紫葉酢漿草鱗莖愈傷離體培養(yǎng)研究

戚華沙 符瑞侃 黃賽 呂德任 王景飛 潘梅

（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶園藝研究所 海南省特種經(jīng)濟(jì)植物種質(zhì)資源創(chuàng)新利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 海南海口 571100）

紫葉酢漿草鱗莖愈傷離體培養(yǎng)研究

戚華沙 符瑞侃 黃賽 呂德任 王景飛 潘梅

（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶園藝研究所 海南省特種經(jīng)濟(jì)植物種質(zhì)資源創(chuàng)新利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 海南海口 571100）

研究了紫葉酢漿草鱗莖的初始培養(yǎng)、增殖及生根壯苗的培養(yǎng)影響因子。結(jié)果表明：紫葉酢漿草鱗莖的初始培養(yǎng)基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L，有利于鱗莖誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率86%；MS＋6-BA4.00mg/L為紫葉酢漿草增殖的最佳培養(yǎng)基，增殖系數(shù)達(dá)4.50；MS＋NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L，適宜誘導(dǎo)生根獲得再生植株。

紫葉酢漿草；離體培養(yǎng)；增殖培養(yǎng)

紫葉酢漿草（Oxalis triangularis Subsg.Triang）是酢漿草科酢漿草屬多年生常綠草本，原產(chǎn)于熱帶亞洲[1]。紫葉酢漿草株高15～30cm，地下部分長(zhǎng)有小鱗莖，葉基生，掌狀復(fù)葉，每個(gè)復(fù)葉由3片小葉組成，小葉倒三角形或倒箭形，葉色常年為艷麗的紫紅色[2]，極具有觀賞價(jià)值。紫葉酢漿草適應(yīng)性廣，抗性強(qiáng)[3]，常規(guī)繁殖多采用分株法，繁殖系數(shù)低，無(wú)法滿足市場(chǎng)需求。本試驗(yàn)旨在通過(guò)對(duì)紫葉酶漿草鱗莖愈傷離體培養(yǎng)研究，探索出紫葉酢漿草的快速繁殖方法，為紫葉酢漿草規(guī)?；缣峁┮粭l有效途徑。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

采于海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶園藝研究所苗圃。

1.2 外植體消毒方法

選擇生長(zhǎng)良好的植株，切取地下鱗莖做為外植體，用自來(lái)水沖洗干凈，放置于洗潔精溶液中搖蕩3min，再用自來(lái)水沖洗干凈。瀝干水后，在超凈工作臺(tái)上，用無(wú)菌水沖洗2次，75%酒精處理15s，再用0.10%升汞浸泡15min，無(wú)菌水沖洗5次。切除外植體兩邊頂端，轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)不定芽生成。

1.3 初始培養(yǎng)基的篩選

以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加6-BA0.10mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L與NAA0.20mg/L、0.50mg/L組成6種不同配比處理，50d后統(tǒng)計(jì)不定芽誘導(dǎo)情況。

1.4 不同濃度無(wú)機(jī)鹽對(duì)不定芽增殖的影響

設(shè)置 1/5MS、2/5MS、3/5MS、4/5MS、MS，共 5 種處理的基本培養(yǎng)基，分別添加6-BA2.0mg/L，30d后統(tǒng)計(jì)不定芽增殖情況。

1.5 不同濃度6-BA對(duì)芽增殖的影響

以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，設(shè)置6-BA1.00mg/L、2.00mg/L、3.00mg/L、4.00mg/L4種濃度梯度，30d后統(tǒng)計(jì)不定芽增殖情況。

1.6 生根培養(yǎng)基的篩選

以MS為基本培養(yǎng)基，添加NAA0.50mg/L、1.50mg/L、2.50mg/L、3.50mg/L與IBA0.20mg/L、0.50mg/L組成8種不同配比處理，30d后統(tǒng)計(jì)生根情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 初始培養(yǎng)基的篩選

由表1可知，6-BA和NAA不同濃度配比對(duì)紫葉酢漿草鱗莖誘導(dǎo)影響差異較大。6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L處理和6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L處理的芽誘導(dǎo)率與其它處理的差異達(dá)到顯著性水平，分別為86.00%和80.00%；6-BA1.00mg/L+NAA0.50mg/L處理的芽誘導(dǎo)率最低，為35.20%。6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L處理和6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L處理的芽數(shù)顯著優(yōu)于其它4個(gè)處理，其它4個(gè)處理間的芽數(shù)差異不顯著。從紫葉酢漿草鱗莖誘導(dǎo)的情況來(lái)看，6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L處理鱗莖芽誘導(dǎo)萌芽生長(zhǎng)較快，38d見(jiàn)有萌動(dòng)，至42d見(jiàn)芽有抽長(zhǎng)，50d誘導(dǎo)芽長(zhǎng)勢(shì)良好。因此，紫葉酢漿草適宜初始培養(yǎng)基為6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L。

