乙肝病毒血清學檢測采用化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法效果比較分析

張琰 戴彰 朱建輝

[摘要] 目的 分析乙肝病毒血清學檢測采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫方法檢驗效果。方法 方便選取2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，對患者采血之后血清標本采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附法進行檢測，觀察兩種檢測方式的檢驗效果。 結(jié)果 化學發(fā)光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，占比64.0%，酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢出乙肝病毒陽性患者有200例，占比40.0%，酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率要明顯低于化學發(fā)光檢查方法，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計意義（χ2=57.69，P<0.05）。兩種檢查方式的重復性結(jié)果比較，化學發(fā)光檢測法重復性高60例（12.0%）、中70例（14.0%）、低100例（20.0%），顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實驗法，且差異有統(tǒng)計學意義（χ2=24.39、22.50、18.71，P<0.05）。 結(jié)論 化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢驗方式相比，化學發(fā)光法對乙肝病毒陽性檢出率要明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗法，對其進行定性定量檢測，能夠提高檢測準確度。

[關(guān)鍵詞] 乙肝病毒；血清學檢測；化學發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附試驗法；臨床價值

[中圖分類號] R512.6；R446.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）09（b）-0193-03

[Abstract] Objective To analyze the serological detection of hepatitis B virus by chemiluminescence method and enzyme-linked immunosorbent assay. Methods A total of 500 suspected hepatitis B patients admitted to the hospital from February 2017 to May 2018 were selected as subjects. The blood samples were convenient collected by chemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay after blood collection. Results There were 320 cases of hepatitis B virus positive by chemiluminescence method， accounting for 64.0%. 200 cases of hepatitis B virus positive patients were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， accounting for 40.0%， and HBV was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The positive rate was significantly lower than that of chemiluminescence. The difference between the two groups was statistically significant （χ2=57.69， P<0.05）. The reproducibility results of the two examination methods were 60 case（12.0%）， 70 case（14.0%）， and 100 case（20.0%）， which were significantly better than the enzyme-linked adsorption method. The difference was statistically significant （χ2=24.39， 22.50， 18.71， P<0.05）. Conclusion Compared with the enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， the positive detection rate of hepatitis B virus by chemiluminescence method is significantly higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） qualitative and quantitative detection can improve the detection accuracy.

[Key words] Hepatitis B virus； Serological detection； Chemiluminescence method； Enzyme-linked immunosorbent assay； Clinical value

乙型肝炎病毒在我國的發(fā)病率相對較高，目前沒有針對乙型肝炎疾病特效治療方式，針對乙型肝炎病毒實施早期診斷治療至關(guān)重要。對乙型肝炎病毒檢測的手段主要是化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗法兩種檢測方式，這兩種檢測方式在臨床上均具有重要應(yīng)用價值[1]?，F(xiàn)就2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，分析乙肝病毒血清學檢測采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫方法檢驗效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，500例患者中男性患者有260例，女性患者有240例，年齡均在20～60歲之間，平均年齡為（42.8±5.8）歲。500例患者診斷標準均根據(jù)《乙型病毒性肝炎診斷標準》進行檢查診斷，且所選病例均通過倫理委員會的批準，患者及家屬均知情同意。

1.2 方法

對所有患者分別實施化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗法。500例患者均在檢驗當天清晨采集患者空腹靜脈肘靜脈血10 mL，將采集的血液標本進行離心，離心的速度設(shè)置為3 000 r/min，離心的時間設(shè)置為10 min，將分離的血清標本進行保存待檢。每次根據(jù)定值參比血清作為質(zhì)量控制，操作方式均嚴格根據(jù)試劑盒說明書實施。化學發(fā)光法檢測：采用化學發(fā)光儀器：全自動免疫分析儀ZH6000，使用雙抗體夾心方法、實施檢驗，把配套反應(yīng)白色不透明條板微孔（固相有鏈霉親和素SA）、吸頭與洗液放置在預定的位置。把鼠抗HbsAg單克隆抗體-生物素和待測樣品共同進行培育。通過洗滌，洗掉游離成分，然后加入鼠抗HbsAg單克隆-堿性磷酸酶，再次洗滌，洗掉游離成分，最后加入發(fā)光底物液，通過測定各孔的發(fā)光值RLU，換算出相應(yīng)濃度。酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測，采用廈門新創(chuàng)酶聯(lián)方法，TECAN酶標儀。使用雙抗原夾心法（只檢測表面抗原用雙抗體夾心法）實施測定，采用去離子水稀釋，將50 mL濃縮洗滌液到1 000 mL放置在專門洗液瓶當中，把酶標試劑放置在試劑預定位置讀取吸光度值，通過陰性對照根據(jù)平均吸光度作為臨界值。若OD值大于1則為陽性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標

觀察500例患者乙肝病毒采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢測的結(jié)果，對兩組檢查結(jié)果進行比較。對兩種檢測方式重復性結(jié)果比較，重復性可分為高、中、低3個指標層次[2]。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

化學發(fā)光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢出乙肝病毒陽性患者有200例，酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率要明顯低于化學發(fā)光檢查方法，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計意義（P<0.05）。見表1。

