Ⅱ型固有淋巴細胞及其在支氣管哮喘中的作用

楊 丹，劉碧翠，劉春濤

作者單位:610041成都，四川大學(xué)華西醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科

支氣管哮喘是一種氣道慢性炎癥性疾病，既往認為哮喘是由Th2細胞介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫反應(yīng)。近來研究發(fā)現(xiàn)，哮喘的發(fā)生是固有免疫與適應(yīng)性免疫相互作用的結(jié)果，兩者相輔相承，共同促進氣道炎癥的發(fā)生［1］。固有淋巴細胞 (innate lymphoid cells，ILCs)是新發(fā)現(xiàn)的一類具有淋巴細胞的典型形態(tài)，但又不表達T細胞、B細胞等免疫細胞的特異性抗原識別受體的細胞，此種細胞在固有免疫應(yīng)答中具有重要的作用［2］。ILCs根據(jù)產(chǎn)生效應(yīng)細胞因子及涉及轉(zhuǎn)錄因子的不同分為3種類型:分泌γ干擾素 (interferon-γ，IFN-γ)、受轉(zhuǎn)錄因子T-bet調(diào)控的ILC1s，產(chǎn)生2型細胞因子、受GATA結(jié)合因子 3(GATA-bindingfactor3，GATA3)和維A酸相關(guān)孤核受體α(retinoic acid receptor related orphan receptor α，RORα) 調(diào)控的ILC2s以及產(chǎn)生白介素 (interleukin，IL)-17和IL-22、受 RORγt 調(diào)控的 ILC3s［3］。近年來關(guān)于ILC2s介導(dǎo)的2型免疫應(yīng)答在支氣管哮喘中的作用正日益引起人們的關(guān)注，本文就ILC2s及其在哮喘中作用的研究進展作一綜述。

1 ILC2s的發(fā)現(xiàn)、分布和來源

Fort等［4］于 2001 年首次報道了從 Rag－/－小鼠脾臟中分離出的一種非T、非B的新型細胞，在體外用IL-25誘導(dǎo)后引起IL-4、IL-5、IL-13表達增加，從而產(chǎn)生 Th2樣免疫反應(yīng)，表現(xiàn)為血 IgE、IgG1、IgA水平升高、血液嗜酸性粒細胞增多以及肺臟和消化道嗜酸性粒細胞浸潤等病理改變，這種細胞后來被證實為 ILC2s。Mjosberg 等［5］首次在胎兒和成人中發(fā)現(xiàn)了Lineage，可表達IL-7R、CD161和Th2細胞趨化因子受體同源分子 (chemoattractant receptor-homologous molecule expressed on Th2 cell，CRTH2)的細胞群，被命名為人類ILC2s。

ILC2s廣泛分布于全身各個部位，在黏膜組織中尤為豐富，肺臟作為人體的黏膜免疫耐受器官，是ILC2s的主要聚集地之一。在哮喘患者或小鼠的外周血、肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage fluid，BALF)、痰液、肺組織、縱隔淋巴結(jié)中均可檢測到ILC2s［6-9］。與T、B淋巴細胞一樣，所有的ILCs均來源于骨髓中的共同淋巴樣祖細胞 (common lymphoid progenitor，CLP)。骨髓造血干細胞(hematopoietic stem cell，HSC)分化成早期淋巴樣祖細胞 (early lymphoid progenitor，ELP)，然后進一步發(fā)育成CLP，DNA結(jié)合抑制因子 (inhibitor of DNA binding 2，Id2)可抑制其向T、B細胞方向分化，而在Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、GATA3等的調(diào)控下發(fā)育為共同 ILC祖細胞 (common ILC progenitors，CILPs)，其中RORα和GATA3高表達的CILPs可定向分化為 ILC2s［10］。

