復(fù)方柴芪散對斷奶獺兔生長性能、血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響

劉 寧，李 銳，符華林*，劉漢中*，汪 平，文 斌

(1.四川省草原科學(xué)研究院，成都 611731；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院獸藥創(chuàng)新制劑工程技術(shù)研究中心，成都 611130)

復(fù)方柴芪散對斷奶獺兔生長性能、血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響

劉 寧1，李 銳2，符華林2*，劉漢中1*，汪 平1，文 斌1

(1.四川省草原科學(xué)研究院，成都 611731；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院獸藥創(chuàng)新制劑工程技術(shù)研究中心，成都 611130)

【目的】研究復(fù)方柴芪散對斷奶獺兔的保健及促生長效果。【方法】選取36只1 000g左右的55日齡獺兔幼兔，分2組分別飼喂基礎(chǔ)日糧、含1％復(fù)方柴芪散的基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)期30d。觀察復(fù)方柴芪散對獺兔腹瀉率、生長性能、血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響?！窘Y(jié)果】試驗(yàn)組腹瀉率顯著低于對照組(P<0.05)，16～30d試驗(yàn)組ADG顯著高于對照組(P<0.05)，且F/G顯著低于對照組(P<0.05)；試驗(yàn)第15天試驗(yàn)組血清GLU、脾臟指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)；試驗(yàn)第30天試驗(yàn)組血清TP及ALB顯著高于對照組(P<0.05)，血液淋巴細(xì)胞數(shù)顯著高于對照組(P=0.05)?！窘Y(jié)論】基礎(chǔ)日糧添加1％復(fù)方柴芪散能降低斷奶獺兔腹瀉率，提高其生長性能，保護(hù)肝臟并提高機(jī)體免疫能力。

斷奶獺兔；中藥添加劑；生長性能；血清生化指標(biāo)；免疫功能

獺兔在斷奶至90日齡期間由于免疫低下，消化系統(tǒng)發(fā)育不完善，病原入侵及飼料刺激等原因很容易導(dǎo)致其發(fā)生斷奶應(yīng)激，一般表現(xiàn)為精神萎靡、腹瀉甚至引起死亡，給獺兔養(yǎng)殖業(yè)帶來嚴(yán)重危害。目前，生產(chǎn)上主要使用抗生素防治幼兔腹瀉疾病，但長期使用抗生素會帶來細(xì)菌耐藥性增加，獸藥殘留等問題[1]。而中藥添加劑是一種綠色添加劑，具有促生長，提高機(jī)體免疫力等作用，可減少或取代抗生素在飼料中的應(yīng)用，降低了抗生素危害，在家兔疾病防治發(fā)揮了重要作用[2]。近年，關(guān)于中藥飼料添加劑用于家兔保健和疾病防治方面已有大量報道，張秋華等研究表明，朝鮮白頭翁、白頭翁均具有抑菌、抗炎、抗腹瀉作用，并對兔離體腸管運(yùn)動有不同程度抑制作用[3]；劉榮欣[4]、趙泮峰[5]等試驗(yàn)結(jié)果顯示，在日糧中添加中藥復(fù)方能提高仔兔生長性能、降低腹瀉率和死亡率。

獺兔斷奶應(yīng)激，按中獸醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，應(yīng)與肝氣郁滯有關(guān)。肝屬木，肝郁則疏泄不通從而氣機(jī)失調(diào)，則情志抑郁，肝郁乘脾則影響脾胃升降納化，從而引起獺兔腹瀉及死亡，因此可以通過健脾疏肝來治療和預(yù)防獺兔斷奶應(yīng)激。為此筆者以疏肝解郁、健脾理氣為治療原則，以柴胡、黃芪為主藥，輔以黨參、白術(shù)、茯苓等補(bǔ)益藥組成復(fù)方柴芪散，并研究其對獺兔腹瀉率、死亡率、生長性能、血液生化指標(biāo)的影響，為復(fù)方柴芪散用于防治獺兔斷奶應(yīng)激提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)方柴芪散由柴胡、黃芪、黨參、白術(shù)、茯苓、炙甘草、升麻、龍骨、牡蠣、菊花等按一定比例混合而成，經(jīng)65℃烘干后粉碎，過40目篩備用。以上各味中藥購自溫江福壽堂藥房，經(jīng)四川農(nóng)業(yè)大學(xué)范巧佳副教授鑒定為正品。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