觀察兩種檢查方式的重復性結(jié)果，化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附實驗法重復性對比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標結(jié)果相比，均顯示出化學發(fā)光檢測法重復性要顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實驗法，且兩組之間數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乙型肝炎病毒屬于全球性傳染性疾病，在我國，乙型肝炎病毒表面抗原攜帶者高達百分之十[3]。乙肝病毒表面抗體屬于人體感染乙肝病毒之后針對乙肝病毒所產(chǎn)生特異性抗體，因為目前對于乙型肝炎病毒沒有特效的治療方法，因此，早期對乙肝病毒進行診斷至關(guān)重要[4]。

張英霞[5]的研究顯示，針對乙肝病毒血清學檢驗分別采用化學發(fā)光法檢測與美聯(lián)免疫吸附實驗法進行檢測，研究結(jié)果顯示，化學發(fā)光檢測方法檢測乙肝病毒陽性率為54.8%，要顯著高于酶聯(lián)免疫吸附實驗法。該文研究結(jié)果顯示，化學發(fā)光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，占比64.0%，明顯優(yōu)于酶聯(lián)免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率，兩組數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計意義，與張英霞的研究結(jié)果相近。原因在于兩種不同檢驗方式具體方法差異，酶聯(lián)免疫吸附試驗法屬于臨床診斷乙肝疾病較為傳統(tǒng)檢測方法，酶聯(lián)免疫吸附試驗法操作簡便、快捷、費用較低特征，逐漸廣泛被應(yīng)用于乙肝病毒抗體檢測當中，但是這種靜靜能夠?qū)嵤┒ㄐ苑治?，不能夠?qū)嵤┒糠治鯷6-7]?；瘜W發(fā)光分析檢測技術(shù)屬于生物素-親和素技術(shù)，在電極的表面能夠通過電化學引發(fā)特異性化學發(fā)光反應(yīng)，屬于目前較為先進化學發(fā)光免疫測定系統(tǒng)。

化學發(fā)光免疫分析技術(shù)采用載體朱啊喲是受到電磁鐵控制影響，全面實現(xiàn)檢測自動化與標準化，減少因為人工操作所帶來的誤差，并且能夠精準實施定性與定量分析，能夠大幅度減少誤差。化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附實驗法重復性對比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標結(jié)果相比，均顯示出化學發(fā)光檢測法重復性要顯著優(yōu)于酶聯(lián)吸附實驗法?；瘜W發(fā)光分析檢測技術(shù)高、中、低重復率分別為12.0%、14.0%、20.0%，低濃度重復率相對較高。且化學發(fā)光分析檢測技術(shù)重復率要低于酶聯(lián)免疫吸附試驗方法。說明化學發(fā)光分析技術(shù)在乙肝病毒檢測當中占有重要價值。

以上結(jié)果表明，隨著臨床檢驗技術(shù)發(fā)展與進步，對乙型肝炎病毒的檢測，除了采用傳統(tǒng)酶聯(lián)免疫吸附試驗方法，化學發(fā)光分析檢測技術(shù)逐漸應(yīng)用于臨床，并且獲得較好的檢測效果?；瘜W發(fā)光分析檢測技術(shù)經(jīng)生物素-親和素技術(shù)在電極表面引發(fā)特異性發(fā)光反應(yīng)，屬于臨床較為先進化學發(fā)光測定性系統(tǒng)?；瘜W發(fā)光分析檢測技術(shù)屬于新一代免疫標記測定技術(shù)，能夠有效提高檢測方法靈敏度，精準實施定量檢測，能夠精準檢出低濃度乙肝病毒在病程觀察當中絕大程度縮短窗口期?；瘜W發(fā)光分析檢測技術(shù)與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫吸附試驗法比較，化學發(fā)光免疫吸附法試劑消耗量相對較小、試劑容易得到保存、試劑穩(wěn)定性能先谷底較高，適用于健康人群。并且化學發(fā)光分析檢測技術(shù)特異度較高，重復性相對較好，試劑相對穩(wěn)定，沒有污染，且有效期較長。操作程序相對簡單，且容易自動化與標準化等。因而，針對乙肝病毒檢測，在檢測方式方面比較，化學發(fā)光分析檢測技術(shù)應(yīng)當作為臨床首選檢測方式。以達到早期發(fā)現(xiàn)乙肝疾病，早期預防疾病，控制病情的繼續(xù)發(fā)展，也能夠為后期診斷治療乙肝疾病提供參考依據(jù)，有助于患者治療效果的提高，降低誤診與漏診的現(xiàn)象，提高臨床診斷治療效率。

綜上所述，化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫吸附試驗法檢驗方式相比，化學發(fā)光法對乙肝病毒陽性檢出率要明顯高于酶聯(lián)免疫吸附試驗法，對其進行定性定量檢測，能夠提高檢測準確度。酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測技術(shù)簡便快捷、成本較低，靈敏度相對較低，只能進行定性檢測?；瘜W發(fā)光檢測方式具備較高靈敏度，能夠?qū)嵤┒ㄐ耘c定量檢測，有助于對乙肝疾病患者的診斷，可以為臨床醫(yī)生判斷與治療疾病提供重要臨床應(yīng)用價值，值得臨床推廣與應(yīng)用。

[參考文獻]

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[4] 張英霞.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果對比[J].中外醫(yī)療，2017，36（20）：35-37.

[5] 傅學文.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫法的效果對比[J].心理醫(yī)生，2017，23（27）：69.

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[8] 吳淑霞，范軍，張儉，等.兩種方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物結(jié)果分析[J].寧夏醫(yī)科大學學報，2015，37（3）：344-346.

（收稿日期：2018-06-15）