HGF/c—met傳導(dǎo)通路在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用及意義

王江芬　王月玲

[摘要] 目的 檢測(cè)HGF/c-met傳導(dǎo)通路對(duì)Survivin、XIAP表達(dá)的影響，探討HGF/c-met通路在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制。 方法 培養(yǎng)ER表達(dá)水平不同的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系HEC-1B（ER低表達(dá)）和Ishikawa（ER高表達(dá)），通過(guò)MTT法檢測(cè)不同濃度HGF對(duì)兩種細(xì)胞增殖率的影響；AnnexinV-FITC法檢測(cè)不同濃度HGF對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響。Western Blot檢測(cè)Survivin及XIAP蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果 HGF可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖，在80 ng/mL內(nèi)具有劑量依賴性，在72 h內(nèi)具有時(shí)間依賴性（P<0.05）；當(dāng)HGF濃度為40 ng/mL時(shí)，HEC-1B細(xì)胞24 h增值率達(dá)到（87.0±0.02）%，為最適誘導(dǎo)濃度。Survivin、XIAP mRNA及蛋白的表達(dá)隨著HGF濃度的增高而上調(diào)，上調(diào)作用具有劑量效應(yīng)關(guān)系。HGF在ER低表達(dá)的HEC-1B細(xì)胞中作用明顯高于Ishikawa細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活可促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，HGF/c-met可能是調(diào)控子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子靶點(diǎn)。

[關(guān)鍵詞] 子宮內(nèi)膜癌；HGF/c-met傳導(dǎo)通路；Survivin；XIAP

[中圖分類號(hào)] R737.33 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2015）32-0001-07

[Abstract] Objective To detect the influence of HGF/c-met pathway on expression of survivin and XIAP and to discuss the action mechanism of HGF/c-met pathway in occurrence and ddevelopment of endometrial cancer. Methods Cell lines of endometrial cancer with different ER expression level were cultivated： HEC-1B（ER low expression） and Ishikawa （ER high expression）. The effects of HGF in various concentrations on cell proliferation rate of both cell lines were detected by MTT method， and effects on cell apoptosis rate were detected by AnnexinV-FITC method. The expression levels of survivin and XIAP were measured by western blot. Results HGF facilitated the proliferation of endometrial cells， which was dose-dependent within 80 ng/mL， and time-dependent within 72 h（P<0.05）； When HCF=40 ng/mL， the 24 h proliferation rate of HEC-1B cells reached （87.0±0.02）%， and 40 ng/mL was the optimum inducing concentration. The mRNA and protein expressions of surviving and XIAP were up regulated by the rising HGF concentration， which had a dose-effect relationship. The effect of HGF on ER low expression HEC-1B cells was evidently higher than that on Ishikawa cells， the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The activation of HGF/c-met pathway can facilitate the proliferation and inhibit the apoptosis of endometrial cells. HGF/c-met is probably the molecular target regulating the occurrence and development of endometrial cancer.

[Key words] Endometrial cancer； HGF/c-met pathway； Survivin； XIAP

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一。近年來(lái)，其發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢(shì)[1]。子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制目前尚未完全明白。近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤分子傳導(dǎo)通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[2，3]。c-met原癌基因編碼肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）受體，HGF與c-met結(jié)合，激活c-met受體發(fā)生磷酸化，通過(guò)c-met信號(hào)通路發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)[4]。文獻(xiàn)報(bào)道，HGF/c-met傳導(dǎo)通路在多種惡性腫瘤組織中過(guò)度激活，不僅c-met的表達(dá)水平上調(diào)，血清HGF濃度也增高，與腫瘤細(xì)胞的增殖，凋亡和侵襲能力有關(guān)[5]。本研究成員在前續(xù)實(shí)驗(yàn)中證實(shí)c-met在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)上調(diào)，其上調(diào)程度與臨床分期、組織學(xué)分級(jí)及淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān)[6]。

細(xì)胞增殖及凋亡受癌基因及抑癌基因調(diào)控，如Bcl-2家族，IAP家族等，IAP家族通過(guò)細(xì)胞色素c和細(xì)胞凋亡活化因子1抑制其下游因子caspase-9的活化，從而抑制細(xì)胞凋亡[7]。研究發(fā)現(xiàn)，HGF/c-met 傳導(dǎo)通路通過(guò)AKT通路影響其下游因子Survivin、XIAP的表達(dá)進(jìn)而影響大腸癌的增值和凋亡[8]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外HGF激活c-met傳導(dǎo)通路，研究c-met在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系中的表達(dá)并進(jìn)一步分析其下游因子Survivin、XIAP的表達(dá)，探討其在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為進(jìn)一步研究子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。