55日齡川白獺兔36只，健康，體重1000g左右，由四川省草原科學(xué)研究院提供。

1.3 試驗(yàn)日糧及飼養(yǎng)管理

獺兔的基礎(chǔ)日糧參考NRC(1977)兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制[6](見表1)。給藥組日糧在基礎(chǔ)日糧中添加1％復(fù)方柴芪散。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet(air-dry basis％)

試驗(yàn)幼兔養(yǎng)于封閉式兔舍，單籠飼養(yǎng)，采光通風(fēng)良好。試驗(yàn)期間人工喂養(yǎng)，適當(dāng)限制飼喂，日喂料2次(每日 7∶00、19∶00各投料一次)，以鴨嘴式飲水器自由飲水。試驗(yàn)前對兔舍、兔籠、料槽和水槽進(jìn)行清洗、消毒，試驗(yàn)開始后，兔舍每天清掃1次，每隔5d消毒兔舍一次，保持清潔的衛(wèi)生條件。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

36只獺兔隨機(jī)分為2組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)6只獺兔，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，各重復(fù)初體重差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ組飼喂空白基礎(chǔ)日糧，Ⅱ組飼喂含1％復(fù)方柴芪散的基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)期為30d，試驗(yàn)期間每天觀察幼兔采食和健康狀況，記錄每日飼料消耗及疾病情況。

1.5 測定指標(biāo)

1.5.1 腹瀉頻率與死亡率

試驗(yàn)期內(nèi)每天定時觀察并記錄各組腹瀉獺兔數(shù)、腹瀉天數(shù)及死亡情況，并計(jì)算腹瀉頻率及死亡率。腹瀉頻率=腹瀉總次數(shù)/(試驗(yàn)兔數(shù)×試驗(yàn)天數(shù))×100％[7]。

1.5.2 生長性能指標(biāo)

在試驗(yàn)開始、試驗(yàn)第15天及試驗(yàn)結(jié)束時，清晨進(jìn)行空腹稱重，并統(tǒng)計(jì)全期喂料量，計(jì)算0～15d及16～30d平均日采食量(ADFI)，平均日增重(ADG)，料重比(F/G)。

1.5.3 血清生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)及臟器指數(shù)的測定

在試驗(yàn)第15天、試驗(yàn)結(jié)束后禁食12h，在各組每個重復(fù)中選取2只接近平均體重的獺兔，心臟采血5mL左右，平均分裝于3支采血管中(其中一支含抗凝劑)?？鼓糜诎准?xì)胞(WBC)、單核細(xì)胞數(shù)(MONO)、單核細(xì)胞比率(MONO％)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)(EO)、嗜酸性粒細(xì)胞比率(EO％)、淋巴細(xì)胞數(shù)(LYMPH)、淋巴細(xì)胞比率(LYMPH％)的檢測。其余血樣用于葡萄糖(GLU)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、尿素氮(UN)血液生化指標(biāo)，免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)以及生長激素(GH)的檢測。

1.6 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件處理，選擇獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)進(jìn)行差異性分析，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方柴芪散對斷奶獺兔腹瀉率、死亡率及生長性能的影響

試驗(yàn)結(jié)束后試驗(yàn)組獺兔腹瀉頻率顯著低于對照組(P<0.05)，死亡率比對照組低，但組間差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見表2)。

表2 復(fù)方柴芪散對獺兔腹瀉率與死亡率的影響Table 2 Effects of Compound Chaiqi San on diarrhea rate and mortality rate of Rex rabbits /％