2 ILC2s的調(diào)控

2.1 上皮細胞源性細胞因子

最初發(fā)現(xiàn)激活I(lǐng)LC2s的介質(zhì)是上皮細胞源性的細胞因子IL-25、IL-33和胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素(thymic stromal lymphopoietin，TSLP)。氣道的IL-33是ILC2s的主要激活物，有研究報道IL-33信號通路較IL-25表達更迅速，其作用可能更為重要［11］。研究發(fā)現(xiàn)，鼻病毒感染人類支氣管上皮細胞 (bronchial epithelial cells，BECs)后，其上清液IL-33及2型細胞因子水平均升高;IL-33在上皮細胞-Th2-ILC2s軸中起到關(guān)鍵作用，阻斷上游的IL-33比直接阻斷2型細胞因子能更加有效地抑制氣道炎癥［12］。Christianson 等［13］通過阻斷小鼠的IL-33受體減少了IL-5+、IL-13+ILC2s的數(shù)量，他們設(shè)想ILC2s和IL-33之間存在多條前饋和反饋回路以維持哮喘的慢性氣道炎癥，其中前者是指IL-33刺激ILC2s產(chǎn)生IL-13，而IL-13可誘導(dǎo)氣道上皮細胞表達編碼IL-33受體的mRNA，從而促進IL-33的自分泌?？乖碳L-25和IL-33通路缺陷的小鼠后，其肺泡灌洗液ILC2s數(shù)量減少;而對野生型小鼠鼻內(nèi)給予IL-25、IL-33處理可誘導(dǎo)肺內(nèi)多種與2型免疫應(yīng)答相關(guān)的基因表達［11］。TSLP由Toll樣受體 (toll-like receptor，TLR)激動劑、感染、過敏原所誘導(dǎo)，其在適應(yīng)性免疫和固有免疫介導(dǎo)的2型炎癥應(yīng)答中均發(fā)揮重要作用。鼻息肉上皮細胞表達的TSLP可觸發(fā)STAT5的磷酸化，促進GATA3表達，介導(dǎo) ILC2s產(chǎn)生大量2型細胞因子［14］。TSLP受體拮抗劑可減少過敏原誘發(fā)的支氣管收縮和氣道炎癥，以TSLP為靶點的新療法正在嘗試應(yīng)用于臨床［15］。鼻病毒感染的小鼠體內(nèi)IL-25的產(chǎn)生、黏液上皮化生、ILC2s的擴增均依賴于IL-33和TSLP，而TSLP可增強IL-25和IL-33介導(dǎo)的ILC2s基因表達，三者之間復(fù)雜的調(diào)控機制并不明了［16］。以上研究結(jié)果表明，IL-25、IL-33、TSLP均能夠激活I(lǐng)LC2s，因組織、實驗背景和疾病狀態(tài)等不同，尚難以評價三者的相對重要性。

2.2 脂質(zhì)介質(zhì)

半胱氨酰白三烯 (cysteinyl leukotrienes，Cys-LTs)和前列腺素 D2(prostaglandin D2，PGD2)等脂質(zhì)介質(zhì)在ILC2s的活化中也起到重要作用。過敏原特異性IgE誘導(dǎo)肥大細胞活化后產(chǎn)生大量的PGD2，其結(jié)合于ILC2s表面的CRTH2致使ILC2s活化，同時伴隨IL-25、IL-33受體表達增加，提示CRTH2可能是聯(lián)系固有免疫和適應(yīng)性免疫的重要分子，拮抗CRTH2可阻斷PGD2的效應(yīng)，PGD2-CRTH2通路有望成為藥物治療的新靶點［17］。各型CysLTs對ILC2s的遷移均有一定的作用，其強度有所不同，研究顯示 LTE4＞LTD4＞LTC4≈IL-33［18］。白三烯E(leukotrienes，LTE4)可增強PGD2和上皮細胞源性細胞因子的作用，在IL-2的協(xié)同下使IL-33和IL-25的受體表達上調(diào)，共同觸發(fā)ILC2s的炎癥應(yīng)答［18］。過敏原致敏的 RAG2－/－小鼠以不依賴于STAT6的方式快速產(chǎn)生LTD4，激活I(lǐng)LC2s，使IL-5和IL-13產(chǎn)生增加，并快速促進鈣離子內(nèi)流［19］。與IL-33不同，LTD4誘導(dǎo)ILC2s可產(chǎn)生大量IL-4［19］，對B細胞的活化和增殖可能起到一定的作用。此外，LTC4作用于CysLT1R后二者可發(fā)揮協(xié)同效應(yīng)，促使IL-33的活化，增強NFAT1的核轉(zhuǎn)位，使Ki67+IL-5+ILC2s明顯增加［20］。以上研究提示脂質(zhì)介質(zhì)在ILC2s的活化中發(fā)揮重要作用，且對其他激活物有一定的調(diào)節(jié)作用。