1 資料與方法

1.1 細(xì)胞選擇及來(lái)源

本實(shí)驗(yàn)所選擇Ishikawa細(xì)胞為一種高分化的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞，其雌激素受體表達(dá)為陽(yáng)性。而低分化子宮內(nèi)膜癌來(lái)源的HEC-1B細(xì)胞，其雌激素受體表達(dá)水平極低，國(guó)內(nèi)學(xué)者大部分將其視為ER陰性的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞[9]。本實(shí)驗(yàn)時(shí)間為2013～2015年。

1.2 主要試劑

RPMI1640培養(yǎng)基為GIBCO公司生產(chǎn)，胰酶為北京索萊寶科技有限公司生產(chǎn)（Solarbio），血清為蘭州民海生物工程有限公司生產(chǎn)的優(yōu)級(jí)新生牛血清。RNA提取試劑：RNAisoTMPlus寶生物工程有限公司，反轉(zhuǎn)錄試劑盒：PrimeScriptTMRT reagent Kit寶生物工程有限公司。HGF購(gòu)自PeproTech公司，Survivin兔抗人多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Sant Cruz 公司，XIAP兔抗人多克隆抗體購(gòu)自bioworld公司，β-actin兔抗人多克隆抗體購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司，羊抗兔二抗購(gòu)自Pioneer Biotechnolgy。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng) 子宮內(nèi)膜癌Ishikawa 和HEC-1B 細(xì)胞分別常規(guī)培養(yǎng)置于含10%胎牛血清（經(jīng)56℃水浴30 min滅活）的RPMI 1640 培養(yǎng)基中，于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，3～4 d傳代一次。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

1.3.2 MTT法檢測(cè)HGF對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響 將生長(zhǎng)良好的細(xì)胞接種于96孔板中，3×103個(gè)細(xì)胞/孔，分別加入不同濃度（0、10、20、40、80 ng/mL）HGF和PBS繼續(xù)培養(yǎng)24 h后，加入MTT（5 mg/mL）20 μL/孔繼續(xù)培養(yǎng)4 h，吸盡各孔中的培養(yǎng)液，加入DMSO 150 μL/孔，振蕩10 min，使結(jié)晶物充分溶解后在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀上測(cè)定各孔在波長(zhǎng)為490 nm處的吸光度（D）值。每組設(shè)5個(gè)復(fù)孔，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。細(xì)胞增殖率=處理組吸光度值/對(duì)照組吸光度值-1。

1.3.3 AnnexinV-FITC法檢測(cè)不同濃度HGF對(duì)細(xì)胞凋亡率的影響 不同濃度HGF（10、20、40 ng/mL）及PBS處理，細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)24 h后冰預(yù)冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，1000 rpm離心2 min，收集細(xì)胞，以106細(xì)胞/mL的濃度重懸于結(jié)合緩沖液中。取100 μL細(xì)胞懸液（105個(gè)細(xì)胞）加入離心管中，分別加入5 μL Annexin V-FITC和10 μL PI；輕輕震蕩混勻，室溫暗室孵育15 min。每管加入400 μL PBS，混勻，立即進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析。

1.3.4 RT-PCR半定量c-met、Survivin、XIAP mRNA 當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，分別加入不同濃度HGF（10、20、40 ng/mL）和PBS繼續(xù)培養(yǎng)24 h，取細(xì)胞約106個(gè)，提取細(xì)胞總RNA，以0.5 μg總RNA為模板反轉(zhuǎn)錄合成第一鏈cDNA，反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)條件為85℃ 15 min、60℃ 5 s。所有引物均合成自華大基因公司，引物序列見(jiàn)表1。按照PCR反應(yīng)試劑盒的說(shuō)明設(shè)置反應(yīng)條件如下，94℃熱啟動(dòng)5 min，94℃變性30 s，退火30 s，72℃延伸30 s，擴(kuò)增c-met、Survivin、XIAP、GAPDH片段，擴(kuò)增反應(yīng)的退火溫度分別為55℃、58℃、55℃、55℃，反應(yīng)循環(huán)均為30次。配置0.5×TBE buffer，制備2%瓊脂糖凝膠，加樣孔加樣5 μL，50 V電壓電泳30～40 min后凝膠成像分析，在適宜曝光速度下拍照，分析目標(biāo)條帶和內(nèi)參照條帶的熒光定量值。

