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摘要 為了篩選非洲菊老壯試管苗叢芽誘導培養(yǎng)的適宜激素濃度,以培養(yǎng)在0.3 mg/L 6-BA培養(yǎng)基中的非洲菊老壯試管苗為試驗材料,以MS作為基本培養(yǎng)基,并添加不同濃度的6-BA,形成細胞分裂素不同濃度梯度的對比試驗組。結(jié)果表明,在細胞分裂素(6-BA)處理濃度為0.9 mg/L時,植株發(fā)芽和生長最好,具體表現(xiàn)為促進苗叢芽數(shù)的增殖最多,且促進苗叢葉片數(shù)的適度增加,同時又抑制苗叢植株徒長及生根、黃花或玻璃化等現(xiàn)象的出現(xiàn)。
關鍵詞 非洲菊;組織培養(yǎng);叢芽誘導;6-BA
中圖分類號 S567.239 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739(2018)20-00126-01
非洲菊(Gerbera jamesonii Bolus)是菊科扶郎花屬多年生宿根草本觀賞植物,又名扶郎花。作為世界著名的鮮切花之一,該花卉品種多樣、花色各異、絢麗多姿、花期長,深受人們的喜愛。非洲菊傳統(tǒng)栽培方法為種子繁殖、分株繁殖等。其中,種子繁殖極易產(chǎn)生變異和退化,且結(jié)實率低,種子壽命短,發(fā)芽率也較低;分株繁殖則繁殖系數(shù)低,難以滿足市場需求,且易于傳播病蟲害,使種性退化[1]。目前,非洲菊栽培種苗主要用植物組織培養(yǎng)繁殖方法進行商業(yè)化生產(chǎn),以利于種苗的快速繁殖、脫毒、復壯、種質(zhì)保存及栽培生理和育種研究等[2]。
非洲菊種苗的組織培養(yǎng)繁育方面,許多學者已進行了較多和長期的研究,其技術已較為成熟和完善。劉麗榮等[3]通過試驗,篩選出了各階段最佳培養(yǎng)基配方,并在此基礎上有針對性地對瓶苗玻璃化等問題進行了探討。更多的研究則集中在不同生長素調(diào)節(jié)劑組合對其愈傷組織和不定芽誘導的影響;用F1代種子實生苗作為外植體,進行叢芽誘導、繼代培養(yǎng);2,4-D+6-BA和2,4-D+KT等不同激素組合和不同濃度組合對非洲菊花托外植體的愈傷組織、叢芽誘導、試管壯苗、生根的影響等[4-6]。本試驗以非洲菊老壯試管苗為試驗材料,以MS作為基本培養(yǎng)基,并添加不同濃度的6-BA形成對比試驗組,以期從中篩選出非洲菊老壯試管苗叢芽誘導培養(yǎng)的細胞分裂激素的適宜濃度,從而提高試管苗成活率。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗材料為培養(yǎng)在0.3 mg/L 6-BA培養(yǎng)基中的非洲菊老壯試管苗。叢芽誘導培養(yǎng)基為MS+6-BA(0.3、0.6、0.9、1.2 mg/L)+瓊脂6 g/L+糖30 g/L(pH值5.8),經(jīng)高溫高壓濕熱滅菌后備用。
1.2 試驗方法
試驗根據(jù)6-BA濃度設4個處理,分別為0.3 mg/L(處理1)、0.6 mg/L(處理2)、0.9 mg/L(處理3)、1.2 mg/L(處理4)。將非洲菊老壯試管苗切分成帶有2~3個芽的小苗叢,均勻接種到新配制好的不同培養(yǎng)基中,每個處理接種3瓶(分別用A、B、C表示),每瓶接種3個小苗叢,置于23~25 ℃、1 500~2 000 lx、每天12 h光照條件下培養(yǎng)。在35 d左右時,對苗叢的芽數(shù)、株高、葉片數(shù)、根數(shù)等進行觀察記錄,并進行生物統(tǒng)計學分析。以新生芽盡量多且苗健壯為標準,確定本次叢芽誘導培養(yǎng)適宜的6-BA激素濃度。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同處理對非洲菊老壯試管苗叢芽數(shù)的影響