復(fù)方柴芪散對斷奶獺兔生長性能的影響見表3。在0～15d試驗(yàn)組ADFI、ADG及F/G與對照組差異不顯著(P>0.05)；16～30d試驗(yàn)組與對照組 ADFI無差異性(P>0.05)，但試驗(yàn)組ADG顯著高于對照組(P<0.05)，而試驗(yàn)組F/G顯著低于對照組(P<0.05)。

表3 復(fù)方柴芪散對獺兔生長性能的影響Table 3 Effects of Compound Chaiqi San on growth performance of Rex rabbits

2.2 復(fù)方柴芪散對獺兔血清生化指標(biāo)的影響

由表4可知，第15天試驗(yàn)組血清GLU顯著高于對照組(P<0.05)，其余指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)第30天試驗(yàn)組血清TP、GLO及ALB顯著高于對照組(P<0.05)，其余指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

2.3 復(fù)方柴芪散對獺兔免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，試驗(yàn)第15天試驗(yàn)組脾臟指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)，其余指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)第30天試驗(yàn)組血液淋巴細(xì)胞數(shù)顯著高于對照組(P=0.05)，血清IgG顯著高于對照組(P<0.05)，其余指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。

表4 復(fù)方柴芪散對獺兔血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of Compound Chaiqi San on serum biochemical indices of Rex rabbits

表5 復(fù)方柴芪散對獺兔免疫指標(biāo)的影響Table 5 Effects of Compound Chaiqi San on immune indexes of Rex rabbits

3 討論

3.1 復(fù)方柴芪散對獺兔腹瀉率與死亡率的影響

本研究以疏肝解郁、健脾理氣為原則組成復(fù)方柴芪散。方劑中柴胡疏肝解郁，黃芪益氣固表，黨參補(bǔ)中益氣、健脾益胃，白術(shù)健脾益胃以助運(yùn)化，茯苓滲濕健脾，炙甘草補(bǔ)氣和中，調(diào)和諸藥。通過復(fù)方對幼獺兔發(fā)病情況的影響顯示，復(fù)方柴芪散能降低試驗(yàn)組腹瀉頻率和死亡率分別達(dá)9.26％和5.55％，但只有腹瀉頻率兩組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。腹瀉頻率是指所有獺兔中出現(xiàn)腹瀉的總天數(shù)除以所有獺兔存活的總天數(shù)，故試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)死亡率大于腹瀉頻率情況。這說明了復(fù)方柴芪散能有效改善幼獺兔因斷奶應(yīng)激等導(dǎo)致肝氣郁滯型腹瀉癥狀。

3.2 復(fù)方柴芪散對獺兔生長性能的影響

一般斷奶應(yīng)激的獺兔采食會急劇減少，因此ADFI可作為獺兔斷奶應(yīng)激的指標(biāo)之一。在整個實(shí)驗(yàn)周期(1～30d)，盡管復(fù)方柴芪散對獺兔ADFI無明顯影響，但在實(shí)驗(yàn)后期，試驗(yàn)組ADFI比對照組略低，這可能是由于中藥的苦味或特殊氣味，影響了動物適口性。在實(shí)驗(yàn)后期(16～30d)，試驗(yàn)組ADG顯著高于對照組，F(xiàn)/G顯著低于對照組，這說明了隨復(fù)方柴芪散使用時間延長，其對獺兔促生長和提高飼料轉(zhuǎn)化率效果逐漸顯現(xiàn)。本次觀察的復(fù)方柴芪散促獺兔促生長作用，與吳占福等[8]報道認(rèn)為中藥配方能提高塞北幼兔日增重，以及劉怡菲等[9]研究“健兔散”能提高獺兔日增重，降低料重比結(jié)果相一致，說明了在兔飼料中添加中藥復(fù)方能改善兔生長性能，降低獺兔斷奶應(yīng)激。