1.3.5 Western blot檢測(cè)細(xì)胞中Survivin、XIAP的蛋白表達(dá) 當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，分別加入不同濃度HGF（0、20、40 ng/mL）和PBS繼續(xù)培養(yǎng)24 h，收獲細(xì)胞后配置RIPA裂解液提取細(xì)胞總蛋白，并用BCA蛋白質(zhì)定量試劑盒測(cè)定蛋白濃度。取50 μg總蛋白進(jìn)行12% SDS-PAGE電泳，將電泳產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到NC膜上，在含5%脫脂奶粉的TBST中室溫?fù)u床封閉兩小時(shí)，加入抗Survivin（1∶1000）、抗XIAP（1：500）單抗和抗β-actin單抗（1∶500 ），4°C孵育過(guò)夜。TBST洗膜3次，加入1∶5000稀釋的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗，室溫?fù)u床培育1.5 h，按照ECL發(fā)光試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光顯色。Bandscan凝膠圖像分析軟件進(jìn)行光密度分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，以F檢驗(yàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)方差齊性，采用方差分析并采用LSD-t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。所有結(jié)果均以α=0.05做為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，判定結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 MTT法檢測(cè)HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活對(duì)細(xì)胞增殖的影響

不同濃度HGF作用于子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1B、Ishikawa 12、24、48 h后，各實(shí)驗(yàn)組增殖率較對(duì)照組均明顯增高，且其增殖率呈HGF濃度及時(shí)間依賴性。在ER低表達(dá)的HEC-1B細(xì)胞中增殖作用明顯高于ER高表達(dá)的Ishikawa細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在HEC-1B細(xì)胞中，HGF濃度由40 ng/mL增高為80 ng/mL時(shí)，其增殖率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，故40 ng/mL為最適誘導(dǎo)濃度；HGF（40 ng/mL）作用24 h增殖率為（87.0±0.02）%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），故24 h為最適作用時(shí)間。見(jiàn)表2、圖1、2。

2.2 Annexin V-FITC法檢測(cè)HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活對(duì)細(xì)胞凋亡的影響

不同濃度HGF作用子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞HEC-1B、Ishikawa 24 h后，早期凋亡細(xì)胞（右下象限）及中晚期凋亡細(xì)胞（右上象限）的百分比均減少。總凋亡率隨著HGF濃度的增高而減少，具有劑量效應(yīng)關(guān)系（表3、圖4、5）。HGF對(duì)HEC-1B細(xì)胞的抗凋亡作用明顯高于ishikawa細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖3）。

2.3 c-met在HEC-1B和Ishikawa細(xì)胞中的基礎(chǔ)表達(dá)

通過(guò)RT-PCR半定量ER表達(dá)水平不同的兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中c-met mRNA的相對(duì)水平，結(jié)果表明，ER高表達(dá)的Ishikawa細(xì)胞c-met表達(dá)水平較低，而ER低表達(dá)的HEC-1B細(xì)胞c-met明顯高表達(dá)，對(duì)條帶積光度進(jìn)行分析，HEC-1B細(xì)胞中c-met mRNA表達(dá)量約為Ishikawa中的2.5倍（圖6）。

2.4 HGF對(duì)c-met、Survivin、XIAP mRNA表達(dá)水平的影響

不同濃度HGF處理HEC-1B及Ishikawa細(xì)胞后，RT-PCR法半定量c-met、Survivin、XIAP mRNA，結(jié)果顯示：HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活可上調(diào)Survivin、XIAP mRNA的表達(dá)，且呈HGF劑量效應(yīng)關(guān)系，在HEC-1B細(xì)胞中，該上調(diào)作用明顯高于Ishikawa細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)圖7、表4、5。

