巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子在腎癌中的表達(dá)及對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響*

孫連桃，肖偉利

(1.包頭醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014040；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，呼和浩特 010017)

·論著·

巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子在腎癌中的表達(dá)及對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響*

孫連桃1，肖偉利2

(1.包頭醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古包頭 014040；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，呼和浩特 010017)

目的探討巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)在腎癌組織中的表達(dá)及對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響。方法以內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院和包頭市腫瘤醫(yī)院2013年3月至2015年3月病理室確診的49例腎癌患者為研究對(duì)象，采用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)及反轉(zhuǎn)錄(RT)-PCR法檢測(cè)腎癌組織及癌旁正常組織、腎癌細(xì)胞株及正常腎小管上皮細(xì)胞HK-2中MIF蛋白及mRNA表達(dá)；利用脂質(zhì)體將siRNA MIF及siRNA NC轉(zhuǎn)染到腎癌細(xì)胞中，Western blot及RT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果，噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞活力，Transwell法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力，Western blot檢測(cè)細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)及基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá)。結(jié)果腎癌組織中MIF蛋白及mRNA表達(dá)水平明顯高于癌旁正常組織(0.89±0.09vs. 0.18±0.02，1.19±0.04vs. 0.19±0.01，P<0.05)，腎癌細(xì)胞株ACHN、769-p、786-O、Caki-1中MIF蛋白及mRNA表達(dá)水平明顯高于腎小管上皮細(xì)胞HK-2(P<0.05)。與siRNA NC組比較，siRNA MIF組中MIF蛋白及mRNA表達(dá)水平明顯下調(diào)(P<0.05)，細(xì)胞活力及侵襲能力降低(P<0.05)，HIF-1α及MMP9表達(dá)水平下調(diào)(P<0.05)。結(jié)論MIF在腎癌中高表達(dá)，下調(diào)MIF表達(dá)能明顯抑制腎癌細(xì)胞的侵襲能力，可能與抑制HIF-1α/MMP9信號(hào)通路有關(guān)。

腎腫瘤；巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子；侵襲

腎細(xì)胞癌又稱為腎癌，是泌尿生殖系統(tǒng)中常見的惡性腫瘤，僅次于膀胱癌，其中腎透明細(xì)胞癌是最常見的病理類型。近些年來雖然隨著醫(yī)學(xué)影像技術(shù)手段的不斷發(fā)展，腎癌的早期診斷率大大提高，但是有部分患者在早期診斷時(shí)就發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性病灶，使得5年生存率不足10%[1-2]。因此，尋找更為高效、特異性的早期標(biāo)記物及探討腎癌的發(fā)病機(jī)制對(duì)于腎癌的診斷及治療將具有積極意義。巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)是一種來源于活化的T淋巴細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞的多功能因子，受下丘腦垂體控制。近些年研究表明MIF不僅參與機(jī)體免疫反應(yīng)、炎性反應(yīng)，還在眾多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著促進(jìn)作用，并與腫瘤的侵襲、浸潤呈正相關(guān)，推測(cè)MIF是一個(gè)潛在的腫瘤標(biāo)記物[3-5]。另外，有研究表明腎癌患者血清MIF表達(dá)水平顯著高于健康對(duì)照[6]。本課題組前期也采用免疫組織化學(xué)法證實(shí)MIF在腎癌組織中高表達(dá)，并與腫瘤的分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但對(duì)于MIF在腎癌發(fā)生、發(fā)展中的具體作用機(jī)制尚未見報(bào)道。因此，本研究將采用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR進(jìn)一步檢測(cè)癌組織及癌細(xì)胞株中MIF的表達(dá)，并探討MIF在腎癌中的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源 以內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院和包頭市腫瘤醫(yī)院泌尿外科2013年3月至2015年3月病理室確診的49例腎癌患者為研究對(duì)象，男30例，女19例；年齡40～74歲，中位年齡57歲，<60歲者20例，≥60歲者29例。收集所有患者腫瘤組織石蠟標(biāo)本(均為腎透明細(xì)胞癌)，另外取相應(yīng)的腎癌旁正常組織作為對(duì)照。所有患者術(shù)前均未接受過任何的化療、放療、靶向治療及免疫治療。

1.2細(xì)胞株 人腎癌細(xì)胞株ACHN及769-p，人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株786-O及Caki-1，腎小管上皮細(xì)胞HK-2均購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫。

