牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛產(chǎn)奶量、體細(xì)胞及乳成分的影響

劉景喜 史夏斌 靳文仲 季晨 曹學(xué)浩 馬樹綱 周天琪 蘆娜

摘 要：本試驗(yàn)以年齡、胎次、泌乳天數(shù)、產(chǎn)奶量相近，體細(xì)胞數(shù)在50萬(wàn)～150萬(wàn)個(gè)·mL-1范圍內(nèi)的荷斯坦奶牛為研究對(duì)象，設(shè)置對(duì)照組和試驗(yàn)組，分別灌服生理鹽水和牛乳鐵蛋白肽，研究灌服牛乳鐵蛋白肽對(duì)患隱性乳房炎奶牛產(chǎn)奶量、體細(xì)胞數(shù)及乳成分的影響。結(jié)果表明：（1）與0 d相比，30 d時(shí)試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量顯著提高了8.54%（P<0.01），而對(duì)照組則顯著降低了18.30%（P<0.01），且試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量比對(duì)照組高33.37%，差異顯著（P<0.05）；（2）與0 d相比，30 d時(shí)對(duì)照組和試驗(yàn)組奶牛體細(xì)胞數(shù)分別顯著降低了75.09%（P<0.01）和83.72%（P<0.01），且后者較前者低32.92%，但差異不顯著（P>0.05）；（3）灌服牛乳鐵蛋白肽后，奶牛乳成分指標(biāo)中干物質(zhì)含量、乳脂率、乳蛋白率和無(wú)脂固形物含量較灌服前均有一定程度的下降，而乳糖和尿素氮含量則有一定幅度的上升，但差異均未達(dá)顯著水平（P>0.05）。綜合而言，牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎的治療有一定的輔助效果，可顯著提高隱性乳房炎奶牛日產(chǎn)奶量并降低體細(xì)胞數(shù)。

關(guān)鍵詞：奶牛；隱性乳房炎；牛乳鐵蛋白肽；產(chǎn)奶量；體細(xì)胞；乳成分

中圖分類號(hào)：S858.23 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.12.015

Abstract： The experiment was conducted to study the influence of bovine lactoferricin on milk production， somatic cells and milk components in recessive mastitis cows. The Holstein cows were as objectives which had similar ages， lactation， milk days， and milk yield， and the somatic cell amounts were between（50～150）×104·mL-1. Two groups were set including control group and experimental group. The cows in control group was used to drench with physiological saline， while the cows in experimental group were used to drench with bovine lactoferricin. The results showed that compared with day 0， the milk production of cows in the experimental group was significantly increased by 8.54%（P<0.01） at day 30， while that of the control group was significantly reduced by 18.30%（P<0.01）， and the milk production of cows in the experimental group at day 30 was significant higher than that of the control group（P<0.05）. Compared with day 0， the somatic cell number of cows in the control group and the experimental group at day 30 significantly decreased by 75.09%（P<0.01） and 83.72%（P<0.01） respectively， and the experimental group was 32.92% lower than the control group， but the difference was not significant（P>0.05）. After the application of bovine lactoferrin， the dry matter， milk fat， milk protein and lipid free solid content in the milk were decreased while the lactose and urea nitrogen content were increased， but the difference was not significant（P>0.05）. There was no significant difference in milk components between the experimental group and control group（P>0.05）. In conclusion， the bovine lactoferrin had a certain auxiliary effect in the treatment on recessive mastitis cows， which could significantly increase the daily milk production and reduce the number of somatic cells.

Key words： cows； recessive mastitis； bovine lactoferrin； milk production； somatic cells； milk components

乳房炎是奶牛最常見、危害最嚴(yán)重的疾病之一，發(fā)病率高，防治難度大，給奶牛養(yǎng)殖帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重制約奶牛業(yè)健康發(fā)展。奶牛乳房炎可分為臨床型乳房炎和隱性乳房炎?；寂R床型乳房炎的奶牛表現(xiàn)出拒食、體溫高、乳房紅腫，產(chǎn)奶量下降，有絮狀奶[1]。隱性乳房炎臨床癥狀表現(xiàn)不明顯，常被忽視，易造成更大的潛在危害，導(dǎo)致奶牛產(chǎn)奶量下降，引起常規(guī)乳成分變化，體細(xì)胞數(shù)升高（高于50萬(wàn)個(gè)·mL-1）[1-3]。

