日糧中添加谷胱甘肽對虹鱒生長性能和抗氧化性能的影響

王藝， 孫國祥， 劉鷹， 楊修亮， 張旭， 王順奎

日糧中添加谷胱甘肽對虹鱒生長性能和抗氧化性能的影響

王藝1， 孫國祥2、3， 劉鷹1， 楊修亮3， 張旭3， 王順奎4

(1.大連海洋大學(xué)水產(chǎn)設(shè)施養(yǎng)殖與裝備工程技術(shù)研究中心，遼寧 大連116023；2.中國科學(xué)院海洋研究所，山東 青島266000；3.山東金城生物藥業(yè)有限公司，山東淄博255000；4.山東東方海洋科技股份有限公司，山東煙臺264003)

為研究日糧中添加谷胱甘肽對虹鱒Oncorhynchus mykiss生長性能和抗氧化性能的影響，選擇初始體質(zhì)量為 (718.3±36.3)g的虹鱒，分別投喂添加5種不同水平的谷胱甘肽飼料 (谷胱甘肽含量分別為0、100、200、400、600 mg/kg)，8周后觀測各組虹鱒的生長情況及機體抗氧化狀態(tài)。結(jié)果表明:虹鱒的增重率 (WGR)、特定生長率 (SGR)、日均攝食量 (AFI)隨著飼料中谷胱甘肽添加量的增加均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，且在添加量為200 mg/kg時達到最大值，并顯著高于其他各組 (P＜0.05)，而200 mg/kg組虹鱒的飼料系數(shù) (FCR)則顯著低于對照組 (P＜0.05)，且死亡率最低 (4.04%)；谷胱甘肽添加組虹鱒血清、肝臟中超氧化物歧化酶 (SOD)活性均升高，其中200 mg/kg組血清和肝臟中SOD顯著升高 (P＜0.05)；谷胱甘肽添加組虹鱒血清、肝臟和鰓絲中過氧化氫酶 (CAT)活性均高于對照組，且隨著谷胱甘肽添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其中200 mg/kg組血清和肝臟中CAT活性顯著高于對照組 (P＜0.05)；谷胱甘肽添加組虹鱒血清、肝臟和鰓絲中谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH)和谷胱甘肽還原酶 (GR)活性均高于對照組，且隨著谷胱甘肽添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，其中200 mg/kg組血清、肝臟和鰓絲中GSH和GR活性均顯著高于對照組 (P＜0.05)；谷胱甘肽添加組虹鱒血清、肝臟和鰓絲中丙二醛 (MDA)含量均低于對照組，但均無顯著性差異 (P＞0.05)，其中200 mg/kg組最低。研究表明，在循環(huán)水養(yǎng)殖模式下，飼料中添加適量谷胱甘肽能夠提高虹鱒的生長性能，降低飼料系數(shù)和死亡率，有助于緩解虹鱒養(yǎng)殖過程中的氧化應(yīng)激，提高抗氧化能力。

虹鱒；谷胱甘肽；生長；抗氧化性能

虹鱒Oncorhynchus mykiss隸屬于硬骨魚綱、鮭形目 Salmoniformes、鮭亞目 Salmonidei、鮭科 Salmonidae，屬冷水性魚類。虹鱒具有肉味鮮美、營養(yǎng)豐富、人工繁殖簡便等特點，目前已成為聯(lián)合國糧農(nóng)組織面向世界推廣的優(yōu)良水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。隨著現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，虹鱒養(yǎng)殖模式逐步由粗放型轉(zhuǎn)為集約化。這種養(yǎng)殖模式在提高水產(chǎn)品產(chǎn)量的同時，也存在負面效應(yīng)。由于養(yǎng)殖密度的增加，虹鱒等水產(chǎn)動物極易受到環(huán)境條件、飼料、投喂管理等方面的影響，進而導(dǎo)致應(yīng)激的產(chǎn)生，如密度脅迫應(yīng)激、水質(zhì)脅迫應(yīng)激、溫度應(yīng)激和運輸應(yīng)激等，嚴重影響了水產(chǎn)動物的生長[1]。其中，氧化應(yīng)激是所有應(yīng)激中最為重要的一種應(yīng)激方式，任何應(yīng)激均會形成氧化應(yīng)激，并對魚體造成一定程度的氧化損傷，從而降低魚體的生長速度[2]。目前，國內(nèi)關(guān)于利用免疫增強劑來提高魚體抗病機制等方面的研究還不夠深入。一般認為，通過營養(yǎng)調(diào)控來促進魚體生長，提高魚體抗氧化能力，是一種可行的方法[3－4]。