2.3 腫瘤壞死樣因子配體

近來研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤壞死樣因子配體 (tumor necrosis factor-like ligand1A，TL1A)受體DR3也存在于 ILC2s，對黏膜免疫應(yīng)答發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。DR3－/－小鼠木瓜蛋白酶鼻內(nèi)刺激試驗不能誘發(fā)肺的ILC2s應(yīng)答，GATA3表達下調(diào)，其下游的ILC2s相關(guān)基因如IL-13、雙調(diào)蛋白及ST2的表達受到抑制，提示TL1A/DR3通路對ILC2s的增殖和激活起著重要作用［21］。TL1A對 ILC2s的激活可以獨立于IL-25和IL-33，也可以協(xié)同兩者的作用［21］。

2.4 誘導(dǎo)T細胞共刺激分子及其配體

誘導(dǎo)T細胞共刺激分子 (inducible T cell costimulator，ICOS)屬于免疫球蛋白超家族成員。ICOS及其配體 (ICOS/ICOS-L)通路可能通過STAT5信號轉(zhuǎn)導(dǎo)促進 ILC2s的增生、穩(wěn)態(tài)和活化［22］，阻斷 Rag2－/－小鼠 ILC2s 的 ICOS/ICOS-L，可明顯減弱IL-33介導(dǎo)的氣道高反應(yīng)性和氣道炎癥［22］。研究者還發(fā)現(xiàn)，ICOS－/－小鼠早期凋亡(Annexin V+，DCD－)、晚期凋亡 (Annexin V+，DCDint)及死亡 (DCD)數(shù)目均較野生型有所增加，可能與抗凋亡因BC子L-2在ICOS－/－ILC2s中明顯減少有關(guān)［22］。誘導(dǎo)調(diào)節(jié) T細胞 (induced Tregs，iTregs)的ICOS與ILC2s的ICOS-L相互作用伴隨著抑制性細胞因子TGF-β和IL-10的產(chǎn)生，可有效地抑制ILC2s介導(dǎo)的促炎介質(zhì)生成［23］。

2.5 蛋白激酶Cθ

蛋白激酶 Cθ (protein kinase C theta，PKCθ)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白酶，其作用與轉(zhuǎn)錄因子干擾素調(diào)節(jié)因子4(interferon regulatory factor 4，IRF4)和激活T細胞核因子 (nuclear factor of activated T cells，NFAT1)的表達有關(guān)，通過激活I(lǐng)LC2s可能促進Th2細胞的活化和增殖［24］。

2.6 微小RNA-155

微小RNA(microRNAs，miRs)屬于非編碼小RNA，在過敏性氣道炎癥中，IL-33活化引起ILC2s增生且 miR-155表達上調(diào)10倍，而 miR-155－/－ILC2s增殖減少，GATA-3和 ICOS表達降低，引起IL-13產(chǎn)生減少，但IL-5的變化并無統(tǒng)計學(xué)意義的差異，提示miR-155對ILC2s的功能有直接調(diào)節(jié)作用［25］。

