苦參止痢顆粒的藥效作用研究

邢玉娟，高亞軍，秦俊杰，朱 浩，侯曉礁，王秀敏

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院,江蘇泰州 225300；2.北京生泰爾科技股份有限公司，北京 102600；3.北京市中獸藥工程技術研究中心，北京 102600)

苦參止痢顆粒的藥效作用研究

邢玉娟1，高亞軍2,3，秦俊杰2,3，朱 浩2,3，侯曉礁2,3，王秀敏2,3

(1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學院,江蘇泰州 225300；2.北京生泰爾科技股份有限公司，北京 102600；3.北京市中獸藥工程技術研究中心，北京 102600)

通過小鼠胃腸蠕動試驗、小鼠腹瀉試驗、抗炎試驗和鎮(zhèn)痛試驗，考察苦參止痢顆粒的藥效作用。結果表明，與空白對照組相比，苦參止痢顆粒可顯著降低蓖麻油所致小鼠的腹瀉次數(shù)(P<0.01)，對正常小鼠胃排空作用有顯著的抑制作用(P<0.01)，可顯著降低二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹率(P<0.01)，顯著提高小鼠耐熱痛閾值(P<0.01)。說明苦參止痢顆粒具有止瀉、調(diào)節(jié)胃腸蠕動、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用。

苦參止痢顆粒；胃腸蠕動；腹瀉；抗炎；鎮(zhèn)痛

仔豬白痢是由致病性大腸桿菌引起的仔豬常見腸道傳染病，本病常發(fā)生于10～30日齡的仔豬。該病流行廣，傳播快，發(fā)病率高，雖死亡率較低，但如不及時治療或治療不當，輕者影響仔豬生長發(fā)育，嚴重者會成為僵豬而遭淘汰，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失。該病目前主要使用抗生素進行治療，但隨著耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，現(xiàn)有藥物使用效果往往欠佳，并給環(huán)境和食品安全帶來壓力。中藥在抗菌同時具有改善和調(diào)節(jié)機體狀態(tài)的特性，因此，利用我國特有的中醫(yī)理論和豐富的中藥資源[1-2]，開發(fā)治療仔豬白痢的中獸藥制劑具有廣闊的市場前景。

苦參止痢顆粒是由苦參、白芍、木香三味中藥制備而成。方中苦參[3-4]清熱燥濕、利水，主治濕熱瀉痢為君藥；白芍[5]養(yǎng)血斂陰、平肝止痛，主治瀉痢、腹痛為臣藥；木香[6]行氣止痛、健脾消食與和胃止瀉，主治胃腸氣滯、食積肚脹、瀉痢后重及腹痛為佐使藥。本研究通過小鼠腹瀉試驗、小鼠胃腸蠕動試驗、小鼠抗炎試驗和小鼠鎮(zhèn)痛試驗全面評價苦參止痢顆粒的藥效作用[7-12]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗藥品 苦參止痢顆粒，由愛迪森(北京)生物科技有限公司提供，批號：150418；莧菜黃連素膠囊，購自福州海王金象中藥制藥有限公司，批號：1606173；阿司匹林泡騰片，購自阿斯利康制藥有限公司，批號：1605281；二甲苯，購自北京西隴化工有限公司，批號：20160815。

1.1.2 試驗器材 PL1001-L精密天平，瑞士梅特勒-托利多公司；數(shù)顯恒溫水浴鍋，江蘇榮華儀器制造有限公司；打孔器；灌胃器；直尺等。

1.1.3 試驗動物及管理 健康清潔級昆明小鼠，20 g±2 g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號：SCXK(京)2009-0004。分籠飼養(yǎng)，自由飲水，顆粒飼料喂養(yǎng)。

1.2 方法

1.2.1 半固體糊的制備 取10 g羧甲基纖維素鈉(CMC)，溶于250 mL蒸餾水中，分別加入16 g奶粉、8 g糖、8 g淀粉和2 g活性炭末，攪拌均勻。配置成300 mL約300 g的黑色半固體糊狀物。冰箱冷藏，用時恢復至室溫。

1.2.2 小鼠腹瀉試驗 取50只小鼠分為5組，每組10只，雌雄各半?？鄥⒅沽☆w粒高、中、低劑量組，分別按2 g/kg，0.2 mL/10 g體重、1 g/kg，0.2 mL/10 g體重和0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服苦參止痢顆粒水溶液；陽性藥物組，按照1 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服莧菜黃連素膠囊(去殼)水溶液；空白對照組灌服同體積的生理鹽水。每日灌胃1次，連續(xù)3 d。末次給藥前禁食不禁水12 h，末次給藥30 min后，每只小鼠小鼠灌服蓖麻油0.3 mL，然后將每只小鼠單獨放于鋪有吸水紙的鼠籠內(nèi)，每隔2 h換墊紙1次。以墊紙上濕糞多少表示腹瀉次數(shù)(濕糞指近似圓形的糊狀軟糞，在墊紙上出現(xiàn)棕色環(huán)帶)，分別統(tǒng)計0～2 h，2～4 h兩個時間段內(nèi)腹瀉次數(shù)及4 h內(nèi)腹瀉累計次數(shù)。

1.2.3 胃腸蠕動試驗 取40只小鼠分為4組，每組10只，雌雄各半?？鄥⒅沽☆w粒高、中、低劑量組，分別按2 g/kg，0.2 mL/10 g體重、1 g/kg，0.2 mL/10 g體重和0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服苦參止痢顆粒水溶液；空白對照組灌服同體積的生理鹽。每日灌胃1次，連續(xù)3 d。于末次給藥前小鼠禁食不禁水18 h，末次給藥后1 h灌胃給予半固體糊，每只0.8 mL。30 min后脫頸處死小鼠，開腹，結扎胃賁門和幽門，取胃，用濾紙拭干后稱全重，然后沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后拭干，稱凈重。以胃全重和胃凈重的差值為胃內(nèi)殘留物重，計算胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊重量的百分比為胃內(nèi)殘留率。同時迅速取出小腸，輕輕剝離腸系膜后將小腸拉成直線，測量幽門至回盲部的小腸全長及幽門至黑色半固體糊前沿的距離。以幽門至黑色半固體糊前沿的距離占幽門至回盲部全長的百分率為小腸推進率。