谷胱甘肽是由γ－谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸組成的天然生物活性肽，是生物機體內(nèi)重要的生物活性物質(zhì)。谷胱甘肽分為還原型和氧化型兩種，通常所指的谷胱甘肽為還原型谷胱甘肽[5]。谷胱甘肽不僅能及時清除細胞內(nèi)過量的氧自由基[6]，還具有提高酶活性[7]、保護肝臟細胞[8]、緩解神經(jīng)元興奮中毒[9]等許多生理功能。研究證明，谷胱甘肽可以影響牙鲆Paralichthys olivaceus[10]、草魚Ctenopharyngodon idellus[11]、凡納濱對蝦Litopenaeus vannamei[12－14]和羅非魚[15]的生長及抗氧化能力。近年來，谷胱甘肽在水產(chǎn)領(lǐng)域的應(yīng)用逐漸增多，已成為研究熱點。研究表明，谷胱甘肽可提高歐洲鱸Dicentrarchus labrax的生長性能，這是由于谷胱甘肽在一定程度上提高了鱸的蛋白酶活性和生長速度[16]；飼料中添加谷胱甘肽不僅能促進吉富羅非魚Oreochromis niloticus的生長，還能提高其肝臟抗氧化酶基因的表達量[17]；飼料中添加低劑量的谷胱甘肽可提高凡納濱對蝦生長性能，而添加高劑量的谷胱甘肽，對蝦的增重率反而有所下降[17]。

本研究中，擬選用谷胱甘肽作為抗氧化劑，以虹鱒Oncorhynchus mykiss為研究對象，通過在飼料中添加不同比例的谷胱甘肽，研究其對虹鱒生長和抗氧化性能的影響，旨在為深入闡述谷胱甘肽對魚類抗氧化功能的影響機制提供有益參考，也為虹鱒集約化養(yǎng)殖的氧化應(yīng)激預(yù)防提供數(shù)據(jù)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用虹鱒購自山東東方海洋科技股份有限公司。隨機挑選健康活潑、規(guī)格一致、體質(zhì)量為(718.3±36.3)g的虹鱒525尾。試驗期間，循環(huán)水系統(tǒng)水溫保持在 (15.0±1.0)℃，pH為 7.2～7.5，光照條件為12L∶12D，試驗過程中使用液氧增氧，溶解氧控制在 (8.5±1.0)mg/L。

1.2 方法

1.2.1 試驗飼料的配制 試驗用基礎(chǔ)飼料組成和營養(yǎng)水平見表1，粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量分別為43.09%和19.51%。本試驗中所用谷胱甘肽由山東金城生物藥業(yè)有限公司提供，分別在基礎(chǔ)飼料中添加100、200、400、600 mg/kg谷胱甘肽制作成試驗飼料備用。

1.2.2 試驗設(shè)計 正式試驗前，在循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中將試驗魚暫養(yǎng)14 d，每個水槽為1個養(yǎng)殖單位，容積為300 L，水流速度為1 L/min，投喂基礎(chǔ)飼料。正式試驗前，所有試驗魚停飼24 h并麻醉 (MS－222，40 mg/L)后稱重。將525尾虹鱒平均分配到15個試驗用循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中，試驗分為5組，每組設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)放35尾魚，分別于每天8:00、16:00飽食投喂。對照組飼喂基礎(chǔ)飼料，4個處理組分別投喂谷胱甘肽含量為100、200、400、600 mg/kg的試驗飼料，連續(xù)投喂56 d。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)成分 (風干基礎(chǔ))Tab.1 Ingredients and approximate compositions of the basal diet(air－dry basis)

1.2.3 樣品的采集與測定 養(yǎng)殖試驗結(jié)束后禁食24 h，從每個重復(fù)隨機選取3尾虹鱒，用5 mL潤洗過的無菌注射器尾靜脈取血，合并置于無菌Eppendorf管中，于冰箱 (4℃)中過夜后，以4000 r/min離心15 min，取上清液并分裝，與取得的肝臟和鰓絲樣品一起置于冰箱(－80℃)中保存?zhèn)溆谩?/p>