高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)是奶牛養(yǎng)殖業(yè)的根本目標(biāo)，隨著行業(yè)的快速發(fā)展，乳房炎防治成為重中之重。傳統(tǒng)的抗生素治療方法具有諸多弊端，包括廣譜耐藥性和藥物殘留，其使用受到廣泛爭(zhēng)議。因此，需要探索更為環(huán)保、有效的治療方法。

牛乳鐵蛋白肽（bovine lactoferricin，lfcinb）是牛乳鐵蛋白在胃蛋白酶水解作用下釋放出的一種含有25個(gè)氨基酸殘基的短肽，具有多種生物學(xué)功能，包括廣譜高效的抗菌功能、抑制病毒、抑制腫瘤細(xì)胞、調(diào)節(jié)免疫活性等[4]，且不易產(chǎn)生耐藥性，耐熱性好，在未來(lái)可能成為優(yōu)良的抗生素替代品。

本文對(duì)患隱性乳房炎的奶牛灌服牛乳鐵蛋白肽后的產(chǎn)奶量、乳成分和體細(xì)胞數(shù)進(jìn)行研究，探討牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎的治療效果，以期為奶牛健康養(yǎng)殖提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用產(chǎn)品為乳生肽，購(gòu)自湖南得譯生物科技有限公司，主要成分為：牛乳鐵蛋白肽1 500萬(wàn)活性單位·g-1，以及載體。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2017年9—10月在天津嘉立荷畜牧有限公司第十奶牛場(chǎng)分公司進(jìn)行。選擇年齡、胎次、泌乳天數(shù)、產(chǎn)奶量相近，體細(xì)胞數(shù)在50萬(wàn)～150萬(wàn)個(gè)·mL-1范圍內(nèi)的荷斯坦奶牛26頭，隨機(jī)分為2組，即對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組13頭奶牛作為13個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)期間，每天中午12：00對(duì)照組奶牛灌服生理鹽水500 mL·頭-1，試驗(yàn)組灌服乳生肽15 g·頭-1（溶于500 mL雙蒸水中），試驗(yàn)期30 d。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)?zāi)膛Ｉ陲曫B(yǎng)，每天飼喂全混合日糧（TMR）3次（08：00、14：00、19：00），自由采食；機(jī)械擠奶3次（04：00、12：00、20：00），自由飲水。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 產(chǎn)奶量 試驗(yàn)期間每天記錄每頭奶牛的產(chǎn)奶量，3次之和即為日產(chǎn)奶量。

1.4.2 乳成分 0，30 d時(shí)采集牛奶樣品。采樣前，向每份樣品瓶中加入重鉻酸鉀0.03 g，按照早、中、晚4∶3∶3的比例混合至40 mL，送至天津市奶牛發(fā)展中心DHI測(cè)定室進(jìn)行檢測(cè)。其中體細(xì)胞數(shù)、乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、無(wú)脂固形物含量、干物質(zhì)含量及尿素氮含量采用多功能乳制品分析儀CombiFoss FT+（丹麥FOSS）檢測(cè)。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)經(jīng)Microsoft Excel 2010初步處理后，采用SPSS 20.0中的獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及配對(duì)樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行分析，以P<0.05和P<0.01作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛產(chǎn)奶量的影響

由表1可知，0 d時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組奶牛產(chǎn)奶量差異不顯著（P>0.05），說(shuō)明試驗(yàn)初始組間產(chǎn)奶水平一致，分組合理；30 d時(shí)，試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量比對(duì)照組高33.37%，差異顯著（P<0.05）；與0 d相比，30 d時(shí)試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量顯著提高了8.54%（P<0.01），而對(duì)照組則顯著降低了18.30%（P<0.01）。

2.2 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛體細(xì)胞數(shù)的影響

由表2可知，0 d時(shí)，試驗(yàn)組和對(duì)照組牛奶體細(xì)胞數(shù)差異不顯著（P>0.05），說(shuō)明試驗(yàn)初始組間體細(xì)胞水平一致，分組合理；30 d時(shí)，試驗(yàn)組奶牛體細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組降低32.92%，但差異不顯著（P>0.05）；與0 d時(shí)相比，30 d時(shí)對(duì)照組和試驗(yàn)組奶牛體細(xì)胞數(shù)分別顯著降低了75.09%和83.72%（P<0.01）。