3.3 復(fù)方柴芪散對獺兔血清生化指標(biāo)的影響

血清總蛋白(TP)與尿素氮(BUN)的水平可反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平，當(dāng)TP含量升高或BUN含量降低，機(jī)體可能處于正氮平衡狀態(tài)，此時日糧中蛋白質(zhì)吸收和利用率較高，利于動物生長；反之機(jī)體可能處于負(fù)氮平衡，不利于動物生長?？偟鞍装ò椎鞍?ALB)、球蛋白(GLO)。ALB可反映機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)能力，GLO具有免疫作用，其水平可反應(yīng)機(jī)體免疫力高低[10]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，第15天復(fù)方柴芪散組血清TP高于對照組，第30天復(fù)方柴芪散組血清TP、ALB、GLO均顯著高于對照組(P<0.05)，而第15天、第30天復(fù)方柴芪散組血清BUN均低于對照組。

血清葡萄糖(GLU)是體內(nèi)各組織細(xì)胞的主要能量來源，當(dāng)其在生理范圍內(nèi)升高時，機(jī)體自身免疫力及抗應(yīng)激能力增強(qiáng)，同時也能反映動物對飼料中碳水化合物的利用率提高。血清膽固醇(TC)主要由肝臟合成，其中一部分可作為組織細(xì)胞的結(jié)構(gòu)成分[11]，另一部分則可轉(zhuǎn)化為維生素D3，調(diào)節(jié)鈣磷代謝，促進(jìn)腸內(nèi)鈣磷吸收和骨質(zhì)鈣化，維持血鈣和血磷的平衡[12]。同時血清膽固醇(TC)及甘油三酯(TG)含量可以反映機(jī)體脂類代謝，但當(dāng)其含量過高則可引起心血管疾病。第15天復(fù)方柴芪散組血清GLU顯著高于對照組(P<0.05)，第30天高于對照組，說明復(fù)方柴芪散能提高斷奶獺兔的抗應(yīng)激能力；第15天和第30天各組血清TC、TG含量也高于對照組。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)是反映肝臟功能重要指標(biāo)，當(dāng)肝細(xì)胞膜受損或細(xì)胞壞死導(dǎo)致其釋放至血清從而增加血清ALT、AST含量，因此血清ALT、AST活性可一定程度反應(yīng)肝細(xì)胞受損情況[13]。第15天和第30天各組血清ALT、AST差異均不顯著，但第15天復(fù)方柴芪散組血清ALT低于對照組，第30天復(fù)方柴芪散組ALT、AST均低于對照組。

生長激素(GH)可通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)在肌肉和脂肪分配，增加蛋白質(zhì)合成，減少脂肪沉積，促進(jìn)機(jī)體生長并起到改良胴體品質(zhì)作用[14]。第15天和第30天各組血清GH含量差異不顯著(P>0.05)，但第30天復(fù)方柴芪散組血清GH含量明顯高于對照組。

以上結(jié)果說明，復(fù)方柴芪散可以促進(jìn)斷奶獺兔對飼料蛋白質(zhì)、碳水化合物及脂類營養(yǎng)物質(zhì)吸收及利用，促生長，改善肝功能和增強(qiáng)抗應(yīng)激能力。

3.4 復(fù)方柴芪散對獺兔免疫指標(biāo)的影響

白細(xì)胞是一類具有免疫能力的血細(xì)胞的總稱，其中嗜酸性粒細(xì)胞參與機(jī)體過敏及寄生蟲感染的反應(yīng)，單核細(xì)胞產(chǎn)生抗體，淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子能破壞細(xì)菌結(jié)構(gòu)[15]。胸腺和脾臟則是機(jī)體重要的免疫器官，其臟器指數(shù)可在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱。

本試驗(yàn)中第15天及第30天血液淋巴細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞比率、單核細(xì)胞數(shù)、單核細(xì)胞比率、血清IgG含量、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)均高于對照組，且第15天復(fù)方柴芪散組脾臟指數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)，第30天復(fù)方柴芪散組血液淋巴細(xì)胞數(shù)顯著高于對照組(P=0.05)，血清IgG水平也顯著高于對照組(P<0.05)，以上結(jié)果說明了復(fù)方柴芪散能有效提高幼獺兔的免疫能力。本次研究結(jié)果與國內(nèi)其他研究認(rèn)為中藥能調(diào)節(jié)動物的免疫功能結(jié)果一致，如王自然[16]試驗(yàn)結(jié)果顯示，四君子湯或加味四君子湯能顯著提高肉雞血液淋巴細(xì)胞數(shù)和比率；王珺等[17]認(rèn)為，不同劑量四君子湯對脾虛小鼠臟器指數(shù)有明顯的恢復(fù)作用。

