白血病患者血清VEGF及sFas水平的關(guān)系研究

劉 悅

（遼寧省撫順礦務(wù)局總醫(yī)院血液科，遼寧 撫順 113008）

血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）與血液系統(tǒng)惡性腫瘤存有緊密關(guān)聯(lián)性，其除了以旁分泌方式，促進血管內(nèi)皮細胞血管新生的作用之外，還可促進其增強化療藥物相應(yīng)抵抗作用，最終產(chǎn)生細胞耐藥。Fas/FasL實為一對膜蛋白分子，在腫瘤細胞凋亡進程中起到一定作用[1]?？扇苄訤as（sFas）乃是一種跨膜區(qū)缺乏，且具有可溶性的Fas分子，能以競爭性結(jié)合的方式，與Fas形成FasL，進而對由Fas介導所造成的細胞凋亡，給予阻斷。在急性淋巴細胞白血病的發(fā)生與發(fā)展中，sFas、VEGF與之密切相關(guān)[2]，但在二者聯(lián)合檢測方面研究卻較少。本次研究采用ELISA法，測定白血病患者的VEGF和sFas水平，且分析了二者相關(guān)性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2013年6月至2016年6月在我院診治的急性淋巴細胞白血病患者20例，男12例，女10例；年齡16～81歲，平均（36.4±2.6）歲。初發(fā)8例，難治/復(fù)發(fā)5例，完全緩解/部分緩解7例。另選取同期健康體檢者20例，設(shè)為對照組，其中男11例，女9例；年齡20～69歲，平均（25.4±1.6）歲。

1.2 標本采集：于清晨空腹狀態(tài)下抽取靜脈血5 mL，不抗凝，并于2 h內(nèi)采用2 000 r/min離心15 min，取血清標本，并將標本完成分裝，放置冰箱內(nèi)凍存，溫度控制在-18 ℃，不可反復(fù)凍融。

1.3 sFas、血清VEGF水平的測定：運用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）分別對sFas及血清VEGF水平給予測定，選用購自武漢尚柏生物技術(shù)有限公司試劑盒，依據(jù)說明書步驟，完成各項操作。選用購自美國Therrno公司的MuLtiskanMK3；ELX800酶標儀則購自BIO-TEK公司。

1.4 統(tǒng)計學方法：采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行處理，計量資料以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用方差分析；采用相關(guān)系數(shù)的顯著性對變量間的關(guān)系予以檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

難治/復(fù)發(fā)組、初發(fā)組VEGF和sFas水平均高于對照組（均P＜0.05）；難治/復(fù)發(fā)組VEGF和sFas水平高于初發(fā)組（均P＜0.05）；緩解組與對照組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。VEGF與sFas呈正相關(guān)（r=0.662，P＜0.01）。見表1。

3 討 論

當前，VEGF作為正性血管生成調(diào)節(jié)因子，具有很強的調(diào)節(jié)功能，至此，國內(nèi)外多次研究尤為重視，尤其是其與血液系統(tǒng)惡性腫瘤之間的關(guān)系，VEGF除了與急性淋巴細胞白血病相應(yīng)發(fā)生及發(fā)展進程中有所參與外，而且還密切相關(guān)于腫瘤細胞耐藥。在血小板當中，因VEGF具有相應(yīng)程度的表達，在凝血過程中，血小板可釋放VEGF，且將其融入至血清當中，所以對于血小板數(shù)目而言，其對血清VEGF水平具有明顯影響。而對急性白血病患者，在其外周血當中，由于存有較低血小板水平，所以需將因血小板數(shù)過低，而導致凝血中，不斷減少的血小板VEGF釋放，從而對血清總VEGF水平所造成的相應(yīng)干擾予以充分考慮。本次研究可知，難治/復(fù)發(fā)組血清VEGF水平，相比于正常對照組及緩解組，高于后者，且具有明顯差異，而緩解組相比對照組，則兩組差異不明顯。由此可知，VEGF可能相關(guān)于腫瘤細胞耐藥。綜合上述研究可知，通過抑制VEGF，可提升白血病細胞針對所使用化療藥物的敏感性。

表1 4組sFas及血清VEGF水平比較（±s）

表1 4組sFas及血清VEGF水平比較（±s）

注：與對照組相比，*P＜0.01；與初發(fā)組相比，&P＜0.01

組別 例數(shù) VEGF/PLT(pg/106) sFas(μg/L)初發(fā)組 8 20.44±6.54* 4.22±1.16*難治/復(fù)發(fā)組 5 54.24±16.66*& 5.49±0.75*&緩解組 7 6.89±4.37 2.43±0.89對照組 20 5.42±3.10 2.97±0.97 F值P值 0.0084 0.0069

Fas乃是一種跨膜糖蛋白，其乃為腫瘤壞死因子的一部分。如若Fas與抗Fas相結(jié)合，可將死亡信號傳遞給靶細胞內(nèi)，激活Caspase酶原，造成敏感Fas陽性細胞，出現(xiàn)一定程度的凋亡狀況。如若Fas存有基因轉(zhuǎn)錄異常，可造成跨膜區(qū)出現(xiàn)缺乏Fas蛋白狀況，脫落于細胞膜中，形成sFas，其通過以競爭性方式，通過結(jié)合于膜Fas，最終便構(gòu)成了FasL，對Fas介導相應(yīng)細胞凋亡具有阻斷作用[3]。本次研究在sFas水平上，難治/復(fù)發(fā)組與初發(fā)組較之對照組，均高于后者，且彼此間差異顯著，難治/復(fù)發(fā)組高于初發(fā)組，緩解組與對照組無差異。本次研究可知，急性淋巴細胞白血病患者sFas的表達，與VEGF之間，存在十分明顯的正相關(guān)，表明二者抗凋亡機制存在一定關(guān)系，但仍然具有不清晰的相關(guān)機制，需要對其開展深入的研究工作。

總之，血清VEGF與sFas水平的測定，可被用作白血病的病理狀態(tài)及轉(zhuǎn)歸的評價，通過對這些因子實施聯(lián)合檢測，可能會更具有臨床價值。

[1] 張曉冬,李俊豐,趙倩倩,等.白血病血清吸收光譜的研究[J].激光與紅外,2013,43(3)：267-269.

[2] 陳淑霞,王宇宵.白血病患者血清Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原、層粘連蛋白、紅細胞生成素及血小板生成素水平的變化[J].中國基層醫(yī)藥,2015,22(13)：1739-1740.

[3] 王心明,陳云波,賈明庫,等.可溶性Fas與VEGF及TIMP-1表達在乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系[J].中國生物制品學雜志,2014,27(65)：68-570.