利用高效液相色譜檢測食品中毒素與有害成分

□ 趙 磊 臨沂市食品藥品檢驗(yàn)檢測中心

農(nóng)作物上很多都?xì)埩舴乐尾∠x害和有機(jī)化合物的農(nóng)藥，雖然在農(nóng)作物的生長過程中起到了促進(jìn)作用，但也將農(nóng)作物的安全性降低，人們將這些有害成分吃進(jìn)體內(nèi)，就會對身體乃至生命造成威脅。通過高效液相色譜的檢測技術(shù)將食物中各種有害成分的殘留進(jìn)行全面檢驗(yàn)，完全可以將食品中所存在的獸藥或農(nóng)藥重現(xiàn)，從而能夠辨別出食品的安全性，保障飲食健康[1]。

1 食品中農(nóng)藥殘留的檢測

在當(dāng)前的果蔬食品檢測中，有各種各樣的農(nóng)藥殘留檢測方法，更多的是氣相色譜-質(zhì)譜法和氣相色譜法。其中對食品中殘留的熱穩(wěn)定性差的農(nóng)藥及沸點(diǎn)高的農(nóng)藥用氣相色譜法進(jìn)行測定，需要做出衍生化處理，處理之后它的應(yīng)用受到了一定的限制，同時還不可避免地增加了檢測對象的預(yù)處理難度。

1.1 用反相高效液相色譜分析法檢測果蔬中的農(nóng)藥殘留

將被測樣品搗碎之后，需要乙酸乙酯超聲進(jìn)行提取，經(jīng)Florisil固相萃取柱凈化、正乙烷-二氯甲烷（1∶1）洗脫、氮?dú)獯蹈?、甲醇溶解并定容后，選擇高效液相色譜柱分離、紫外檢測，以外標(biāo)法定量。此時結(jié)果顯示，多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥和除草劑二甲戊樂靈以及有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測限為0.114～2.65ng。運(yùn)用這種方法對一部分果蔬進(jìn)行檢驗(yàn)，這些果蔬中辛硫磷的檢出率達(dá)到50%和30%，氧化樂果的檢出率達(dá)到55%和45%。根據(jù)此項(xiàng)檢測可以看出，對于水果蔬菜仍可檢出高毒農(nóng)藥。

1.2 高效液相色譜法分離、紫外檢測器檢測同時測定蔬菜中除蟲脲、氟鈴脲、氟苯脲等7種苯甲酰脲類殘留量

色譜柱為SunFireTMC18[250mm×4.6mm（i.d.）,5μm]，柱溫為室溫，檢測波長為260nm，同時分離的農(nóng)藥種類多，但需梯度洗脫，對儀器的要求較高。

2 對食品中殘留的獸藥進(jìn)行檢測

用過藥的食品動物，都會殘留一些獸藥在食品中。殘留藥物也包括用動物生產(chǎn)的食品中的代謝產(chǎn)物和雜質(zhì)以及殘留藥物。這些殘留藥物對人體健康會產(chǎn)生影響。

（1）養(yǎng)殖海水中諾氟沙星、環(huán)丙沙星和恩諾沙星3種喹諾酮類抗生素殘留量的高效液相色譜-熒光測定方法。

水樣經(jīng)稀鹽酸調(diào)pH值后經(jīng)HLB固相萃取柱富集、凈化處理，選取外標(biāo)法進(jìn)行定量。事實(shí)證明，此種檢測法具有良好的重現(xiàn)性以及高效的靈敏度，針對養(yǎng)殖海水里的恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星進(jìn)行檢驗(yàn)。

（2）檢測大豆異黃酮類保健食品中三種雌激素含量的分析法。

采 用Hypersil ODS2 C18色 譜柱，流動相為甲醇-水（體積比53∶47），流速1.0mL/min，檢測波長280 nm。此種檢測法的線性在0.5～250mg/L，三種雌激素所得的檢測的低檢出限是0.8mg/L、0.4mg/L。

（3）檢測水產(chǎn)品中四環(huán)素類和氟喹諾酮類獸藥多殘留的HPLC法

樣品經(jīng)固相萃取小柱凈化，以甲醇-丙二酸-氯化鎂水溶液梯度洗脫，紫外檢測器檢測。檢測對象在色譜分析及預(yù)處理的條件下優(yōu)化，8種抗生素發(fā)生于0.1～10.0mg/L之間和峰面積線性發(fā)生關(guān)系后，最低的檢出限是0.011～0.051mg/kg，定量下限是0.035～0.170mg/kg，基本加標(biāo)回收率在81.0%～96.0%。

3 霉菌毒素的檢測

每年霉變糧食的量占據(jù)了總糧食產(chǎn)量的很大一部分，若霉變的糧食被人畜食用，還會引發(fā)中毒等癥狀。霉菌毒素主要有黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮等，而某些初步霉變的糧食，其感官上的變化并不明顯，因此，對霉菌毒素的檢測尤為重要。利用高效液相色譜法可將一些代謝產(chǎn)物和多種微生物的化學(xué)組成，直接分析被測對象里存在的細(xì)菌的代謝產(chǎn)物，以此判斷它的病原微生物具有獨(dú)特性的化學(xué)組分，判斷出樣品中微生物超標(biāo)情況，從而確定被檢食品是否可以健康食用。

3.1 快速檢測量適中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的碘柱前衍生-高效液相色譜法

提取液處理之后的被測對象，在液體中倒入定量的碘衍生劑進(jìn)行衍生，結(jié)束后在做色譜分析，四樣黃曲霉毒素在一定時間內(nèi)測定結(jié)束，測出最低檢出限，基本都在皮克水平。

3.2 檢測糧谷中T-2和HT-2毒素的免疫親和柱和柱凈化-液相色譜質(zhì)譜法

免疫親和柱凈化結(jié)束后，選擇液相色譜-質(zhì)譜進(jìn)行檢測，檢出結(jié)果T-2和HT-2毒素在0.005～0.500mg/L和峰面積線性關(guān)系良好，在加標(biāo)情況下，T-2和HT-2毒素基本回收率在76%～90%，最低檢出限是0.130mg/kg和0.002mg/kg。

3.3 對玉米粉中的玉米赤霉烯酮霉素進(jìn)行分析

被測對象通過高壓液體提取完畢，選擇LCESI/MS進(jìn)行檢驗(yàn)，當(dāng)中有正離子電噴霧ESI(+)和ESI(-)兩種質(zhì)譜檢驗(yàn)法，得出的結(jié)果最低檢測限分別是1μg/kg和5μg/kg。

4 結(jié)語

高效液相色譜檢測法是現(xiàn)在非常適用的食品檢測方法，此法檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、快速分離、重現(xiàn)性良好等特點(diǎn)深受廣大檢測人員的好評，從而進(jìn)一步提高了食品衛(wèi)生質(zhì)量，保障了食品安全和人民身體健康。