以超氧化物歧化酶 (SOD)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽還原酶 (GR)、谷胱甘肽過氧化物酶 (GSH)活性和丙二醛 (MAD)含量作為虹鱒血清、肝臟和鰓絲的抗氧化指標，參照南京建成生物工程研究所的試劑盒說明書測定。分別取肝臟和鰓絲稱重后，按質(zhì)量(mg)∶體積(mL)＝1∶9的比例勻漿介質(zhì)生理鹽水，在玻璃勻漿器皿中低溫勻漿，按照試劑盒上指標測定的要求調(diào)整離心轉(zhuǎn)速和時間，在4℃下離心后取上清液測定。

生長性能指標的計算公式為

增重率(WGR)＝(終末體質(zhì)量－初始體質(zhì)量)/初始體質(zhì)量×100%，

特定生長率(SGR)＝(ln終末體質(zhì)量－ln初始體質(zhì)量)/養(yǎng)殖時間×100%，

餌料系數(shù)(FCR)＝攝食量/(終末體質(zhì)量－初始體質(zhì)量)，

日均攝食量(AFI)＝日總攝食量/(處理魚尾數(shù)×試驗時間)，

死亡率(DR)＝死亡魚數(shù)/初始魚數(shù)×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件中的單因素方差分析 (One－way，ANOVA)進行處理，用 Tukey檢驗法進行組間多重比較。數(shù)據(jù)以平均值±標準差(mean±S.D.)表示，n＝3，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 虹鱒的生長性能

從表2可見:隨著谷胱甘肽添加量的增加，虹鱒的增重率、特定生長率、日均攝食量均呈先升高后降低的趨勢。其中，谷胱甘肽添加量為200 mg/kg時，測量的5個指標均與對照組有顯著性差異 (P＜0.05)，且虹鱒死亡率最低 (4.04%)。

表2 飼料中谷胱甘肽不同添加水平對虹鱒生長及飼料利用的影響Tab.2 Effects of dietary glutathione on the growth and feed conversion of rainbow trout Oncorhynchus mykiss

2.2 飼料中不同谷胱甘肽添加量下虹鱒血清抗氧化性能的變化

從表3可見:隨著谷胱甘肽添加量的增加，虹鱒血清中SOD、GSH、CAT、GR活性的變化趨勢一致，均呈先升高后降低的趨勢，對照組酶活性最低，200 mg/kg谷胱甘肽添加組酶活性最高；其中僅200 mg/kg谷胱甘肽添加組SOD活性以及200～600 mg/kg谷胱甘肽添加組CAT活性顯著高于對照組 (P＜0.05)，而不同添加量的谷胱甘肽對GSH、GR活性無顯著性影響 (P＞0.05)；不同添加量的谷胱甘肽對MDA含量也無顯著性影響 (P＞0.05)，其中對照組MDA含量最高，200 mg/kg谷胱甘肽添加組MDA含量最低。

表3 飼料中谷胱甘肽不同添加水平對虹鱒血清抗氧化酶活性和丙二醛含量的影響Tab.3 Effects of dietary glutathione on the activities of serum antioxidant enzymes and malondiadehyde contents of rainbow trout Oncorhynchus mykiss

2.3 飼料中不同谷胱甘肽添加量下虹鱒肝臟抗氧化性能的變化

從表4可見:隨著谷胱甘肽添加量的增加，虹鱒肝臟SOD、GSH、CAT、GR活性的變化趨勢一致，均呈先升高后降低的趨勢，對照組酶活性最低，200 mg/kg谷胱甘肽添加組酶活性最高；其中僅200 mg/kg谷胱甘肽添加組 SOD、CAT、GR活性以及400 mg/kg谷胱甘肽添加組SOD活性顯著高于對照組 (P＜0.05)，而不同添加量的谷胱甘肽對GSH活性無顯著性影響 (P＞0.05)；不同添加量的谷胱甘肽對MDA含量也無顯著性影響 (P＞0.05)，其中對照組MDA含量最高，200 mg/kg谷胱甘肽添加組MDA含量最低。

表4 飼料中不同谷胱甘肽添加水平對虹鱒肝臟抗氧化酶活性和丙二醛含量的影響Tab.4 Effect of dietary glutathione level on the activities of hepatic antioxidant enzymes and malondiadehyde contents of rainbow trout Oncorhynchus mykiss

