楊紅霞 , 張 楊 , 劉世芳 , 謝小婉 , 吾力江 , 張夢圓 , 宋晶晶 , 巴音查汗
(新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) , 新疆 烏魯木齊 830052)
馬泰勒蟲(Theileiaequi,舊稱馬巴貝斯蟲)和馬駑巴貝斯蟲(Babesiacaballi)是寄生于馬屬動物紅細(xì)胞內(nèi),是馬梨形蟲病的主要病原。據(jù)報道馬泰勒蟲病比駑巴貝斯蟲病有更強(qiáng)的致病性和傳播能力[1]。馬泰勒蟲(Theileriaequi)隸屬于泰勒科(TheileriidaeLevine)泰勒屬(Theileria),是寄生于馬屬動物紅細(xì)胞體內(nèi),臨床以稽留熱、貧血、黃疸等為主要癥狀的蜱傳性血液原蟲病。該病被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)納入動物疫病名錄,我國因此也將其列為二類動物法定報告疫病。該病在世界各地呈廣泛分布,西班牙、迪拜、瑞士、美國、蒙古等地[2-6]均有報道;而在我國多發(fā)生于西北、內(nèi)蒙古西部地區(qū)及南方各地[7]。2016年5月,昭蘇某馬場出現(xiàn)待產(chǎn)母馬發(fā)病,由于待產(chǎn)期,并未進(jìn)行特效藥物治療,僅為對癥治療;3日后該馬流產(chǎn),對死駒(臍帶血)及母馬進(jìn)行馬泰勒蟲病診斷,母馬患病而死駒未患?。粚α鳟a(chǎn)馬匹強(qiáng)心補(bǔ)液,但流產(chǎn)導(dǎo)致該馬抵抗力嚴(yán)重下降,于2 d后死亡。
伊犁馬,13歲,中等膘情,待產(chǎn),2016年5月在新疆昭蘇發(fā)病,出現(xiàn)呼吸急促、大口喘氣、咳嗽、流涕等癥狀,體溫41.6 ℃;3 d后凌晨出現(xiàn)早產(chǎn),死胎,胎衣不下;2 d后死亡。
2.1 臨床癥狀 待產(chǎn)母馬,食欲下降,呼吸和脈搏加速,黏膜充血,精神不振,咳嗽、流涕,體溫41.6 ℃;3 d后凌晨流產(chǎn)、死胎,經(jīng)助產(chǎn)后出現(xiàn)胎衣不下等癥狀,使用縮宮素、右旋糖酐鐵及10%葡萄糖、柴胡等對癥治療,當(dāng)日胎衣脫下,但較為虛弱,步履困難;治療2 d后,站立不穩(wěn),臥地不起,呼吸加快,數(shù)小時后死亡。
2.2 PCR檢測 對死胎進(jìn)行臍帶血采集,生產(chǎn)母馬采集頸靜脈血,進(jìn)行馬泰勒蟲病檢測。
PCR參照羅金等[8]擴(kuò)增18S RNA基因的目的區(qū)段(上游引物:5′- TTTGGGCTGTTTACAGTTGC-3′;下游引物:5′- CTCAAAGTAAACGTCGAGTCATG-3′);由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。
PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系(50 μL):2×EcoTaqPCR 25 μL,10 μmol/L 上下游引物各1 μL,模板DNA 3 μL,滅菌水20 μL。
雞大腸桿菌病是危害養(yǎng)雞業(yè)主要的細(xì)菌病之一,該菌血清型眾多,易產(chǎn)生耐藥性,該菌可以通過消化道、呼吸道等多種途徑進(jìn)行傳播。沙門菌不僅通過水平傳播,也可以通過垂直傳播,種雞成為沙門菌的宿主,成年雞感染后可以長期帶毒和排毒,導(dǎo)致沙門菌病廣泛流行。雞大腸桿菌病和沙門菌病同為條件性疾病,當(dāng)機(jī)體防衛(wèi)機(jī)能下降、飼養(yǎng)管理不善、環(huán)境條件變化和應(yīng)激因素影響等,都能促使疾病的發(fā)生與流行。雞大腸桿菌病和沙門菌病的防治主要通過抗生素,但隨著抗生素的廣泛與不適當(dāng)?shù)貞?yīng)用,使耐藥譜不斷擴(kuò)大,多重耐藥菌株的增加,聯(lián)合用藥的效果勢必越來越差,嚴(yán)重影響了臨床治療效果。