2.3 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛乳成分的影響

由表3可知，無(wú)論是0 d還是30 d，試驗(yàn)組牛奶乳成分包括乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、無(wú)脂固形物含量、尿素氮含量與對(duì)照組的差異均不顯著（P>0.05），且無(wú)論是試驗(yàn)組還是對(duì)照組，灌服牛乳鐵蛋白肽前（0 d）后（30 d）之間差異亦不顯著（P>0.05），說(shuō)明灌服牛乳鐵蛋白肽對(duì)牛奶乳成分無(wú)顯著影響（P>0.05）。

3 結(jié)論與討論

3.1 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛產(chǎn)奶量的影響

奶牛產(chǎn)奶量受到多種因素影響，包括日糧、年齡、疾病、胎次、泌乳期、環(huán)境等，其中乳房炎是最大的影響因素之一[5]?；加须[性乳房炎的奶牛，其乳腺組織受到一定程度的損傷，影響乳腺正常的分泌機(jī)能，導(dǎo)致產(chǎn)奶量下降，并且體細(xì)胞水平越高，乳損失量越大[6-7]。Natzke[8]報(bào)道，被感染的單個(gè)乳區(qū)可使奶牛泌乳期產(chǎn)奶量下降10%～12%；李國(guó)江等[9]報(bào)道，隱性乳房炎導(dǎo)致每頭奶牛平均日產(chǎn)奶量減少3.7 kg；楊麗杰[3]等研究發(fā)現(xiàn)，患有隱性乳房炎的奶牛平均日產(chǎn)奶量減少2.75 kg。

研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加抗菌肽復(fù)合制劑顯著提高奶牛產(chǎn)奶量[10]。呂偉[5]報(bào)道，精補(bǔ)料中添加600， 1 200 g·t-1牛乳鐵蛋白活性肽使產(chǎn)奶量分別提高15.09%和17.31%（P<0.05）。在本試驗(yàn)中，灌服牛乳鐵蛋白肽30 d后，試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量比對(duì)照組高33.37%（P<0.05）；與0 d相比，30 d時(shí)試驗(yàn)組奶牛產(chǎn)奶量提高了8.54%（P<0.01），而對(duì)照組則降低了18.30%（P<0.01）。這可能是由于牛乳鐵蛋白肽具有廣譜抑菌和殺菌作用，緩解了隱性乳房炎對(duì)產(chǎn)奶量的影響，并通過(guò)其抗氧化機(jī)制維持了奶牛的乳房健康，從而提高產(chǎn)奶量，而對(duì)照組產(chǎn)量下降可能是由于泌乳時(shí)間的延長(zhǎng)和隱性乳房炎的雙重影響。