2.4 飼料中不同谷胱甘肽添加量下虹鱒鰓絲抗氧化性能的變化

從表5可見:隨著谷胱甘肽添加量的增加，虹鱒鰓絲SOD活性呈先降低后升高再降低的趨勢，100 mg/kg谷胱甘肽添加組的SOD活性最低，200 mg/kg谷胱甘肽添加組的SOD活性最高；而GSH、CAT、GR活性的變化趨勢一致，均呈先升高后降低的趨勢，對照組 GSH、CAT活性最低，200 mg/kg谷胱甘肽添加組GSH、CAT活性最高；其中僅200 mg/kg谷胱甘肽添加組 GSH、GR活性顯著高于對照組 (P＜0.05)，而不同添加量的谷胱甘肽對SOD、CAT活性無顯著性影響 (P＞0.05)；不同添加量的谷胱甘肽對MDA含量也無顯著性影響(P＞0.05)，其中對照組 MDA含量最高，200 mg/kg谷胱甘肽添加組MDA含量最低。

表5 飼料中不同谷胱甘肽添加水平對虹鱒鰓絲抗氧化酶活性和丙二醛含量的影響Tab.5 Effect of dietary reduced glutathione on the activities of gill filament antioxidant enzymes and malondiadehyde contents of rainbow trout Oncorhynchus mykiss

3 討論

3.1 谷胱甘肽對虹鱒生長性能的影響

本研究中添加適量的谷胱甘肽能顯著提高虹鱒的增重率、特定生長率和日均攝食量，同時能降低飼料系數(shù)和死亡率，表明谷胱甘肽可提高虹鱒的生長性能。這一結(jié)果與劉曉華等[13]對凡納濱對蝦以及周婷婷等[17]對吉富羅非魚中的研究結(jié)果類似。目前，關(guān)于谷胱甘肽促進水產(chǎn)動物生長的內(nèi)在機制研究較為缺乏。有研究指出，谷胱甘肽能夠促進水產(chǎn)魚類細胞RNA的表達，進而有助于蛋白質(zhì)的合成，從而促進水產(chǎn)動物的生長[18]。也有報道指出，谷胱甘肽可提高血清中與生長有關(guān)的胰島素樣生長因子－Ⅰ (IGF－Ⅰ)水平，而IGF－Ⅰ是介導(dǎo)生長激素促生長效應(yīng)的主要因子，其可以促進細胞有絲分裂以及細胞和組織的生長代謝，因而外援性增加谷胱甘肽可以促進羅非魚的生長[19]。王芳倩等[10]研究認為，谷胱甘肽組成中含有半胱氨酸，其脫羧產(chǎn)物半胱胺可以破壞生長抑制素分子的二硫鍵，使其喪失生物學(xué)功能，促進生長激素的分泌，從而促進了魚體的生長。這一結(jié)論在對草魚的研究中亦得到證實[11]，且與對凡納濱對蝦[13]和吉富羅非魚[20]的研究結(jié)果一致。由此推測，谷胱甘肽可能是通過影響與生長有關(guān)的激素水平來促進虹鱒的生長，其具體作用機制有待于進一步探索。

本試驗結(jié)果同樣表明，日糧中添加谷胱甘肽能在一定程度上降低虹鱒的死亡率，這可能與魚體的抗氧化能力有關(guān)。氧自由基會引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，生成脂質(zhì)過氧化物，脂質(zhì)過氧化物會導(dǎo)致細胞代謝功能障礙，嚴重則導(dǎo)致死亡[21－22]。本試驗中谷胱甘肽能夠?qū)琪V的抗氧化能力產(chǎn)生積極影響，分析其原因，說明谷胱甘肽對虹鱒魚體具有生長和抗氧化等方面的積極調(diào)節(jié)作用，因而可以降低死亡率。