1.3儀器與試劑 噻唑藍(lán)(MTT)，DMEM培養(yǎng)基均購自美國Hyclone公司；二喹啉甲酸(BCA)蛋白水平測(cè)定試劑盒，辣根過氧化物酶標(biāo)記山羊抗兔IgG(H+L)均購自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；trizol試劑盒，一步法反轉(zhuǎn)錄(RT)-PCR試劑盒，LipofectamineTM2000均購自大連寶生生物技術(shù)有限公司；siRNA MIF及siRNA NC均購自廣州銳博生物技術(shù)有限公司；兔抗人MIF，缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)，基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)及3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)多克隆抗體均購自美國Abcam公司。MK3酶標(biāo)儀購自美國Thermo公司；TS100倒置熒光顯微鏡購自日本Nikon公司；2720型PCR儀購自美國ABI公司；DYCZ-25D型雙垂直電泳儀，DYCZ-25D型轉(zhuǎn)印電泳儀均購自北京六一生物科技有限公司；ChemiDocTM XRS凝膠成像系統(tǒng)購自美國Bio-Rad公司。

1.4方法

1.4.1細(xì)胞轉(zhuǎn)染 當(dāng)腎癌細(xì)胞匯合度達(dá)到50%左右時(shí)，利用LipofectamineTM2000脂質(zhì)體將siRNA MIF及siRNA NC轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，6 h以后換液；繼續(xù)培養(yǎng)48 h。Western blot及實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)細(xì)胞中MIF蛋白及mRNA水平。

1.4.2RT-PCR檢測(cè)MIF mRNA表達(dá) 采用trizol試劑盒提取細(xì)胞總RNA，并檢測(cè)總RNA純度，以260 nm與280 nm處吸光度值比值(A260/A280)說明RNA純度的良好；接著一步法RT-PCR試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄，最后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)果利用2-ΔΔCT法進(jìn)行分析。MIF上游引物：5′-CAC TGA AGC GGG AAG GGA CT-3′，下游引物：5′-GCG GCG ATA CCG TAA AGC AC-3′；GAPDH上游引物：5′-AGC CAC ATC GCT CAG ACA-3′，下游引物：5′-TGG ACT CCA CGA CGT ACT-3′。

1.4.3Western blot檢測(cè)MIF、HIF-1α及MMP9蛋白的表達(dá) 在獲得的組織或細(xì)胞中加入細(xì)胞裂解液，裂解30 min，4 ℃條件下離心得到的上清液就是總蛋白。接著采用BCA試劑盒測(cè)定蛋白水平。蛋白煮沸10 min變性，上樣，進(jìn)行十二烷基苯磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳1～2 h，濕法轉(zhuǎn)膜30～50 min。5%脫脂奶粉封閉1 h，一抗溶液(兔抗人MIF、HIF-1α、MMP9及GAPDH多克隆抗，稀釋度為1∶100)孵育，4 ℃過夜；二抗溶液[辣根過氧化物酶標(biāo)記山羊抗兔IgG (H+L)，稀釋度1∶200]室溫孵育1～2 h。于凝膠成像系統(tǒng)中曝光。用Quantity one軟件分析各抗體條帶灰度值。

1.4.4MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力 將腎癌細(xì)胞接種到96孔板，培養(yǎng)24 h后，按1.4.1方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染，繼續(xù)培養(yǎng)48 h后，加入20 μL MTT，繼續(xù)培養(yǎng)4 h，將96孔板中的上清液棄去，再加入150 μL二甲基亞砜，震蕩使結(jié)晶物溶解，于酶標(biāo)儀560 nm波長處測(cè)A值，A值即代表細(xì)胞活力。

1.4.5Transwell法檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力 將Transwell小室鋪上Matrigel備用。將腎癌細(xì)胞接種到6孔板，24 h后，按1.4.1方法進(jìn)行轉(zhuǎn)染，繼續(xù)培養(yǎng)48 h后，細(xì)胞消化并接種到Transwell上室，而下室僅含有DMEM培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h后，將小室取出，用多聚甲醛固定，結(jié)晶紫染色，最后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞侵襲情況，并對(duì)下室的5個(gè)視野中的細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值，即為細(xì)胞的侵襲數(shù)目。