3.2 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛體細(xì)胞數(shù)的影響

體細(xì)胞數(shù)是指每毫升牛奶中的細(xì)胞總數(shù)，以巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等白細(xì)胞為主，牛奶中的體細(xì)胞數(shù)反映奶牛機(jī)體的健康狀況、牛奶產(chǎn)量及質(zhì)量。正常情況下，牛奶中的體細(xì)胞數(shù)在2萬(wàn)～20萬(wàn)個(gè)·mL-1，而當(dāng)乳房有外傷或因疾病引起炎癥時(shí)，體細(xì)胞數(shù)則超過(guò)50萬(wàn)個(gè)·mL-1。乳房炎主要由細(xì)菌感染引起，牛奶中的體細(xì)胞數(shù)與葡萄球菌、革蘭氏陽(yáng)性菌、鏈球菌、菌落總數(shù)呈正相關(guān)[11- 12]。乳鐵蛋白肽具有廣譜抗菌作用，能夠抵抗革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌和真菌，包括大腸桿菌、腸炎沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、白色念珠菌等[13-14]。研究發(fā)現(xiàn)，飼喂抗菌肽能夠降低隱性乳房炎患牛的體細(xì)胞數(shù)，抗菌肽復(fù)合制劑的效果更為顯著[10， 15]。呂偉[5]報(bào)道，精補(bǔ)料中添加600，1 200 g· t-1牛乳鐵蛋白活性肽使牛奶體細(xì)胞數(shù)分別降低55.77%和59.39%（P<0.05）。在本試驗(yàn)中，與0 d時(shí)相比，30 d時(shí)對(duì)照組及試驗(yàn)組奶牛體細(xì)胞數(shù)均極顯著降低，這可能是由于試驗(yàn)開始于9月，結(jié)束于10月，氣溫、季節(jié)的變化導(dǎo)致體細(xì)胞數(shù)均有降低，但對(duì)照組體細(xì)胞數(shù)仍高于20萬(wàn)個(gè)·mL-1，說(shuō)明正常的季節(jié)或氣溫變化并不能使奶?；謴?fù)至正常狀況，需要輔助措施，而30 d時(shí)試驗(yàn)組體細(xì)胞數(shù)降低至14.16萬(wàn)個(gè)·mL-1，雖與對(duì)照組差異不顯著，但對(duì)于隱性乳房炎的治療仍有一定輔助效果；30 d時(shí)，試驗(yàn)組奶牛體細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組降低32.92%，說(shuō)明牛乳鐵蛋白肽能夠在一定程度上降低體細(xì)胞數(shù)。

3.3 牛乳鐵蛋白肽對(duì)隱性乳房炎奶牛乳成分的影響

隱性乳房炎可改變?nèi)槌煞郑涓淖兂潭扰c隱性乳房炎的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[16]。牛奶中的干物質(zhì)包括乳脂、乳蛋白、乳糖、無(wú)機(jī)鹽及其他微量元素。奶牛感染乳房炎后，采食量下降，營(yíng)養(yǎng)攝入不足，乳腺生理機(jī)能下降，影響各物質(zhì)分泌，進(jìn)而導(dǎo)致牛奶干物質(zhì)含量降低[17]。研究發(fā)現(xiàn)飼喂多肽菌素能夠顯著提高健康荷斯坦奶牛乳脂率，一定程度上提高乳蛋白率、乳糖含量[18]。徐名能等[19]研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加抗菌肽制劑能夠顯著提高牛奶乳脂率，但對(duì)乳蛋白率沒(méi)有影響。呂月琴等[10]在隱性乳房炎患牛的日糧中添加抗菌肽復(fù)合制劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，抗菌肽復(fù)合制劑能夠顯著提高牛奶乳脂率和乳蛋白率。而日糧添加牛乳鐵蛋白活性肽能顯著提高乳脂率和乳蛋白率[5]。

本試驗(yàn)中，灌服牛乳鐵蛋白肽后，干物質(zhì)含量、乳脂率、乳蛋白率較灌服前均有一定程度的降低，這可能是因?yàn)殡[性乳房炎奶牛癥狀緩解，奶牛產(chǎn)奶量提高的速度較乳腺細(xì)胞合成和分泌各物質(zhì)（包括脂肪）能力恢復(fù)的速度快，對(duì)乳汁形成一定的稀釋作用所致[20]；而對(duì)照組干物質(zhì)含量和乳脂率則均有一定程度的升高，應(yīng)該是由于產(chǎn)奶量下降產(chǎn)生一定的濃縮效應(yīng)所致；對(duì)照組乳蛋白率亦有所下降，但其下降幅度較試驗(yàn)組低；與0 d相比較，無(wú)論是對(duì)照組還是試驗(yàn)組，30 d時(shí)牛奶中乳糖率均有一定程度的升高，且試驗(yàn)組升高幅度大于對(duì)照組，說(shuō)明牛乳鐵蛋白肽對(duì)乳糖合成有一定的促進(jìn)作用。綜合而言，雖然各項(xiàng)乳成分指標(biāo)在灌服前后以及是否灌服牛乳鐵蛋白肽之間差異均未達(dá)顯著水平，但各指標(biāo)的相對(duì)變化趨勢(shì)亦可說(shuō)明牛乳鐵蛋白肽對(duì)奶牛隱形乳房炎有一定的緩解作用，因此，牛乳鐵蛋白肽對(duì)奶牛隱形乳房炎的防治或治療效果還有待于進(jìn)一步開展長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)試驗(yàn)。

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