3.2 谷胱甘肽對虹鱒抗氧化性能的影響

氧自由基的產(chǎn)生與水產(chǎn)動物的健康狀況具有十分密切的聯(lián)系[23]。SOD、CAT、GR等有清除氧自由基的作用[24]，是機體內(nèi)與谷胱甘肽相關(guān)的抗氧化酶，因此，這幾種酶的活性通常用來反映機體自由基的動態(tài)變化[22，25－26]。 SOD 可以催化超氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)，生成過氧化氫和氧氣，從而降低組織中超氧陰離子含量，是一種重要的抗氧化酶，其活性能夠反映氧自由基的代謝情況[27－29]。動物體內(nèi)過氧化氫濃度較高時，需要CAT來消除其毒性[30]，將過氧化氫分解為水和氧氣，從而使細胞免受過氧化氫的毒害[31－32]。GR能夠催化氧化型谷胱甘肽 (GSSG)還原為GSH，而GSH可以使含有巰基的酶保持活性，從而維持細胞膜的完整性[33]。氧自由基能夠?qū)е轮|(zhì)過氧化，MDA是自由基脂質(zhì)過氧化損傷的最終分解產(chǎn)物之一，能夠引起蛋白質(zhì)等生物大分子的交聯(lián)聚合，且具有細胞毒性，其含量的多少能夠直接反映脂質(zhì)過氧化的程度，也能夠反映自由基對機體的損傷程度[34－35]。

本試驗結(jié)果顯示，谷胱甘肽添加組虹鱒血清SOD、CAT、GSH和GR活性較對照組升高，且隨添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。在周婷婷等[17]的研究中，血清與肝臟SOD的活性同樣隨添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。推測可能是因為外源性的谷胱甘肽降低了氧自由基對機體的損傷，減輕了虹鱒的抗氧化應(yīng)激[36]。而在王芳倩[10]對牙鲆的研究中，SOD的活性未受到飼料中谷胱甘肽添加量的影響，推測谷胱甘肽對SOD活性的影響與飼養(yǎng)對象的不同也有關(guān)，具體作用機制有待進一步研究。周婷婷等[17]對吉富羅非魚的試驗顯示，隨著谷胱甘肽添加量的增加，羅非魚血清和肝臟中CAT的活性均呈先升高后降低的趨勢，作者推測，CAT可以清除機體內(nèi)的過氧化氫，使細胞免受其毒害，CAT活性發(fā)生變化是因為體內(nèi)的抗氧化物酶系統(tǒng)被激活了。本研究中，虹鱒血清CAT總體活性高于對照組，推測是由于添加適量的谷胱甘肽可以調(diào)節(jié)機體的抗氧化狀態(tài)，降低細胞中過氧化氫的濃度，減輕細胞的損傷程度。本試驗中，虹鱒血清中的GSH和GR活性均高于對照組，推測是外源性谷胱甘肽對虹鱒體內(nèi)與谷胱甘肽有關(guān)的反應(yīng)和代謝有一定的促進作用，使得谷胱甘肽的需要量增多，因而能夠?qū)SSG轉(zhuǎn)化為GSH的GR活性也相應(yīng)的增強[17，33]。本試驗結(jié)果顯示，谷胱甘肽添加組MDA含量均低于對照組，且隨著谷胱甘肽添加量的增加，MDA含量呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，且外源性谷胱甘肽對MDA含量無顯著影響，與梁春梅[37]的研究結(jié)果一致。推測得到本試驗結(jié)果的原因是適量的谷胱甘肽可以降低脂質(zhì)過氧化反應(yīng)對細胞的毒害作用，以減輕細胞損傷程度，其具體作用機制還有待深入研究。

本試驗中肝臟抗氧化酶活性結(jié)果顯示，谷胱甘肽添加組虹鱒肝臟SOD活性均升高，且隨添加量的增加呈先升高后降低的趨勢。說明外源性的谷胱甘肽降低了細胞內(nèi)氧自由基的含量，這與在血清中的試驗結(jié)果一致。同時，肝臟CAT活性均高于對照組，且隨著谷胱甘肽添加量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，這與血清中CAT的試驗結(jié)果相一致，并與Mourente等[38]的研究結(jié)果一致。焦彩虹[39]研究發(fā)現(xiàn)，飼料中添加一定量的谷胱甘肽可以提高奧尼羅非魚血清和肝臟中GR活性。朱選等[24]也發(fā)現(xiàn)，當飼料中添加400 mg/kg的谷胱甘肽時，草魚肝胰臟中GR活性顯著高于對照組。本試驗中，200 mg/kg谷胱甘肽添加組虹鱒肝臟中的GSH和GR活性顯著高于對照組，推測與血清中GSH和GR活性升高的原因相似，外源性谷胱甘肽能夠促進對虹鱒體內(nèi)與谷胱甘肽有關(guān)的代謝反應(yīng)，從而使GSSG轉(zhuǎn)化為GSH的GR活性增強，以滿足谷胱甘肽的需要量的增多[17，33]。各添加組肝臟MDA含量與血清MDA含量變化保持一致，均隨谷胱甘肽添加量的增加先降低后升高，進一步說明適量的谷胱甘肽能夠減輕細胞損傷程度。