2.7 抑制性調(diào)節(jié)因子

脂氧素A4(lipoxin A4，LXA4)和前列腺素I2(prostaglandin I2，PGI2)也屬于脂質(zhì)遞質(zhì)，近來被認為是ILC2s的負調(diào)節(jié)因子。LXA4是一種天然促炎癥消退的配體，與ILC2s上的ALX/FPR2受體結(jié)合可顯著地減少IL-13的分泌，提示LXA4可以靶向抑制ILC2s，從而減輕氣道炎癥［7］。內(nèi)源性PGI2可與其受體IP結(jié)合，在一定程度上通過蛋白激酶A(protein kinase A，PKA)通路抑制ILC2s的增殖來抑制過敏性炎癥［26］。此外，有學(xué)者提出將小鼠肺臟中的ILC2s分為2種亞型，其中炎癥型ILC2s(inflammatory ILC2s，Lin-ST2-KLRG1hi)是短暫存活的前體細胞，通過炎癥和感染激活上調(diào)γc和 IL-7Rα而發(fā)育成為自然 ILC2s(natural ILC2s，Lin－ST2+KLRG1int)，前者表達有大量殺傷細胞凝集素樣受體G1(killer cell lectin-like receptor G1，KLRG1)，對 ILC2s的功能具有調(diào)節(jié)作用［27］。自然 ILC2s表達一定量的 RORγt并產(chǎn)生大量的ILC3s樣細胞因子IL-17，提示其與ILC3s可能存在轉(zhuǎn)化［27］。Maresin-1也是一種特異性促炎癥消退介質(zhì)，可促進Tregs細胞的更新，并抑制ILC2s及CD4+T細胞產(chǎn)生IL-5和IL-13，加速過敏性炎癥的消退［28］。用 γ 干擾素 (interferon-γ，IFN-γ) 處理鼻病毒感染的幼稚小鼠可使ILC2s擴增減少，并減弱IL-13、黏液相關(guān)基因Muc5ac mRNA的表達及黏液上皮化生［29］。

3 ILC2s與其他細胞間的聯(lián)系

3.1 ILC2s與Th2細胞

Th2細胞和ILC2s分別介導(dǎo)適應(yīng)性免疫和固有免疫應(yīng)答，是免疫系統(tǒng)不可分割的兩個方面，其相互作用機制仍未完全明了。已有研究表明，ILC2s和CD4+T細胞可通過不同的機制相互激活彼此的功能，具有正向調(diào)節(jié)作用［30-33］。OVA致敏小鼠再次使用過敏原時可誘發(fā)回憶應(yīng)答，ILC2s可增強過敏原特異性CD4+Th2細胞所介導(dǎo)的氣道炎癥［31］。寄生蟲感染ILC2s缺乏的小鼠后Th2細胞的免疫應(yīng)答明顯減弱，或許可以用ICOS+CD4+T細胞上白喉毒素 (diphtheria toxin，DTx)相關(guān)的脫靶效應(yīng)來解釋，而ILC2s對CD4+T細胞的激活可能與其表達的主要組織相容性復(fù)合體II(major histocompatibility complex，MHCII) 有關(guān)［33］。ILC2s 可通過細胞接觸依賴的方式調(diào)節(jié)未致敏的T細胞，促進其定向分化為Th2細胞，而抑制其向 Th1細胞分化［32］。ILC2s在共刺激分子CD80、CD86共同作用下，向CD4+T細胞呈遞抗原，增強其免疫應(yīng)答［32］;而T細胞產(chǎn)生的IL-2可促進ILC2s的增殖和IL-13的產(chǎn)生［31-32］。也有研究發(fā)現(xiàn)，BALF中CD4+T細胞激活早于IL-5+IL-13+ILC2s的增殖，提示ILC2s的激活可能依賴于T細胞的作用［34］。然而，有研究報道，固有免疫可獨立于適應(yīng)性免疫而存在，即使沒有適應(yīng)性免疫的參與，ILC2s也可產(chǎn)生2型細胞因子、誘導(dǎo)嗜酸性粒細胞炎癥［8，35-36］。

3.2 ILC2s與B細胞

Moro等［37］從脂肪相關(guān)淋巴簇 (fat-associated lymphoid clusters，F(xiàn)ALC)中分離出ILC2s，其分泌的IL-5可促進CD23-B1細胞的分裂，并伴隨IgA的產(chǎn)生增多，而CD23+B2細胞卻罕見分裂，提示ILC2s產(chǎn)生的IL-5對B1細胞的自我更新具有調(diào)節(jié)作用;新近研究發(fā)現(xiàn)，肺組織中的ILC2s可同時促進B1、B2細胞的增殖［38］。兩項研究的結(jié)論不完全一致，原因可能是兩者ILC2s來源的組織有所不同，其免疫調(diào)節(jié)機制尚待進一步研究。

