體現(xiàn)出來(lái)的陽(yáng)性表達(dá)情況差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

在不同類型子宮內(nèi)膜癌中， PTEN陽(yáng)性表達(dá)方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.036），在手術(shù)病理分期方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.047）。見(jiàn)表2。

患者在不同病理分級(jí)組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.041），在肌層浸潤(rùn)深度組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.033），在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.049）。見(jiàn)表3。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌，對(duì)患者的生命安全以及生活質(zhì)量均造成嚴(yán)重影響。子宮內(nèi)膜癌患者的臨床癥狀主要是陰道不規(guī)則的流血，其為子宮內(nèi)膜活檢的指標(biāo)。PTEN 基因是廣泛認(rèn)可的參與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的抑癌基因[5-6]。當(dāng) PTEN 突變時(shí)，抑癌作用消失導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡減少，增殖及分化相對(duì)活躍[7]。初步認(rèn)為，PTEN 突變多發(fā)生在癌癥發(fā)生早期階段。Konstantinos等[8]通過(guò)研究結(jié)果表明 PTEN 突變是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的起始因素之一，而且可以作為癌前病變發(fā)展為癌癥的高危因素，并且PTEN突變是Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌最常見(jiàn)的早期分子基因?qū)W改變。

該實(shí)驗(yàn)研究中，患者在不同病理分級(jí)組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)有明顯差異，隨著分化程度的增高，由G3低分化到G1高分化，PTEN的表達(dá)分別為66.7%、80.9%、93.8%，可見(jiàn)隨著子宮內(nèi)膜癌分化程度升高，PTEN陽(yáng)性表達(dá)逐漸升高；肌層浸潤(rùn)深度組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)有明顯差異， 浸潤(rùn)深度≤1/2患者PTEN表達(dá)為83.1%，浸潤(rùn)深度>1/2患者PTEN表達(dá)為60.1%，隨著浸潤(rùn)深度的增加，PTEN陽(yáng)性表達(dá)下降。在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組別中PTEN陽(yáng)性表達(dá)有明顯差異，沒(méi)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)PTEN陽(yáng)性表達(dá)為91.5%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移時(shí)PTEN陽(yáng)性表達(dá)為66.7%。文獻(xiàn)研究[13]表明PTEN的陽(yáng)性表達(dá)與子宮內(nèi)膜增生癥的類型及Ⅰ型子宮內(nèi)膜樣腺癌的組織學(xué)分級(jí)呈負(fù)相關(guān)，由增生期子宮內(nèi)膜、單純性增生、復(fù)雜性增生、非典型性增生到子宮內(nèi)膜樣癌的PTEN表達(dá)缺失率分別為0%、4.8%、20.0%、48.4%和60.2%。提示PTEN 缺失可能是子宮內(nèi)膜癌變的早期事件。隨著子宮內(nèi)膜癌組織學(xué)分級(jí)的升高，PTEN表達(dá)缺失率逐漸升高，Ⅰ型子宮內(nèi)膜樣腺癌的缺失率最高，該實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果與文獻(xiàn)研究結(jié)果較為一致，研究結(jié)果可靠。

診刮術(shù)是診斷子宮內(nèi)膜癌的主要方法。該研究收集了子宮內(nèi)膜癌的診刮組織，采用免疫組化方法，研究不同組別間PTEN的表達(dá)情況。

該研究結(jié)果顯示，PTEN陽(yáng)性表達(dá)率在不同子宮內(nèi)膜癌類型、不同病理分級(jí)、不同肌層浸潤(rùn)深度、不同病理分期中表達(dá)有明顯差異。

綜上所述，子宮內(nèi)膜癌診刮組織中抑癌基因PTEN表達(dá)情況受到病理分級(jí)、病理分期、肌層浸潤(rùn)深度的影響，可能會(huì)成為子宮內(nèi)膜組織早期癌變?cè)\斷以及預(yù)后評(píng)判的分子標(biāo)記物，因此可應(yīng)用于子宮內(nèi)膜癌的診斷和鑒別中。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 張彤，沈丹華，陳云新，等.PTEN、PAX-2 和β-catenin 在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌及其癌前病變中的表達(dá)及意義[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2014，23（2）：84-88.

[2] 嚴(yán)謹(jǐn)，王芙蓉，賀豐杰，等.凋膜止崩液對(duì)人離體子宮內(nèi)膜增生癥腺上皮細(xì)胞PTEN、Rb2/p130表達(dá)影響[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，20（2）：30-34.

[3] 何春燕，徐瓊，曹麗芳，等.子宮內(nèi)膜癌宮腔診刮的抑癌基因病理學(xué)表達(dá)及其影響因素分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，15（4）：389-392.

[4] 孔偉梁.宮腔診刮組織中PTEN與p16的表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌病理分期的關(guān)系研究[J].浙江醫(yī)學(xué)教育，2015，14（4）：45-48.

[5] 賈芃，張楠，廖秦平，等.Ki-67和PTEN在子宮內(nèi)膜細(xì)胞學(xué)篩查子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2015，31（3）：194-198.

[6] 汪燕舞，陳智龍，江惠，等.子宮內(nèi)膜上皮內(nèi)瘤變標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估絕經(jīng)前診刮標(biāo)本及分子標(biāo)記的意義[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù)，2013，20（12）：1333-1335.

[7] 亢姝嬌.子宮內(nèi)膜癌的分型及其癌前病變的臨床病理及免疫組化特點(diǎn)分析[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志，2013，45（8）：937-940.

[8] Konstantinos K，Marios S，Anna M，et al. Expression of Ki-67 as proliferation biomarker in imprint smears of endometrial carcinoma[J].Diagn Cytopathol，2013，41（3）：212-217.

[9] 祁曉莉，張軼華，王春艷，等.PAX-2、PTEN、ER和Ki-67在子宮內(nèi)膜癌及其癌前病變組織中的表達(dá)及意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2018，17（9）：933-937.

（收稿日期：2018-08-01）