本試驗中鰓絲抗氧化酶活性結(jié)果顯示，虹鱒鰓絲中谷胱甘肽添加組SOD、CAT、GSH和GR活性較對照組有所升高，但僅200 mg/kg組的GSH和GR活性顯著高于對照組。GR在機體內(nèi)的主要作用是催化GSSG還原為GSH，從而維持GSH/GSSG的平衡。王芳倩等[10]的試驗結(jié)果表明，外源性谷胱甘肽能夠輔助維持魚體內(nèi)GSH/GSSG的平衡，GSH由內(nèi)源性GSSG轉(zhuǎn)化。這也與本試驗中GSH和GR活性在血清和肝臟中的試驗結(jié)果一致。

綜上所述，添加適量的谷胱甘肽不僅能夠提高虹鱒的增重率、特定生長率，降低餌料系數(shù)和死亡率，且有助于緩解虹鱒養(yǎng)殖過程中的氧化應(yīng)激。在循環(huán)水養(yǎng)殖模式下，體質(zhì)量約718.3 g的虹鱒飼料中谷胱甘肽的適宜添加量為200 mg/kg。

[1] 方允中，楊勝，伍國耀.自由基、抗氧化劑、營養(yǎng)素與健康的關(guān)系[J].營養(yǎng)學(xué)報，2003，25(4):337－343.

[2] 劉波.高溫應(yīng)激與大黃蒽醌提取物對團頭魴生理反應(yīng)及相關(guān)應(yīng)激蛋白表達的影響[D].南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[3] 麥康森，艾慶輝.水產(chǎn)養(yǎng)殖中的環(huán)境脅迫及其預(yù)防——營養(yǎng)學(xué)途徑[C]//中國水產(chǎn)學(xué)會2003年學(xué)術(shù)年會.北京:中國水產(chǎn)學(xué)會，2003:767－774.

[4] 王荻，劉紅柏，羅添允.中草藥與益生菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中協(xié)同作用的研究進展[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報，2016，31(5):583－588.

[5] 江潔，單立峰.谷胱甘肽的制備及其應(yīng)用[J].飼料工業(yè)，2007，28(15):15－17.

[6] Ceriello A.Hyperglycaemia:the bridge between non－enzymatic glycation and oxidative stress in the pathogenesis of diabetic complications[J].Diabetes，Nutrition ＆ Metabolism，1999，12(1):42－46.

[7] 賈貞，王丹，游松.谷胱甘肽的研究進展[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2009，26(3):238－242.

[8] Ponsoda X，Bort R，Jover R，et al.Increased toxicity of cocaine on human hepatocytes induced by ethanol:role of GSH[J].Biochemical Pharmacology，1999，58(10):1579－1585.

[9] Raghunathan V K，Ellis E M，Tettey J N A，et al.Involvement of reduced glutathione and glutathione reductase in the chronic toxicity of hexavalent chromium to monocytes in vitro[J].Toxicology，2007，231(2－3):105－106.

[10] 王芳倩，張文兵，麥康森，等.飼料中添加還原型谷胱甘肽對牙鲆生長和抗氧化能力的影響[J].中國海洋大學(xué)學(xué)報，2011，41(4):51－56.

[11] 趙紅霞，譚永剛，周萌，等.飼料中添加谷胱甘肽對草魚生長、生理指標和抗病力的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2007，14(4):678－683.

[12] 曹俊明，劉曉華，周萌，等.飼料中添加谷胱甘肽對凡納濱對蝦非特異性免疫因子和相關(guān)酶活性的影響[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，26(4):528－532.

[13] 劉曉華，曹俊明，吳建開，等.飼料中添加谷胱甘肽對凡納濱對蝦肝胰腺抗氧化指標和脂質(zhì)過氧化物含量的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報，2007，31(2):235－240.