3.3 ILC2s與嗜酸性粒細胞、中性粒細胞

IL-5和嗜酸細胞活化趨化因子 (eotaxin)可介導(dǎo)嗜酸性粒細胞的發(fā)育、增殖、活化和組織聚集。嗜酸性粒細胞可作為下游效應(yīng)細胞參與ILC2s介導(dǎo)的氣道免疫反應(yīng)，這種調(diào)控作用取決于多種外界因素。研究發(fā)現(xiàn)這可能與表面KLRG1的表達和IL-5重組酶表達探測器 (recombinase-expressing detector for IL-5，R5)的多因素遺傳有關(guān)，當受到感染或炎癥刺激時，肺內(nèi)R5/R5 RAG－/－ILC2s分泌大量的IL-5，并上調(diào)IL-13，刺激上皮細胞產(chǎn)生大量的eotaxin-1(CCL11)，促進嗜酸粒細胞性炎癥［39］。此外，ILC2s基因敲除的小鼠，肺內(nèi)IL-1β、腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor-α，TNF-α) 和 IL-23等表達增加，激活γδT細胞以快速產(chǎn)生IL-17A，并促進中性粒細胞聚集，提示ILC2s對中性粒細胞可能具有抑制作用［40］。

3.4 ILC2s與其他免疫細胞

除上皮細胞外，各種類型的免疫細胞也可分泌IL-33，包括自然殺傷T細胞 (nature killer T cells，NKT cells)、肺泡巨噬細胞 (alveolar macrophage，AM)、樹突狀細胞 (dendritic cells，DCs)和肥大細胞等。糖脂抗原可直接激活NKT細胞，也可以刺激肺泡巨噬細胞產(chǎn)生IL-33，進而活化ILC2s和NKT細胞，使IL-13產(chǎn)生增多，引起氣道高反應(yīng)性［41］。ILC2s來源的IL-13可誘導(dǎo)DCs分泌Th2細胞趨化因子 CCL17，進而產(chǎn)生記憶 Th2細胞應(yīng)答［42］。近來研究發(fā)現(xiàn)，過敏原刺激可通過激動Toll樣受體7/8(TLR-7/8)激活漿液樣樹突狀細胞 (plasmacytoid dendritic cells，pDCs)，產(chǎn)生大量IFN-α，通過增強干擾素調(diào)節(jié)因子-7(interferon regular factor 7，IRF-7)、STAT-1、STAT-2 等促凋亡相關(guān)信號通路，抑制mtor、Pi3k-α、Rac1等相關(guān)基因表達，從而抑制ILC2s增生并誘導(dǎo)其凋亡，減弱氣道高反應(yīng)性［43］。

3.5 ILC2s在哮喘中的作用

近來研究表明ILC2s在哮喘的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。缺乏T、B細胞的小鼠仍保留了一定的氣道高反應(yīng)性 (airway hyper reactivity，AHR)，而同時缺乏ILC2s的小鼠完全不具有AHR，不能維持哮喘的慢性炎癥［13］。ILC2s產(chǎn)生大量的 IL-5、IL-9、IL-13，同時分泌極少量的IL-4、IL-6等細胞因子，共同促進哮喘炎癥的發(fā)生［6，8，44］。此外，ILC2分泌的雙調(diào)蛋白可促進肺臟組織修復(fù)，提示ILC2s在哮喘中或可起到一定的保護作用［45］。