2 結(jié) 果

2.1MIF在腎癌組織及癌旁正常組織中的表達(dá) 如圖1所示，Western blot結(jié)果顯示腎癌組織中MIF蛋白表達(dá)水平(0.89±0.09)明顯高于癌旁正常組織(0.18±0.02)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如圖2所示，RT-PCR結(jié)果顯示腎癌組織中MIF mRNA表達(dá)水平(1.19±0.04)明顯高于癌旁正常組織(0.19±0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

A：癌旁正常組織；B：腎癌組織

圖1腎癌組織及癌旁正常組織中MIF蛋白的表達(dá)

A：癌旁正常組織；B：腎癌組織；*：P<0.05，與癌旁正常組織比較

圖2腎癌組織及癌旁正常組織中MIF mRNA的表達(dá)

2.2MIF在腎癌細(xì)胞株及腎小管上皮細(xì)胞HK-2中的表達(dá) 如圖3所示，Western blot結(jié)果顯示腎癌細(xì)胞株ACHN(0.92±0.09)，769-p(0.88±0.09)，786-O(0.80±0.09)，Caki-1(1.15±0.10)中MIF蛋白表達(dá)水平明顯高于腎小管上皮細(xì)胞HK-2(0.17±0.02)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如圖4所示，RT-PCR結(jié)果顯示腎癌細(xì)胞株ACHN(0.59±0.13)，769-p(0.63±0.09)，786-O(1.03±0.09)，Caki-1(1.24±0.09)中MIF mRNA表達(dá)水平明顯高于腎小管上皮細(xì)胞HK-2(0.18±0.02)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

圖3 腎癌細(xì)胞株及腎小管上皮細(xì)胞HK-2中 MIF蛋白的表達(dá)

*：P<0.05，與HK-2比較

圖4腎癌細(xì)胞株及腎小管上皮細(xì)胞HK-2中MIF mRNA的表達(dá)

2.3siRNA轉(zhuǎn)染效果的測(cè)定 腎癌細(xì)胞Caki-1轉(zhuǎn)染siRNA MIF及siRNA NC 48 h后，Western blot結(jié)果顯示與siRNA NC組(0.97±0.10)比較，siRNA MIF組(0.16±0.01)中MIF蛋白表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)，見圖5；RT-PCR結(jié)果顯示與siRNA NC組(1.15±0.15)比較，siRNA MIF組(0.36±0.03)中MIF mRNA表達(dá)水平明顯降低(P<0.05)，見圖6。

A：siRNA NC組；B：siRNA MIF組

圖5 siRNA轉(zhuǎn)染后腎癌細(xì)胞Caki-1中MIF蛋白的表達(dá)

A：siRNA NC組；B：siRNA MIF組；*：P<0.01，與siRNA NC組比較

圖6 siRNA轉(zhuǎn)染后腎癌細(xì)胞Caki-1中MIF mRNA的表達(dá)

2.4siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞活力的影響 腎癌細(xì)胞株Caki-1轉(zhuǎn)染siRNA MIF及siRNA NC 48 h后，MTT法檢測(cè)結(jié)果顯示與siRNA NC組(0.68±0.06)比較，siRNA MIF組(0.32±0.03)細(xì)胞活力明顯降低(P<0.05)，見圖7。

2.5siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響 腎癌細(xì)胞株Caki-1轉(zhuǎn)染siRNA MIF及siRNA NC 48 h后，Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與siRNA NC組(138.95±13.40)比較，siRNA MIF組(42.19±4.21)細(xì)胞遷移數(shù)目明顯減少(P<0.05)，見圖8。

2.6siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞中HIF-1α及MMP9表達(dá)的影響 腎癌細(xì)胞株Caki-1轉(zhuǎn)染siRNA MIF及siRNA NC 48 h后，Western blot結(jié)果顯示與siRNA NC組比較，siRNA MIF組HIF-1α[(0.73±0.06)vs.(0.18±0.02)]及MMP9[(0.70±0.07)vs.(0.20±0.02)]表達(dá)水平明顯下調(diào)(P<0.05)，見圖9。

A：siRNA NC組；B：siRNA MIF組；*：P<0.01，與siRNA NC組比較

圖7 siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞活力的影響

A：siRNA NC組；B：siRNA MIF組

圖8 siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞侵襲能力的影響

(結(jié)晶紫染色，×200)