2.2 不同濃度無(wú)機(jī)鹽對(duì)不定芽增殖的影響

由表2可知，不同濃度無(wú)機(jī)鹽對(duì)紫葉酢漿草不定芽增殖系數(shù)的影響效果不同。3/5MS、4/5MS和MS3種處理的增殖系數(shù)差異不顯著，增殖系數(shù)介于 3.55～4.20；1/5MS 處理與 2/5MS、3/5MS、4/5MS和MS4種處理的差異達(dá)到顯著性水平。從不定芽生長(zhǎng)的情況來(lái)看，MS的增殖效果最好，增殖系數(shù)達(dá)4.20，不定芽壯且顏色艷，高度均勻；其次4/5MS，增殖系數(shù)達(dá)4.00，不定芽壯，葉片厚；1/5MS、2/5MS及3/5MS處理效果較差，增殖系數(shù)為2.20～3.55之間，莖細(xì)，顏色淡，基部有愈傷組織生長(zhǎng)。因此，紫葉酢漿草不定芽增殖適宜的無(wú)機(jī)鹽濃度為MS。

表2 不同濃度無(wú)機(jī)鹽對(duì)不定芽增殖的影響

2.3 不同濃度6-BA對(duì)不定芽增殖的影響

由表3可知，不同濃度6-BA對(duì)紫葉酢漿草不定芽增殖的影響呈正相關(guān)性。6-BA1.00～4.00mg/L范圍內(nèi)，隨著6-BA濃度的增加，紫葉酢漿草不定芽增殖系數(shù)逐漸增加，且顏色逐漸加艷，長(zhǎng)勢(shì)漸好，可見(jiàn)在一定范圍內(nèi)，高濃度6-BA對(duì)紫葉酢漿草不定芽增殖有明顯的促進(jìn)作用。方差分析的結(jié)果表明，6-BA3.00mg/L和6-BA4.00mg/L顯著優(yōu)于 6-BA1.00mg/L和 6-BA2.00mg/L，6-BA3.00mg/L和6-BA4.00mg/L處理間增殖系數(shù)差異不顯著；不定芽在6-BA4.00mg/L保存50d后出現(xiàn)葉片變黃，不定芽在6-BA3.00mg/L保存45d后見(jiàn)有葉片變黃，不定芽在6-BA4.00mg/L保存時(shí)間比6-BA3.00mg/L長(zhǎng)。綜合考慮分析，合適紫葉酢漿草不定芽增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA4.00mg/L。

2.4 生根培養(yǎng)基的篩選

由表4可知，不同濃度激素配比對(duì)紫葉酢漿草的生根效果不同 。 NAA2.50mg/L+IBA0.20mg/L、NAA3.50mg/L+IBA0.20mg/L、NAA2.50mg/L+IBA0.50mg/L、NAA3.50mg/L+IBA0.50mg/L 處理間的生根率差異不顯著，均為100%。從根數(shù)來(lái)看，NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L處理得到的根數(shù)最多，達(dá)8.50條/株，NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L 處 理 與 NAA2.50+IBA0.20、NAA3.50+IBA0.20、NAA2.50+IBA0.50、NAA3.50+IBA0.50處理根數(shù)間差異不顯著。從最長(zhǎng)根長(zhǎng)來(lái)看，8個(gè)處理的最長(zhǎng)根長(zhǎng)介于4.50～8.50cm，其中NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L處理的最長(zhǎng)根最長(zhǎng)，達(dá)8.50cm，與其它7個(gè)處理的最長(zhǎng)根長(zhǎng)的差異達(dá)到顯著性水平。從株高來(lái)看，各處理株高在2.80cm以上，其中NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L處理的株高最高，為7.50cm；綜合比較分析認(rèn)為，適合紫葉酢漿草根系發(fā)育的培養(yǎng)基為NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L。

表3 不同濃度6-BA對(duì)不定芽增殖的影響

表4 NAA和IBA不同濃度配比對(duì)生根的影響

3 結(jié)論

本試驗(yàn)對(duì)紫葉酢漿草地下鱗莖進(jìn)行了初始培養(yǎng)、增殖及生根研究，找到了適宜的試驗(yàn)方法。試驗(yàn)結(jié)果表明，紫葉酢漿草鱗莖的初始培養(yǎng)基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L，有利于鱗莖誘導(dǎo)，誘導(dǎo)率可達(dá)86%；增殖培養(yǎng)以MS＋6-BA4.00mg/L為宜，增殖系數(shù)達(dá)4.50；生根培養(yǎng)基為MS＋NAA2.50mg/L+IBA0.5mg/L，適宜誘導(dǎo)生根獲得再生植株。

[1]龍金花.彩蝶紛飛的三角紫葉酢漿草[J].植物雜志，2000（2）：10～11.

[2]王旭昭.紫葉酢漿草栽培技術(shù)與推廣應(yīng)用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（36）：11905，11922．

[3]李海燕.紫葉酢漿草的園林應(yīng)用及培育技術(shù)[J].北方園藝，2007（2）：13.

S682.19

A

1005-7897（2017）24-0008-02

2017-10-15

戚華沙，助理研究員，主要從事觀賞植物組織培養(yǎng)研究工作。

潘梅，高級(jí)園藝師，主要從事熱帶植物組織培養(yǎng)研究工作。