3.6 ILC2s與早發(fā)過敏性哮喘

早發(fā)過敏性哮喘一般認為與I型變態(tài)反應(yīng)及2型細胞因子的釋放有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，在過敏性哮喘(allergic asthma，AA)、過敏性鼻炎 (allergic rhinitis，AR)及健康者均有ILC2s及IL-5、IL-13的產(chǎn)生，而在 AA組顯著高于 AR組和健康者［44］。GATA3和p38 MAPK等分子的表達和磷酸化可能提供關(guān)鍵的調(diào)節(jié)信號，這些生化特征也許可能解釋ILC2s在AA和AR等不同疾病中所發(fā)揮的潛在作用的差異［44］。過敏性哮喘患者予以變應(yīng)原鼻內(nèi)激發(fā)試驗6小時后鼻黏膜的ILC2s募集增多，IL-5、CCL17/TARC等 Th2型細胞因子、脂質(zhì)介質(zhì)PGD2、嗜酸粒細胞趨化因子CCL26/eotaxin-3以及促炎介質(zhì)IL-6表達都有所增多，且與癥狀的嚴重程度呈正相關(guān)，表明ILC2s在氣源性過敏原誘發(fā)的早期氣道過敏反應(yīng)中起到了重要作用［46］。OVA或HDM誘發(fā)哮喘的動物模型中，ILC2s在肺臟和BALF中分別占了IL-5+/IL-13+細胞總數(shù)的50%和80%，提示ILC2s是2型細胞因子的主要來源［8］。Halim等［47］研究發(fā)現(xiàn)，木瓜蛋白酶可損傷氣道上皮細胞，促進野生型和 Rag1－/－小鼠 IL-33的釋放，進而激活肺自然輔助細胞 (lung natural helper cells，LNH cells，后證實為ILC2s)，引起嗜酸性粒細胞浸潤以及黏液高分泌，而 Rag2－/－Il2rg－/－小鼠因缺乏LNH細胞IL-5和IL-13明顯減少。以上大量研究證實了ILC2s在過敏性哮喘中的重要地位，而ILC2s的數(shù)量和活性與哮喘的嚴重程度或急性加重是否有關(guān)尚需進一步探索。

3.7 ILC2s與遲發(fā)嗜酸性粒細胞哮喘

遲發(fā)性哮喘多為非過敏性哮喘，通常與暴露于相關(guān)環(huán)境因素如病毒感染、空氣污染、煙草、柴油顆粒等相關(guān)，可伴有鼻息肉、慢性鼻竇炎等，也常伴隨有持續(xù)性嗜酸性粒細胞浸潤。慢性鼻-鼻竇炎患者的鼻息肉內(nèi)可檢出 ILC2s［5］。Jackson 等［12］通過鼻病毒感染建立哮喘急性發(fā)作的動物模型，發(fā)現(xiàn)其支氣管上皮細胞釋放 IL-33，激活 T細胞及ILC2s，相對Th0細胞而言ILC2s可產(chǎn)生200倍的IL-5和100倍的IL-13。此外，病毒可通過激活Toll樣受體 7(Toll-like receptor 7，TLR7)和NLRP3炎癥小體，從而導(dǎo)致肺泡巨噬細胞釋放大量IL-33，經(jīng)由 IL-33-ST2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)使得 ILC2s活化［36］。

3.8 ILC2s與肥胖相關(guān)性哮喘

肥胖可能增加哮喘急性發(fā)作的風險，ILC2s與ILC3s可能在肥胖相關(guān)性哮喘中具有重要作用。高脂飲食所致肥胖使得HDM致敏小鼠的過敏性氣道炎癥 (airway allergic inflammation，AAI)急性加重，肺內(nèi) ILC2s、NCR-ILC3s、CD4+T 細胞和 IL-13、IL-4、CCL11以及IL-17產(chǎn)生增多，引起氣道反應(yīng)性增高，可能與ILC2s上RORα的高表達有關(guān)［9］。而ILC2s與ILC3s在肥胖相關(guān)性哮喘中的貢獻及Th2/TH17型免疫應(yīng)答的相對重要性尚需更多的研究加以評價。

3.9 ILC2s與重癥哮喘

重癥哮喘患者痰液和外周血中ILC2s較輕癥患者明顯升高，雖然痰液中CD4+T細胞絕對計數(shù)明顯高于ILC2s和嗜酸性粒細胞祖細胞 (eosinophil progenitors，EoPs)水平，但ILC2s是2型細胞因子的主要來源［6］。重癥哮喘患者痰液中 IL-5+IL-13+ILC2s水平明顯升高，伴有痰嗜酸性粒細胞(eosinophil，EOS)增多，而外周血并無明顯變化，可能與ILC2s分泌的IL-13促進原始祖細胞的肺部遷移和IL-5驅(qū)動局部細胞的成熟有關(guān)［6］。此外，僅有IL-5+ILC2s顯著升高，IL-13+ILC2s的升高并無統(tǒng)計學(xué)意義，提示不同功能狀態(tài)的ILC2s在重癥哮喘中的作用有所差別［6］。另有研究報道外周血中ILC2s水平在健康者、輕度哮喘、重度哮喘患者之間并無顯著性差異［7］。這些研究結(jié)果的差異是由于外周血中ILC2s數(shù)量極少，利用外周血來比較ILC2s數(shù)量有一定的困難，抑或是ILC2s在肺臟局部的聚集與外周血分布不一致尚不清楚，而其作用的具體機制也有待進一步探索。