2.5 HGF對(duì)Survivin、XIAP 蛋白的表達(dá)

不同濃度HGF作用HEC-1B、Ishikawa細(xì)胞后，Survivin、XIAP蛋白表達(dá)升高，且其表達(dá)量呈HGF劑量效應(yīng)關(guān)系。40 ng/mL HGF處理HEC-1B細(xì)胞后，Survivin表達(dá)水平較對(duì)照組上調(diào)2.1倍；XIAP較對(duì)照組上調(diào)2.2倍（圖8、表6、7）。在HEC-1B細(xì)胞中，該上調(diào)作用明顯高于Ishikawa細(xì)胞，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3 討論

目前，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制仍不清楚，其發(fā)生發(fā)展涉及多個(gè)基因的異常，其中c-met的異常表達(dá)及其相關(guān)傳導(dǎo)通路的調(diào)控近年備受關(guān)注。在子宮內(nèi)膜癌組織中c-met高表達(dá)，對(duì)應(yīng)血清HGF濃度也增高，二者構(gòu)成異常自分泌環(huán)，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展[5]。

c-met是新近發(fā)現(xiàn)的一促癌因子，其是由原癌基因c-met編碼的一種酪氨酸激酶受體， 與細(xì)胞增殖與存活、細(xì)胞遷移、誘導(dǎo)細(xì)胞極化、血管形成、損傷修復(fù)、組織重建等生物學(xué)效應(yīng)相關(guān)[4]。研究表明，人類的許多腫瘤組織中均存在c-met的過(guò)表達(dá)，如胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、肝細(xì)胞癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌和淋巴瘤等[10]。c-met在腫瘤中高表達(dá)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖，侵襲及轉(zhuǎn)移，并與腫瘤局部組織微血管形成有關(guān)，是惡性腫瘤靶向治療的靶點(diǎn)之一[11]。但目前針對(duì)c-met基因在子宮內(nèi)膜癌中的研究尚淺，大部分局限于表達(dá)異常，其下游因子及相關(guān)傳導(dǎo)通路的研究尚少。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)RT-PCR半定量ER表達(dá)水平不同的兩種子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中c-met mRNA的相對(duì)水平，結(jié)果表明，ER高表達(dá)的Ishikawa細(xì)胞c-met表達(dá)水平較低，而ER低表達(dá)的HEC-1B細(xì)胞c-met明顯高表達(dá)，且HEC-1B細(xì)胞中c-met mRNA表達(dá)量約為Ishikawa中的2.5倍，與前續(xù)實(shí)驗(yàn)子宮內(nèi)膜癌組織中c-met表達(dá)與ER呈負(fù)相關(guān)相一致[6]。這一結(jié)果從基因水平證實(shí)c-met在子宮內(nèi)膜癌特別是ER低表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中起重要作用，為我們下一步研究子宮內(nèi)膜癌中c-met傳導(dǎo)通路及下游分子奠定了基礎(chǔ)。

研究表明，凋亡的抑制與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。促進(jìn)細(xì)胞增殖和抑制其凋亡的蛋白表達(dá)過(guò)多，使子宮內(nèi)膜細(xì)胞逃逸生長(zhǎng)調(diào)控，這可能是子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[12-14]。細(xì)胞的增殖、凋亡在正常情況下受許多信息的調(diào)控，腫瘤的形成與細(xì)胞增殖凋亡失衡密切相關(guān)。c-met作為癌基因，其表達(dá)產(chǎn)物促進(jìn)細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，在腫瘤形成過(guò)程中起著不可忽視的作用[5]。HGF作為c-met的配體，與c-met結(jié)合，激活c-met受體發(fā)生磷酸化，其酪氨酸激酶活性增強(qiáng)，通過(guò)c-met信號(hào)通路引起其下游多種底物蛋白磷酸化水平增高。c-met信號(hào)通路包括表面共存受體和相關(guān)下游通路（絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）和Stat3等[15，16]。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)MTT法檢測(cè)HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖的影響，AnnexinV-FITC法檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞凋亡的影響，結(jié)果表明HGF/c-met信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活可促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，且呈明顯的濃度依賴性。該生物學(xué)效應(yīng)在ER低表達(dá)的HEC-1B細(xì)胞中較ER高表達(dá)的Ishikawa更明顯，說(shuō)明HGF/c-met傳導(dǎo)通路的過(guò)度激活參與子宮內(nèi)膜細(xì)胞異常增殖，凋亡受抑，從而導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及惡性化，且其在ER低表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中作用更為明顯，這可能也是ER低表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌預(yù)后不良的一個(gè)可能因素。這一推論為我們提供了子宮內(nèi)膜癌輔助治療的新方法：阻斷HGF/c-met傳導(dǎo)通路，抑制c-met的激活可能成為子宮內(nèi)膜癌特別是ER低表達(dá)或不表達(dá)子宮內(nèi)膜癌的治療及預(yù)防復(fù)發(fā)的新方法。

凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族是一類廣泛存在于酵母、昆蟲(chóng)及哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的進(jìn)化上高度保守的細(xì)胞死亡抑制分子。迄今為止已確定的哺乳動(dòng)物IAP家族成員有NIAP、c-IAPI、c-IAPZ、XIAP、appollon、Ts-XIAP、livin、Survivin、Bruce等[17-19]。本實(shí)驗(yàn)選取IAP家族中最具代表性的Survivin和XIAP作后續(xù)研究。Survivin表達(dá)的腫瘤特異性最強(qiáng)，因而受到了廣大研究者的關(guān)注，然而Survivin與子宮內(nèi)膜癌關(guān)系的研究目前仍局限于表達(dá)異常方面，其作用機(jī)制及相關(guān)通路調(diào)控研究尚少。X染色體連鎖的凋亡抑制基因（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）是凋亡抑制基因家族中重要的成員之一，其編碼的蛋白XIAP通過(guò)選擇性的抑制Caspase3、7和9，并參與其它途徑來(lái)抑制細(xì)胞的凋亡，XIAP是該基因家族中唯一能夠同時(shí)抑制起始和效應(yīng)階段的IAP[20]。子宮內(nèi)膜癌中，c-met傳導(dǎo)通路所引起的細(xì)胞增殖與凋亡抑制是否與IAP家族具有某種聯(lián)系呢？國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)假定Survivin、XIAP為HGF/c-met傳導(dǎo)通路的下游因子，通過(guò)HGF激活c-met傳導(dǎo)通路，通過(guò)RT-PCR及western blot對(duì)Survivin、XIAP進(jìn)行mRNA及蛋白的定量[21]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，在子宮內(nèi)膜癌HEC-1B和Ishikawa細(xì)胞中，HGF呈濃度依賴性誘導(dǎo)Survivin及XIAP的表達(dá)，在c-met高表達(dá)的HEC-1B中，該誘導(dǎo)作用更明顯。在HEC-1B細(xì)胞中，HGF濃度為40 ng/mL作用24 h，Survivin 較對(duì)照組上調(diào)2倍，XIAP上調(diào)3倍。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平上調(diào)Survivin、XIAP的表達(dá)，進(jìn)而抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞增殖，促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展。同時(shí)該結(jié)果提示Survivin、XIAP可能是HGF/c-met傳導(dǎo)通路的下游因子，然而，該誘導(dǎo)作用是通過(guò)什么途徑發(fā)揮的，尚需后續(xù)研究。

綜上所述，HGF/c-met傳導(dǎo)通路的激活可上調(diào)Survivin、XIAP的表達(dá)，促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，且在ER低表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌中作用更顯著，Survivin、XIAP可能是HGF/c-met傳導(dǎo)通路的下游因子，該傳導(dǎo)通路參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展，阻斷該傳導(dǎo)通路為我們提供了一條子宮內(nèi)膜癌治療及預(yù)防的新思路。子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制仍需要更為深入地研究。相信隨著研究的不斷深入，我們會(huì)更加深刻地了解HGF/c-met信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)在子宮內(nèi)膜癌中的功能，揭示其內(nèi)在的分子機(jī)制以及潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Jonathan S，Berek N. 婦科學(xué)[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

[2] Mendes KN，Nicorici D，Cogdell D，et al. Analysis of signaling pathways in 90 cancer cell lines by protein lysate array[J]. Journal of Proteome Research，2007，6（7）： 2753-2767.

[3] Su HY，Lai HC，Lin YW，et al. Epigenetic silencing of SFRP5 is related to malignant phenotype and chemoresistance of ovarian cancer through Wnt signaling pathway[J]. International Journal of Cancer，2010，127（3）：555-567.