[14] Vincenzini M T，F(xiàn)avilli F，Iantomasi T.Intestinal uptake and transmembrane transport systems of intact GSH:characteristics and possible biological role[J].Biochimica et Biophysica Acta(BBA)－Reviews on Biomembranes，1992，1113(1):13－23.

[15] 張國良，趙會宏，周志偉，等.還原型谷胱甘肽對羅非魚生長和抗氧化性能的影響[J].華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，28(3):90－93.

[16] Infante J L Z，Cahu C L，Peres A.Partial substitution of di－ and tripeptides for native proteins in sea bass diet improves Dicentrarchus labrax larval development[J].The Journal of Nutrition，1997，127(4):608－614.

[17] 周婷婷，曹俊明，黃燕華，等.飼料中添加谷胱甘肽對吉富羅非魚肝臟生長及抗氧化相關(guān)基因mRNA表達量的影響[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，39(14):146－149.

[18] 梁萌青，王成剛，陳超，等.幾種添加劑對紅鰭東方鲀的促生長效果與RNA/DNA關(guān)系[J].海洋水產(chǎn)研究，2001，22(2):38－41.

[19] Chen J Y，Chen J C，Chang Chiyao，et al.Expression of recombinant tilapia insulin－like growth factor－I and stimulation of juvenile tilapia growth by injection of recombinant IGFs polypeptides[J].Aquaculture，2000，181(3－4):347－360.

[20] Xiao Dong，Lin Haoran.Effects of cysteamine—a somatostatin－inhibiting agent—on serum growth hormone levels and growth in juvenile grass carp(Ctenopharyngodon idellus)[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Molecular＆Integrative Physiology，2003，134(1):93－99

[21] Di Giulio R T D，Washburn P C，Wenning R J，et al.Biochemical responses in aquatic animals:a review of determinants of oxidative stress[J].Environmental Toxicology and Chemistry， 1989， 8(12):1103－1123.

[22] Rudneva I I.Blood antioxidant system of Black Sea elasmobranch and teleost[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part C:Pharmacology， Toxicology and Endocrinology， 1997， 118(2):255－260.

[23] Winston G W.Oxidants and antioxidants in aquatic animals[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part C:Comparative Pharmacology，1991，100(1－2):173－176.

[24] 朱選，曹俊明，趙紅霞，等.飼料中添加谷胱甘肽對草魚組織中谷胱甘肽沉積和抗氧化能力的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2008，15(1):160－166.

[25] Mourente G，Tocher D R，Diaz E，et al.Relationships between antioxidants，antioxidant enzyme activities and lipid peroxidation products during early development in Dentex dentex eggs and larvae[J].Aquaculture，1999，179(1－4):309－324.

[26] Trenzado C，Hidalgo M C，García－Gallego M，et al.Antioxidant enzymes and lipid peroxidation in sturgeon Acipenser naccarii and trout Oncorhynchus mykiss.A comparative study[J].Aquaculture，2006，254(1－4):758－767.

[27] Campa－Córdova A I，Hernández－Saavedra N Y，De Philippis R，et al.Generation of superoxide anion and SOD activity in haemocytes and muscle of American white shrimp(Litopenaeus vannamei)as a response to β－glucan and sulphated polysaccharide[J].Fish ＆ Shellfish Immunology，2002，12(4):353－366.

[28] 張欣.超氧化物歧化酶(SOD)及其研究進展[J].內(nèi)蒙古石油化工，2010，36(16):14－15.

[29] Li Zhihua，Xie Song，Wang Junxia，et al.Effect of intermittent starvation on growth and some antioxidant indexes of Macrobrachium nipponense(De Haan)[J].Aquaculture Research，2009，40(5):526－532.

[30] Hunt C R，Sim J E，Sullivan S J，et al.Genomic instability and catalase gene amplification induced by chronic exposure to oxidative stress[J].Cancer Research，1998，58(17):3986－3992.

[31] David M，Munaswamy V，Halappa R，et al.Impact of sodium cyanide on catalase activity in the freshwater exotic carp，Cyprinus carpio(Linnaeus)[J].Pesticide Biochemistry and Physiology，2008，92(1):15－18.

[32] 孟令麗，梁成云，楊彥飛，等.維生素E對不同飼喂時期延邊黃牛血清維生素E含量及抗氧化酶的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2009(6):40－41.