A：siRNA NC組；B：siRNA MIF組

圖9 siRNA MIF對(duì)腎癌細(xì)胞中HIF-1α及MMP9表達(dá)的影響

3 討 論

MIF是1970年學(xué)者在遲發(fā)型反應(yīng)研究中發(fā)現(xiàn)的一種能夠抑制巨噬細(xì)胞移動(dòng)的因子，位于人第22號(hào)染色體上。MIF來源于活化的T淋巴細(xì)胞，能夠表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、表皮細(xì)胞等，能通過內(nèi)分泌或者旁分泌促進(jìn)多種細(xì)胞因子的分泌，進(jìn)而引起各種免疫或炎性反應(yīng)[3-4]。近年來，研究還證實(shí)MIF在肝癌、胃癌、大腸癌、乳腺癌等多種腫瘤組織中高表達(dá)，對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展起著促進(jìn)作用，被認(rèn)為是一種促癌因子[7-9]。另外，2013年Du等[6]利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)證實(shí)了腎透明細(xì)胞癌患者血清中MIF表達(dá)水平顯著高于健康對(duì)照組。本研究前期免疫組織化學(xué)結(jié)果也證實(shí)腎癌組織中MIF陽性表達(dá)率顯著高于癌旁正常組織，而且MIF的表達(dá)與腫瘤分化程度、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。提示MIF在腎癌的發(fā)生、發(fā)展中也起著推動(dòng)作用，可能是腎癌潛在的早期標(biāo)記物，但是MIF在腎癌的發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制尚未見報(bào)道，所以本課題組對(duì)此展開研究。本研究首先采用Western blot及RT-PCR法檢測(cè)腎癌及癌旁正常組織中MIF蛋白及mRNA的表達(dá)，結(jié)果與本課題組前期免疫組織化學(xué)結(jié)果及Du等[6]研究結(jié)果一致，MIF在腎癌組織中高表達(dá)。接著，繼續(xù)采用Western blot及實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)腎癌細(xì)胞株及正常腎小管細(xì)胞HK-2中MIF的表達(dá)，結(jié)果表明腎癌細(xì)胞株中MIF蛋白及mRNA表達(dá)水平均明顯高于HK-2，與MIF在組織中的表達(dá)趨勢(shì)一致[7-9]。進(jìn)一步說明MIF在腎癌的發(fā)生、發(fā)展中起著促進(jìn)作用，提示通過干擾并下調(diào)腎癌中MIF的表達(dá)進(jìn)而抑制腎癌的發(fā)生、發(fā)展。因此，本研究首先利用脂質(zhì)體將siRNA MIF及siRNA NC轉(zhuǎn)染到腎癌細(xì)胞Caki-1中，并證實(shí)轉(zhuǎn)染成功。接著利用MTT法證實(shí)siRNA MIF能顯著降低Caki-1細(xì)胞活力，與Du等[6]采用發(fā)夾RNA干擾腎癌細(xì)胞中MIF表達(dá)，能顯著降低細(xì)胞活力及細(xì)胞克隆形成能力的研究結(jié)果一致。從而說明下調(diào)腎癌細(xì)胞中MIF表達(dá)，能顯著抑制腎癌細(xì)胞的增殖。

隨著腫瘤惡性程度的加深，腫瘤細(xì)胞代謝越加旺盛，進(jìn)而使得腫瘤細(xì)胞處于缺血、缺氧的微環(huán)境中，因此為了使細(xì)胞能夠適應(yīng)此微環(huán)境，腫瘤內(nèi)部會(huì)對(duì)低氧環(huán)境做出反應(yīng)以滿足細(xì)胞穩(wěn)定快速的生長。其中HIF-1α是一種為適應(yīng)缺氧微環(huán)境而產(chǎn)生的核轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，在正常氧環(huán)境下，HIF-1α被降解，表達(dá)水平極低，而在低氧環(huán)境下，HIF-1α呈倍數(shù)的增長，并結(jié)合于靶基因的低氧反應(yīng)元件，調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄活性，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的糖代謝，血管生成，細(xì)胞增殖及侵襲轉(zhuǎn)移等[10-11]。研究已經(jīng)顯示，HIF-1α在眾多腫瘤組織中高表達(dá)，并且MIF的存在能夠抑制HIF-1α的降解及突變，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的快速生長與浸潤[10-11]。另外腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移是影響腎癌患者術(shù)后預(yù)后的重要因素之一，而腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移涉及腫瘤細(xì)胞穿過細(xì)胞外基質(zhì)、血管壁基膜等過程，而MMPs是介導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)降解，促使腫瘤細(xì)胞穿膜的最為主要的蛋白水解酶[12-13]。其中MMP9是MMPs家族最大的水解酶，能夠降解包括Ⅳ型膠原在內(nèi)的最為重要的基質(zhì)成分。而且研究表明，MMP9基因的5′UTR區(qū)域存在著HIF-1α的結(jié)合位點(diǎn)，HIF-1α對(duì)于MMP9具有顯著的調(diào)控作用，如研究證實(shí)通過調(diào)控HIF-1α/MMP9途徑能夠顯著抑制胃癌的生長及侵襲[14]。同時(shí)研究還表明，MIF能直接調(diào)控MMPs表達(dá)進(jìn)而影響腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移，如RNA干擾口腔鱗狀細(xì)胞Tca8113、HN5及SCC25中MIF表達(dá)，能顯著下調(diào)MMP9表達(dá)，繼而抑制癌細(xì)胞侵襲[15]。說明MIF可能通過調(diào)控HIF-1α/MMP9通路進(jìn)而影響腎癌細(xì)胞的生長侵襲。所以本研究繼續(xù)利用Western blot檢測(cè)siRNA MIF對(duì)Caki-1細(xì)胞中HIF-1α、MMP9表達(dá)水平的影響，結(jié)果表明siRNA能顯著下調(diào)HIF-1α及MMP9表達(dá)。