耐藥性也可通過多種途徑造成交叉?zhèn)鞑?,直接威脅人類的健康。許多研究證明了雞群對這兩種菌的混合感染存在很強(qiáng)的耐藥性。本試驗藥敏結(jié)果顯示,分離菌株QHE-1和QHS-1僅對對阿米卡星、頭孢克肟、頭孢曲松3種藥物敏感;對其他的藥物存在不同程度的耐藥性,與于學(xué)會[12]等報道了蛋雞沙門菌和大腸桿菌混合感染的對多種抗生素存在很強(qiáng)的耐藥性一致。因此,發(fā)生該病時,應(yīng)該進(jìn)行了藥敏試驗,選擇敏感的藥物,采取交叉用藥、輪換用藥防止產(chǎn)生耐藥性,充分發(fā)揮抗菌藥物之間的協(xié)同作用,增加療效,才能有效預(yù)防疾病的發(fā)生。
略)
PCR反應(yīng)參數(shù):95 ℃預(yù)變性 5 min;30個循環(huán)(94 ℃ 45 s,56 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s);72 ℃延伸5 min,4 ℃保存。擴(kuò)增結(jié)束后取5 μL PCR產(chǎn)物進(jìn)行1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢查。
對死亡馬匹進(jìn)行剖檢:體型消瘦、貧血和全身大面積黃染;心臟擴(kuò)大;肝小葉中央呈黃色;脾及淋巴結(jié)腫大;胃黏膜和腸黏膜嚴(yán)重黃染;左腎黃染,有腦積液現(xiàn)象。
用PCR方法擴(kuò)增馬泰勒蟲病18S RNA基因片段,在約500 bp處出現(xiàn)目的條帶,與預(yù)期片段(531 bp)大小相一致,診斷為馬泰勒蟲病(見圖1)。
圖1 馬泰勒蟲病18S RNA基因序列擴(kuò)增結(jié)果
馬泰勒蟲病是由中間宿主硬蜱傳播并寄生于紅細(xì)胞的一種原蟲病,該病廣泛分布于世界各地[9]。近年來,馬泰勒蟲病的感染率逐年上升,死亡率也隨之增加,嚴(yán)重影響畜牧業(yè)發(fā)展及畜產(chǎn)品生產(chǎn)。新疆昭蘇位于高原腹地,屬高山半濕潤性草原氣候,植被豐富,為馬泰勒蟲病的傳播媒介-革蜱屬的孳生提供了有利條件。當(dāng)?shù)伛R匹飼養(yǎng)方式主要為草場散養(yǎng),且每年有來自不同地區(qū)的馬匹在此進(jìn)行配種,從而增加了該病的廣泛流行。
據(jù)報道,孕馬感染此病可引發(fā)流產(chǎn)或早產(chǎn),嚴(yán)重時伴發(fā)子宮大出血而死[10]。該病例為待產(chǎn)母馬發(fā)病,由于感染馬泰勒蟲病導(dǎo)致身體虛弱,在即將分娩季節(jié)出現(xiàn)呼吸急促、大口喘氣、咳嗽、流涕等癥狀,體溫41.6 ℃,由于為孕馬,并未進(jìn)行馬泰勒蟲病特效藥物治療,僅為雙黃連等中成藥對癥治療;但3日后仍舊出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象,流產(chǎn)后馬匹明顯出現(xiàn)虛弱癥狀,站立不穩(wěn)。由于流產(chǎn)導(dǎo)致身體抵抗力嚴(yán)重下降,于兩日后死亡。對于母馬與死亡幼駒進(jìn)行馬泰勒蟲病18S RNA 基因片段擴(kuò)增,母馬感染馬泰勒蟲病,而幼駒并未感染該病。該例報道是否可以推斷馬泰勒蟲病不垂直傳播,在今后的研究中,需要更多病例進(jìn)行驗證。
馬泰勒蟲病尚無特效疫苗可用,主要以預(yù)防為主。在蜱的活躍季節(jié),采用人工滅蜱和藥物滅蜱相結(jié)合的方法,經(jīng)常檢查畜體體表,隨時摘除畜體上的蜱,并將其焚燒,定期對畜體和圈舍徹底噴灑消毒1次。在疫區(qū),出現(xiàn)病例后,為了防止其他馬匹發(fā)病,可采取藥物進(jìn)行治療,多選用三氮脒(貝尼爾、血蟲凈)、鹽酸吖啶黃(黃色素、錐黃素)、咪唑苯脲等[11-13]進(jìn)行治療。在沒有疫情但有蜱類活動的地區(qū),對外來馬匹要嚴(yán)格進(jìn)行檢疫,防止帶蟲馬進(jìn)入。做好馬廄衛(wèi)生消毒工作,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,改善飼草單一的狀況,增強(qiáng)馬匹對疫病的抵御力。