[4] Maulik G，Shrikhande A，Kijima T，et al. Role of the hepatocyte growth factor receptor，c-met，in oncogenesis and potential for therapeutic inhibition[J]. Cytokine & Growth Factor Reviews，2002，13（1）：41-59.

[5] Kammula US，Kuntz EJ，F(xiàn)rancone TD，et al. Molecular co-expression of the c-met oncogene and hepatocyte growth factor in primary colon cancer predicts tumor stage and clinical outcome[J]. Cancer Letters，2007，248（2）：219-228.

[6] Yueling Wang，Weidong Dai，Jiangfen Wang，et al. Expression of estrogen receptor subtypes and c-met proto-oncogene in endometrial carcinoma and their correlation[J]. Academic Journal of Xian Jiaotong University，2010，22（1）：54-58.

[7] Hunter AM，LaCasse EC，Korneluk RG. The inhibitors of apoptosis（IAPs）as cancer targets[J]. Apoptosis，2007，12（9）：1543-1568.

[8] Takeuchi H，Kim J，F(xiàn)ujimoto A，et al. X-linked inhibitor of apoptosis protein expression level in colorectal cancer is regulated by hepatocyte growth Factor/C-met pathway via Akt signaling[J]. Clinical Cancer Research，2005，11（21）：7621-7628.

[9] Guseva NV，Dessus-Babus SC，Whittimore JD，et al. Characterization of estrogen-responsive epithelial cell lines and their infectivity by genital Chlamydia trachomatis[J]. Microbes and Infection，2005，7（15）：1469-1481.

[10] Ma PC，Maulik G，Christensen J，et al. c-met：Structure，functions and potential for therapeutic inhibition[J]. Cancer and Metastasis Reviews，2003，22（4）：309-325.

[11] Abidoye Oyewale，Murukurthy Nadh，Salgia Ravi. Review of clinic trials：Agents targeting c-Met[J]. Rev Recent Clin Trials，2007，2（2）：143-147.

[12] Ai ZH，Yin LH，Zhou XR，et al. Inhibition of survivin reduces cell proliferation and induces apoptosis in human endometrial cancer [J]. Cancer，2006，107（4）：746-756.

[13] Nachmias B，Ashhab Y，Ben-Yehuda D. The inhibitor of apoptosis protein family（IAPs）：An emerging therapeutic target in cancer[J]. Seminars in Cancer Biology，2004，14（4）：231-243.

[14] Eckelman BP，Salvesen GS，Scott FL. Human inhibitor of apoptosis proteins：Why XIAP is the black sheep of the family[J]. Embo Reports，2006，7（10）：988-994.

[15] Wang XF，Wu YH，Wang MS，et al. CEA，F(xiàn)P，CA125，CA153 and CA199 in malignant pleural effusions predict the cause[J]. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention，2014，3（2）：611-620.

[16] 高新萍，趙麗君. 子宮內(nèi)膜癌患者血清及病理分子標(biāo)志物與其病理特征關(guān)系的研究[J]. 中國(guó)婦產(chǎn)科臨床雜志，2014，4（6）：45-49.

[17] 趙玉斌. 子宮內(nèi)膜癌EphB4、ERα和ERβ的表達(dá)及意義[J]. 中國(guó)婦幼保健，2014，6（28）：33-36.

[18] Keam Bhumsuk，Im Seock-Ah，Lee Kyung-Hun，et al.Ki-67 can be used for further classification of triple negative breast cancer into two subtypes with different response and prognosis[J]. Breast cancer research：BCR，2013，21（2）：71-82.

[19] Chen Yu-Li，Huang Chia-Yen，Chien Tsai-Yen，et al. Value of pre-operative serum CA125 level for prediction of prognosis in patients with endometrial cancer[J]. The Australian & New Zealand Journal of Obstetrics & Gynaecology，2014，11（3）：61-70.

[20] A Ben Arie，O Lavie，M Gdalevich，et al. Temporal pattern of recurrence of stage I endometrial cancer in relation to histological risk factors[J]. European Journal of Surgical Oncology，2012，14（5）：98-111.

[21] S Erkanli，F(xiàn) Kayaselcuk，E Kuscu，et al. Expression of survivin，PTEN and p27 in normal，hyperplastic，and carcinomatous endometrium[J]. International Journal of Gynecological Cancer，2012，3（6）：11-23.

（收稿日期：2015-08-06）