3.10 ILC2s與糖皮質(zhì)激素抵抗型哮喘

ILC2s對糖皮質(zhì)激素的應(yīng)答在不同物種、不同個體和不同環(huán)境中可能存在差異。真菌過敏原致敏的小鼠予以地塞米松干預(yù)后肺組織Ki-67+ILC2s減少，凋亡增加，提示ILC2s可能對糖皮質(zhì)激素有反應(yīng)［48］。在輕度哮喘患者的過敏原激發(fā)試驗中，ILC2s和CD4+T細胞均可被激活，而地塞米松明顯減弱了 IL-2和 IL-33活化的兩種細胞的 IL-5、IL-13的產(chǎn)生，且這種抑制作用呈現(xiàn)劑量依賴性［49］。然而，大多數(shù)研究顯示人類ILC2s可能對糖皮質(zhì)激素治療并不敏感。哮喘患者盡管使用了大劑量口服糖皮質(zhì)激素，ILC2s仍可在局部產(chǎn)生大量2型細胞因子致使氣道炎癥持續(xù)存在，提示ILC2s可能對糖皮質(zhì)激素抵抗［6］。ILC2s產(chǎn)生糖皮質(zhì)激素抵抗的生物學(xué)機制并不清楚，研究發(fā)現(xiàn)TSLP抑制地塞米松誘導(dǎo)的自然輔助細胞 (natural helper cell，NHC)即ILC2s凋亡，可能與TSLP對STAT5磷酸化的調(diào)控有關(guān)，使用TSLP的中和抗體和STAT5抑制劑阻斷TSLP/STAT5信號通路可以在一定程度上恢復(fù)糖皮質(zhì)激素敏感性［50］。此外，IL-2、IL-7、IL-9也可以誘導(dǎo)糖皮質(zhì)激素抵抗，而IL-27則與之相反［50］。Liu 等［51］研究發(fā)現(xiàn)，外周血中 ILC2s對糖皮質(zhì)激素敏感，而BALF中ILC2s對糖皮質(zhì)激素抵抗，可能與局部TSLP水平升高有關(guān)。地塞米松使得ILC2s的IL-7Rα表達上調(diào)，通過TSLP誘導(dǎo)甲基乙基酮 (methyl ethyl ketone，MEK)、c-Fos、ID3、pSTAT3、pSTAT5等糖皮質(zhì)激素抵抗相關(guān)分子產(chǎn)生，其中MEK和pSTAT5不能被地塞米松所抑制。ILC2s在個體之間或在不同環(huán)境對糖皮質(zhì)激素的反應(yīng)是否有所不同，及其作用機制仍值得探究。

4 總結(jié)

ILC2s是一種新型的固有淋巴細胞亞群，其發(fā)現(xiàn)為研究固有免疫和適應(yīng)性免疫之間的聯(lián)系開辟了新的路徑。近年來，對于ILC2s在哮喘發(fā)病過程中作用的研究取得了重大突破，但仍有大量的問題有待進一步探索研究，譬如固有免疫與適應(yīng)性免疫之間具體的相互作用及相對重要性、ILC2s介導(dǎo)難治性哮喘的作用機制、ILC2s與ILC3s在肥胖性哮喘中的主導(dǎo)地位以及病毒感染激活I(lǐng)LC2s觸發(fā)非過敏性哮喘的具體機制等。值得肯定的是，目前的研究顯示通過靶向調(diào)控ILC2s的途徑控制哮喘的炎癥具有廣闊的治療前景。