[33] 儲霞玲.硒和谷胱甘肽聯(lián)合作用對凡納濱對蝦生長及抗氧化功能的影響[D].廣州:中山大學(xué)，2009.

[34] 陳漢，王慧君，李學(xué)鋒，等.甲基苯丙胺對大鼠腦組織中NO，SOD和MDA的影響[J].中國藥物依賴性雜志，2007，16(2):102－104.

[35] Pellerin－Massicotte J.Oxidative processes as indicators of chemical stress in marine bivalves[J].Journal of Aquatic Ecosystem Health，1994，3(2):101－111.

[36] Pe?a－Llopis S，Pe?a J B，Sancho E，et al.Glutathione－dependent resistance of the European eel Anguilla anguilla to the herbicide molinate[J].Chemosphere，2001，45(4－5):671－681.

[37] 梁春梅.還原型谷胱甘肽對奧尼羅非魚(Oreochromis niloticus×O.aureus)幼魚生長、免疫功能的影響及其機理研究[D].廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

[38] Mourente G，DíAz－Salvago E，Bell J G，et al.Increased activities of hepatic antioxidant defence enzymes in juvenile gilthead sea bream(Sparus aurata L.)fed dietary oxidised oil:attenuation by dietary vitamin E[J].Aquaculture，2002，214(1－4):343－361.

[39] 焦彩虹.谷胱甘肽對羅非魚生長的影響及其機理研究[D].廣州:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2004.

Effects of dietary glutathione on growth and anti－oxidative capability of rainbow trout Oncorhynchus mykiss

WANG Yi1， SUN Guo－xiang2、3， LIU Ying1， YANG Xiu－liang3， ZHANG Xu3， WANG Shun－kui4
(1.Aquacultural Engineering Research ＆ Development Center， Dalian Ocean University， Dalian 116023， China； 2.Institute of Oceanology， Chinese A-cademy of Sciences， Qingdao 266000， China； 3.Shandong Jincheng Biological Pharmaceutical Company Limited， Zibo 255000， China； 4.Shandong Oriental Ocean Company Limited， Yantai 264003， China)

The rainbow trout Oncorhynchus mykiss with initial body weight of(718.3±36.3)g were reared in a recycling water system and fed diets containing glutathione(GSH)at a rate of 0，100，200，400 and 600 mg/kg at water temperature of(15.0±1.0)℃ for 8 weeks to investigate the effects of dietary glutathione on the growth performance and antioxidant ability and resistance to nitrite exposure in rainbow trout.The results showed that average weight gain rate(WGR)，specific growth rate(SGR)and food intake(FI)were found to be elevated first and then declined with increase in dietary SGR level，the maximum in the fish fed the diet containing 200 mg/kg of GSH and significantly higher than those in other groups(p＜0.05).There was significantly lower food conversion ratio in 200 mg/kg group than in other groups(p＜0.05)， with the minimal mortality rate(4.04%).The gill filament and serum superoxide dismutase(SOD)activities in GSH－fed fish were higher than those in the control group，significantly higher serum and hepatic SOD activities in 200 mg/kg GSH groups.The gill filament，serum and hepatic catalase(CAT)activities were higher in GSH－fed fish than those in the control group， increase first and then decrease with elevated dietary GSH level， significantly higher serum and hepatic CAT activities in 200 mg/kg GSH groups(p＜0.05).There were significantly lower malondialdehyde(MDA)levels in serum，liver and gill filament in GSH－fed fish than those in the control group， without significant difference(P＞0.05)， and the minimum in the fish fed the diet containing GSH at a rate of 200 mg/kg.The findings indicate that supplementation of suitable amount of glutathione leads to improve the growth and antioxidant capacity of rainbow trout.

Oncorhynchus mykiss； glutathione； growth； anti－oxidative capability

S963

A

10.16535/j.cnki.dlhyxb.2017.06.003

2095－1388(2017)06－0651－07

2017－04－14

國家自然科學(xué)基金資助項目 (31472312，31672673)；江蘇省重點研發(fā)計劃項目 (BE2015325)；青島市博士后啟動基金資助項目(Y6KY06106N)

王藝 (1993—)，女，碩士研究生。E－mail:wxxfbxvip＠163.com

劉鷹 (1970—)，男，博士，研究員。E－mail:yingliu＠dlou.edu.cn