綜上所述，MIF在腎癌組織及腎癌細(xì)胞(ACHN、769-p、786-O、Caki-1)中高表達(dá)，利用RNA干擾Caki-1腎癌細(xì)胞中MIF表達(dá)，能顯著下調(diào)MIF蛋白及mRNA表達(dá)，并降低細(xì)胞活力及侵襲能力，可能與抑制HIF-1α/MMP9信號(hào)通路有關(guān)。

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Expressionofmacrophagemigrationinhibitoryfactorinrenalcarcinomaanditseffectoninvasionabilityofrenalcarcinomacell*

SunLiantao1，XiaoWeili2

(1.SchoolofMedicalTechnology,BaotouMedicalColloge,Baotou,InnerMongolia014040,China;2.DepartmentofClinicalLaboratory,InnerMongoliaAutonomousRegionPeople′sHospital,Hohhot,InnerMongolia010017,China)

ObjectiveTo explore the expression of macrophage migration inhibitory factor (MIF) in renal carcinoma tissue and its effect on invasion of renal carcinoma cell.MethodsForty-eight cases of patients definitely diagnosed with renal cancer in the Department of Pathology,the Inner Mongolia Autonomous Region People′s Hospital and Baotou Municipal Tumor Hospital from March 2013 to March 2015 served as the research subjects.The expressions of MIF protein and mRNA in renal carcinoma tissues and adjacent normal tissues,renal carcinoma cell lines and normal renal tubular epithelial cells HK-2 were detected by adopting the Western blot and RT-PCR.siRNA MIF and siRNA NC were transfected into renal carcinoma cells by liposome.The transfection effect was detected by Western blot and RT-PCR.The cell viability and invasion ability were measured by MTT and Transwell method respectively.The expression of hypoxia inducible factor 1-alpha (HIF-1α) and matrix metalloproteinase 9 (MMP9) was measured by Western blot.ResultsThe expression levels of MIF protein and mRNA in renal carcinoma tissues were significantly higher than those in adjacent normal tissues (0.89±0.09vs. 0.18±0.02，1.19±0.04vs. 0.19±0.01，P<0.05).The expression levels of MIF protein and mRNA in renal cancer cell line ACHN，769-p，786-O，Caki-1 cells were higher than those in renal tubular epithelial HK-2 cells (P<0.05).Compared with the siRNA NC group,the expression levels of MIF protein and mRNA in siRNA MIF group were significantly down-regulated (P<0.05),the cell viability and invasion ability were reduced (P<0.05),and the expressions of HIF-1α and MMP9 were down regulated (P<0.05).ConclusionMIF is highly expressed in renal carcinoma,down-regulating MIF expression can significantly inhibit the renal cancer cell invasion,which might be related with inhibiting HIF-1α/MMP9 signaling pathway.

kidney neoplasms；macrophage migration inhibitory factor；invasion

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.35.001

內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金(2014MS0807)。

孫連桃(1972-)，副教授，碩士，主要從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)研究。

R737.11

A

1671-8348(2017)35-4897-04

2017-06-26

2017-09-12)