參考文獻(xiàn):
[1] De Waal D T. Equine piroplasmosis: a review[J]. British VeterinaryJournal, 1992, 148: 6-14.
[2] Camacho A T,Guitian F J,Pallas E,etal.Theileria (Babesia) equi and Babesia caballi Infections in Horses in Galicia,Spain[J].Tropical Animal Health and Production,2005,37:293-302.
[3] Jaffer O,Abdishakur F,Hakimuddin F,etal.A comparative study of serological tests and PCR forthe diagnosis of equine piroplasmosis[J].Parasitol Res,2010,106(3):706-709.
[4] Sigg L,Gerber V,Gottstein B,etal.Seroprevalence of Babesia caballi and Theileria equi in the Swisshorse population[J].Parasitology International,2010,59:313-317.
[5] Qablan M A,Sloboda M,Jirku M.Quest for the piroplasms in camels:Identification of Theileria equi and Babesia caballi in Jordanian dromedaries by PCR[J].Veterinary Parasitology,2012,186:456-460.
[6] Battsetseg B,Xuan X,Ikadai H,etal.Detection of Babesia caballi and Babesia equi in Dermacentor nuttalli adult ticks[J].International Journal for Parasitology,2001,31:384-386.
[7] 孔繁瑤. 家畜寄生蟲學(xué)[M]. 2版.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2010: 330-331.
[8] 羅金,劉光遠(yuǎn),謝俊仁,等. 馬泰勒蟲病PCR檢測方法的建立和應(yīng)用[J]. 中國畜牧獸醫(yī),2012,39(02):28-31.
[9] 張守發(fā),賈立軍,鞠玉琳. 馬泰勒蟲不同PCR檢測方法的比較[J]. 中國獸醫(yī)科學(xué),2007,37(12):1 046-1 049.
[10] 李佳.馬泰勒蟲熒光定量PCR檢測方法的建立及伊犁馬泰勒蟲病的分子流行病學(xué)調(diào)查[D].烏魯木齊:新疆農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.
[11] 姜新基, 六十, 布仁巴依爾, 等. 馬焦蟲病的臨床癥狀及防治措施[J]. 中國畜禽種業(yè), 2014, 10(10): 82-83.
[12] 孫曉華. 牛、馬巴貝斯蟲病的診斷與防治[J]. 養(yǎng)殖技術(shù)顧問, 2014, 02: 176.
[13] 閆常平, 薛克云, 安海軍. 馬巴貝斯蟲病的暴發(fā)與診治[J]. 中國獸醫(yī)雜志, 2003, 39(09): 52-53.