4 結(jié)論

基礎(chǔ)日糧添加復(fù)方柴芪散可以降低斷奶獺兔的腹瀉率，促進(jìn)機(jī)體對蛋白質(zhì)、脂肪和能量的利用，提高其抗病能力和生長性能，保護(hù)肝臟并提高機(jī)體免疫能力。

[1] 趙泮峰，任戰(zhàn)軍，朱江江，等.復(fù)方中藥對斷奶獺兔盲腸內(nèi)環(huán)境及脾臟IFN-γ、IL-10 mRNA表達(dá)的影響[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2012(8)：21-27.

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Effects of Compound Chaiqi San on Weaned Rex Rabbits'Growth Performance，Serum Biochemical Indices and Immune Indexes

LIU Ning1，LI Rui2，F(xiàn)U Hua-Lin2*，LIU Han-zhong1*，WANG Ping1，WEN Bin1
(1.Sichuan Academy of Grassland Science，Chengdu 611731，China；2.College of Veterinary Medicine，Innovative Veterinary Pharmaceutical Preparations Engineering Technology Research Center，Sichuan Agricultural University，Chengdu 611130，China)

【Objective】This experiment was conducted to study the effects of Compound Chaiqi San on weaned Rex rabbits'health and growth promoting.【Methods】36 weaned Rex rabbits of 55 days age around 1000g were randomly divided into 2 groups(3 repeats per group，each repeat contains 6 rabbits)，fed with basal diet，basal diet containing 1％of Compound Chaiqi San，respectively.Then，we observed the effect of Compound Chaiqi San on weaned Rex rabbits'growth performance，diarrhea rate，serum biochemical indices and immune indexes during 55 to 90 days age.【Results】The diarrhea rate of test group was significantly higher than that of the control group(P<0.05).During the experiment period from 16 to 30d，the ADG of test group was significantly higher than that of the control group(P<0.05)，and the F/G of test group was significantly lower than that of the control group(P<0.05)；In the 15th day of the experiment，serum GLU and spleen index of test group were significantly higher than that of the control group P<0.05)；In the last day of the experiment，serum TP and ALB of test group were significantly higher than those of the control group(P<0.05)，and the number of blood lymphocytes in test group was significantly higher than that of the control group(P=0.05).【Conclusion】The basal diet supplemented with 1％Compound Chaiqi San could reduce the diarrhea rate of weaned Rex rabbits，improve their growth performance and immune capacity，and protect their liver function.

weaning Rex rabbits；traditional Chinese medicine additive；growth performance；serum biochemical indicators；immune function

S853.72

A

1000-2650(2017)01-0088-05

10.16036/j.issn.1000-2650.2017.01.013

2016-07-26

國家兔產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系——獺兔育種項(xiàng)目(農(nóng)業(yè)部CARS-44-A-4)；四川省“十三五”兔育種攻關(guān)項(xiàng)目；2016年四川省科技廳基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目。

劉寧，助理研究員，碩士，主要從事獺兔疾病防控研究；李銳，碩士研究生，主要從事獸藥新劑型與新技術(shù)的研究，Email：18728153753@163.com；二者為共同第一作者，對本文貢獻(xiàn)相同。*責(zé)任作者：符華林，教授，博士，主要從事藥物新劑型與新技術(shù)在獸藥中的應(yīng)用研究，Email：fuhl2005@sohu.com；劉漢中，研究員，主要從事兔育種研究，Email：hanzhong6688@sina.com。

(本文審稿：林居純；責(zé)任編輯：秦碧雯；英文審稿：劉益平)