從表1可以看出,在不同的激素濃度下,苗叢新生芽數(shù)是不同的,隨著激素濃度的升高,苗叢平均芽數(shù)呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。方差分析表明,各處理間差異顯著。用新復極差方法(LSR)進行多重比較,處理3與處理1、處理2、處理4差異極顯著;處理2與處理1、處理4差異顯著;處理1與處理4差異不顯著。由此表明,就芽數(shù)指標而言,處理3培養(yǎng)基,即6-BA濃度為0.9 mg/L時,最適宜非洲菊老壯試管苗的新芽增殖。
2.2 不同處理對非洲菊老壯試管苗苗叢株高的影響
從表2可以看出,隨著激素濃度的升高,試管苗叢平均株高有逐漸降低的趨勢,即逐漸變矮壯。經(jīng)方差分析,處理間差異顯著。經(jīng)多重比較,處理1與處理4差異極顯著,與處理3差異顯著,與處理2差異不顯著;處理2與處理4差異顯著,與處理3差異不顯著;處理3與處理4之間差異不顯著。由此表明,6-BA對苗叢株高有抑制作用,且濃度越高其抑制作用也越強。就此次試驗的目的而言,0.9 mg/L 6-BA除了能最大限度地誘導新芽生長以外,還能抑制植株徒長,從而使苗生長健壯。
2.3 不同處理對非洲菊老壯試管苗苗叢葉片數(shù)的影響
從表3可以看出,苗叢的葉片平均數(shù)呈現(xiàn)先增后減的趨勢,且處理3的葉片數(shù)最多。但經(jīng)方差分析后可知,處理間差異不顯著,說明此試驗中,不同濃度6-BA對試管苗葉片數(shù)的影響差異不大,都是使葉片適度增加。同時說明,試管苗在處理3的6-BA激素濃度作用下,植株生長狀況良好。
2.4 不同處理對非洲菊老壯試管苗苗叢根數(shù)的影響
由于是以老壯試管苗為試驗的起始材料,所以培養(yǎng)誘導過程中會有一些試管苗出現(xiàn)生根情況。從表4可以看出,隨著6-BA激素濃度的升高,試管苗的生根數(shù)量也越來越少,處理3和處理4幾乎沒有根的出現(xiàn),這對叢芽的分化和生長有利,達到了預期的效果。
3 結(jié)論與討論
試驗結(jié)果表明,非洲菊老壯試管苗叢芽誘導培養(yǎng)最適宜的6-BA激素濃度為0.9 mg/L。在此6-BA濃度培養(yǎng)基的培養(yǎng)作用下,植株發(fā)芽和生長最好。具體表現(xiàn)為促進苗叢芽數(shù)的增殖最多,且促進苗叢葉片數(shù)的適度增加,同時又抑制苗叢植株徒長及生根、黃花或玻璃化等現(xiàn)象的出現(xiàn),達到了節(jié)約起始材料和生產(chǎn)成本,快速培育芽數(shù)最多、葉片較綠、苗健壯、無根的非洲菊優(yōu)質(zhì)試管種苗的目的。本試驗的不足之處是設置的6-BA濃度梯度范圍不夠?qū)挕⒉粔蚣毣?,且重復的?shù)量也不夠多。今后在繼續(xù)進行試驗時,應細化和擴大6-BA的濃度梯度范圍,增加各處理重復的數(shù)量及每瓶苗的接種數(shù)量,充分利用培養(yǎng)空間及培養(yǎng)基,同時考慮6-BA與生長素NAA等配合使用對非洲菊叢芽誘導的影響等,以提高試驗的精確性和對非洲菊優(yōu)質(zhì)試管種苗生產(chǎn)繁育實踐的指導意義。
4 參考文獻
[1] 陳昌明.植物組織培養(yǎng)[M].2版.北京:高等教育出版社,2015:141-142.
[2] 王小菁,陳剛,李明軍,等.植物生長調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中的應用[M].北京:化學工業(yè)出版社,2010.
[3] 劉麗榮,蘇榮德,王洪波,等.非洲菊組織培養(yǎng)繁殖的試驗研究[J].遼寧農(nóng)業(yè)職業(yè)技術學院學報,2002,4(3):9.
[4] 蔡小東,胡文靜.非洲菊愈傷組織和不定芽的誘導[J].北方園藝,2010(21):183-185.
[5] 王曉紅.非洲菊的離體快繁及在離體條件下誘導多倍體的研究[D].株洲:中南林學院,2003.
[6] 龔娜,楊濤,肖軍,等.非洲菊花托愈傷組織的誘導研究[J].黑龍江農(nóng)業(yè)科學,2011(3):21-23.