用血清藥理學(xué)方法研究中藥苦參的抗腫瘤作用

張宏梅，崔佰吉

（吉林醫(yī)藥學(xué)院，吉林 吉林 132013）

1 資料與方法

1.1 一般資料

實驗動物為20只SD大鼠（成都達碩實驗動物有限公司提供），體重220～250 g，雌雄各10只。實驗藥劑：噻唑藍、臺盼藍以及蛋白酶K，均由北京索萊寶科技有限公司提供。小牛血清（賽默飛世爾科技有限公司）。細(xì)胞株：SPC-A1人肺癌細(xì)胞，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所提供。檢測儀器：EUROStar II熒光顯微鏡（歐蒙醫(yī)學(xué)實驗診斷有限公司）、流式細(xì)胞儀（貝克曼庫爾特商貿(mào)有限公司）、PCR擴增儀和酶標(biāo)儀（賽默飛世爾科技有限公司）以及高效液相色譜（HPLC）等。水煎中藥苦參，煎劑濃度為3 mg/ml。

1.2 方法

選取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作為給藥組，灌服中藥苦參煎劑（150 ml/kg）。2次/d。另外選取10只SD大鼠（雄、雌各5只）作為對照組，灌服生理鹽水（150 ml/kg），2次/d。連續(xù)給藥3天后，行腹主動脈采血，分離血清，獲得含藥血清和空白血清。其中含藥血清需要接受有效成分和含量的鑒定，離心、取上清液，并進行等體積氯仿萃取，定容后進行高效液相色譜分析。在含藥血清，中苦參堿和氧化苦參堿的濃度相對較高

將SPC-A1人肺癌細(xì)胞（5×104/mL）的加入96孔板（每孔含培養(yǎng)液100 μL），在培養(yǎng)箱（37℃，5%CO2）中進行孵育。24 h后分為兩組，分別加入不同濃度的含藥血清和空包血清。在此基礎(chǔ)上，每孔加入生理鹽水，用以調(diào)整每孔細(xì)胞總體積。24 h后加入濃度為2 mg/mL的噻唑藍20 μL后，孵育4 h后去除上清液，使用酶標(biāo)儀進行處理，測定吸光值，每個濃度平行測定3孔，計算平均吸光值，進而得到中藥苦參對于SPC-A1人肺癌細(xì)胞的抑制率。

2 結(jié) 果

2.1 含藥血清對于腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用

給藥組，測得活細(xì)胞數(shù)為（491.44±28.62）×103/mL，生長抑制率為（42.41±11.25）%。對照組，測得活細(xì)胞數(shù)為（992.18±114.26）×103/mL，對比差異顯著（P＜0.05）。

2.2 不同濃度含藥血清對于腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用

對比2.5%、5%、10%、15%以及20%濃度的含藥血清對于腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用，見表1。

表1 不同濃度含藥血清對于腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用分析（±s）

表1 不同濃度含藥血清對于腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用分析（±s）

3含藥血清濃度（%） 活細(xì)胞數(shù)（×10/ml） 生長抑制率（%）2.5 904.24±76.52 10.14±2.52 5 681.62±62.18 16.87±3.04 10 517.72±44.82 39.95±5.85 15 449.23±35.51 53.39±4.74 20 419.62±25.56 62.29±5.43 P＜0.05

2.3 含藥血清和空白血清的腫瘤細(xì)胞周期分布分析（見表2）

表2 含藥血清和空白血清的腫瘤細(xì)胞周期分布分析結(jié)果對照（±s）

表2 含藥血清和空白血清的腫瘤細(xì)胞周期分布分析結(jié)果對照（±s）

組別 G0G1 S G2M給藥組 62.28±6.15 28.44±1.96 1.85±0.34對照組 46.24±3.55 39.64±2.97 15.69±1.42 P＜0.05

3 討 論

目前，中藥苦參提取物及其復(fù)方制劑在臨床疾病的治療中有著較為廣泛的應(yīng)用，且獲得了良好的療效，其應(yīng)用領(lǐng)域也在不斷拓展，并在抗腫瘤治療的研究中取得一定的進展。中藥苦參的抗腫瘤作用并不十分明確，可能存在著一定的風(fēng)險性，則需要通過含藥血清試驗研究來予以驗證和判斷。

綜上所述，中藥苦參有效成分在抗腫瘤治療方面具有很高的應(yīng)用價值，需要進一步開發(fā)和利用，這對于抗腫瘤治療的發(fā)展有著十分重要的意義。

[1]夏艷陽,李 艷.中藥苦參抗腫瘤作用研究進展[J].中醫(yī)藥臨床雜志,2014,26(01):91-92.

[2]邵明坤,范 青.苦參堿抗腫瘤作用研究的新進展[J].實用藥物與臨床,2014,17(06):756-759.