魚腥草是三百草科多年生草本植物,是國(guó)家衛(wèi)生部認(rèn)證的既是藥品、優(yōu)勢(shì)藥品的草藥,魚腥草的營(yíng)養(yǎng)、保健、藥用價(jià)值非??捎^,是珍貴的野生資源,有著非常廣泛的臨床應(yīng)用。揮發(fā)油是魚腥草的主要藥用成分,揮發(fā)油的抗菌活性是判斷其質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn),本文采取了不同時(shí)節(jié)不同部位魚腥草,測(cè)定其揮發(fā)油組分的抗菌活性,旨在為魚腥草的藥用部位提供科學(xué)依據(jù)。
(一)資料與方法
1.一般資料。選擇魚腥草的根狀莖作為繁殖材料,按照栽培技術(shù)的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)在栽培基地進(jìn)行培養(yǎng)。
2.試劑和儀器。試劑選用北京奧星生物技術(shù)責(zé)任有限公司提供的蛋白胨和酵母膏,上海久億化學(xué)試劑有限公司提供的吐溫-80。儀器由Shimadzu公司提供的Shimadzu 2010型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀、NIST107質(zhì)譜庫(kù),由鹽城玻璃儀器廠提供的揮發(fā)性油提取器,上海博訊公司提供的YXQ2LS250SI立式壓力蒸汽滅菌器,蘇州潔凈公司提供的CJ型平層流凈化工作臺(tái)。
3.研究方法
揮發(fā)油提取及測(cè)定含量。每月中旬進(jìn)行取樣,將采集的魚腥草分為根狀莖、地上莖、葉及花穗,將不同部位切碎后稱量裝入圓底燒瓶,加蒸餾水浸泡3h后,安裝蒸餾裝置加熱直至出現(xiàn)第1滴蒸餾后技術(shù),蒸餾速度控制在60滴/min,蒸餾2.5h后停止加熱,冷卻0.5h后,讀取揮發(fā)優(yōu)良,收集揮發(fā)油儲(chǔ)存。
抗菌活性測(cè)定。將供試菌活化培養(yǎng),用麥?zhǔn)媳葷嵋鹤鰧?duì)照,將火花的供試菌制備成濃度1.5X108CFU/mL菌懸液。揮發(fā)油抗菌制備:取各部位揮揮發(fā)油0.1ml加入裝有10mL無(wú)菌水的錐形瓶中,加入吐溫-80助溶,用無(wú)菌水稀釋得到抗菌液。藥敏紙片法:將圓形濾紙片放入揮發(fā)油抗菌液或加油等濃度的吐溫-80無(wú)菌水中浸泡,瀝干后置于0.2mmL菌懸液涂抹在培養(yǎng)基平板中。肉湯稀釋法:用二倍稀釋法制備4個(gè)濃度梯度揮發(fā)油抗菌有,然后在不同梯度的揮發(fā)油抗菌液中加入0.1mL菌懸液,置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。計(jì)數(shù)資料(n,%)與計(jì)量資料(`x±s);{采用SPSS16.0系統(tǒng)軟件統(tǒng)計(jì)分析資料;其中計(jì)量資料用(`x±s)表示,并用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用X2檢驗(yàn);P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
(二)結(jié)果
不同月份和不同部位魚腥草揮發(fā)油含量有較大差異,根狀莖的含量最大,莖、葉、花只有在特定月份才可檢測(cè)揮發(fā)油;花穗揮發(fā)油的俊獲刑最好,其次是葉、根狀莖,地上莖最差。見表1.
(三)討論
魚腥草藥材品質(zhì)與部位有密切關(guān)系,為了保證藥材品質(zhì),地上部分的采收季節(jié)在花果盛期前后,全草采集應(yīng)注意地下部分,夏末后地上部分開始衰老后要以地下部分為主。(作者單位為廣西梧州制藥(集團(tuán))股份有限公司)
作者簡(jiǎn)介:雷潔萍(1987-11),女,學(xué)歷:大學(xué)本科,工作單位:廣西梧州制藥(集團(tuán))股份有限公司,職位:質(zhì)量監(jiān)督員,職稱:助理工程師。