胃殘留率=胃內(nèi)殘留半固體糊/灌服總半固體糊重×100%

小腸推進率=半固體糊推進長度/小腸總長度×100%

1.2.4 抗炎試驗 取50只小鼠分為5組，每組10只，雌雄各半?？鄥⒅沽☆w粒高、中、低劑量組，分別按2 g/kg，0.2 mL/10 g體重、1 g/kg，0.2 mL/10 g體重和0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服苦參止痢顆粒水溶液；陽性藥物組，按照0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服阿司匹林泡騰片水溶液；空白對照組灌服同體積的生理鹽水，每日灌胃1次，連續(xù)3 d。末次給藥1 h后各組小鼠右耳雙面涂二甲苯50 μL致炎，左耳作對照，1 h后脫頸椎處死，沿耳廓基部剪下兩耳，用直徑6 mm打孔器取下相同部位耳片，于分析天平上立即稱量，以左、右耳廓圓片質(zhì)量之差作為腫脹度，并計算小鼠耳廓腫脹率及抑腫率。

腫脹率=(右耳片質(zhì)量-左耳片質(zhì)量)/左耳片質(zhì)量×100%

抑腫率=(空白組耳廓腫脹度-給藥組耳廓腫脹度)/空白組耳廓腫脹度×100%

1.2.5 鎮(zhèn)痛試驗 將恒溫水浴鍋加熱到55±0.5℃，燒杯的底部接觸水面，加熱后作為熱板刺激，用秒表記錄小鼠自投入燒杯至出現(xiàn)舔后足的時間，作為該鼠的痛閾值。取體重18～22 g的雌性小鼠，預先測定每只小鼠的正常痛閾值，凡舔足時間小于5 s大于30 s的跳躍者棄之不用，測兩次取其平均值。選出50只小鼠，隨機分為5組，苦參止痢顆粒高、中、低劑量組，分別按2 g/kg，0.2 mL/10 g體重、1 g/kg，0.2 mL/10 g體重和0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服苦參止痢顆粒水溶液；陽性藥物組，按照0.5 g/kg，0.2 mL/10 g體重的劑量灌服阿司匹林泡騰片水溶液；空白對照組灌服同體積的生理鹽水。每日灌胃1次，連續(xù)3 d。末次給藥1 h后，測量各組小鼠痛閾值，若60 s仍無反應，將小鼠取出，以免燙傷，其痛閾值以60 s計算。各組小鼠測量3次，每次間隔15 min，最后計算其平均值。

2 結果

2.1 對蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響

由表1可知，在試驗的第0～2 h，苦參止痢顆粒各劑量組和莧菜黃連素組與空白對照組相比均可極顯著降低小鼠的腹瀉次數(shù)(P<0.01)。在試驗的第2～4 h，由于蓖麻油的致瀉作用減弱，各組間并未體現(xiàn)相應的差異性(P>0.05)。對4 h的累積結果統(tǒng)計表明，苦參止痢顆粒和莧菜黃連素均可顯著降低小鼠的腹瀉次數(shù)，且苦參止痢顆粒低劑量組的作用效果稍弱，但與空白對照組相比差異仍具顯著性(P<0.05)。

2.2 對小鼠胃腸蠕動的影響

由表2可知，苦參止痢顆粒灌胃給藥后能極顯著(P<0.01)提高小鼠胃內(nèi)殘留率，表明該藥可抑制正常小鼠胃排空作用；同時該產(chǎn)品對減慢小腸推進速率具有一定的作用。

2.3 對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

由表3可知，阿司匹林和高劑量的苦參止痢顆?？蓸O顯著降低二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹率(P<0.01)，中低劑量的苦參止痢顆粒抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的作用稍弱，但與空白對照組相比差異仍具有顯著性(P<0.05)。

2.4 對小鼠耐熱痛閾值的影響

由表4中可知，與空白對照組相比，3次的測定結果均表明苦參止痢顆粒和阿司匹林均能顯著延長小鼠舔足反應時間(P<0.05)；測量平均值顯示，苦參止痢顆粒中、高劑量組和阿司匹林組均能極顯著延長舔足反應時間(P<0.01)，低劑量組亦能顯著延長舔足反應時間(P<0.05)。

表1 苦參止痢顆粒對蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響

注：同一列小寫字母不同，表示差異顯著(P<0.05)；同一列大寫字母不同，表示差異極顯著(P<0.01)。

Note:In the same column,values with different small letters mean significant difference (P<0.05); while with different capital letters mean extremely significant difference (P<0.01).

表2 苦參止痢顆粒對小鼠胃排空和腸推進的影響

注：同一列小寫字母不同，表示差異顯著(P<0.05)；同一列大寫字母不同，表示差異極顯著(P<0.01)。

Note:In the same column,values with different small letters mean significant difference (P<0.05); while with different capital letters mean extremely significant difference (P<0.01).

表3 苦參止痢顆粒對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

注：同一列小寫字母不同，表示差異顯著(P<0.05)；同一列大寫字母不同，表示差異極顯著(P<0.01)。

Note:In the same column,values with different small letters mean significant difference (P<0.05); while with different capital letters mean extremely significant difference (P<0.01).

3 討論

本研究以苦參止痢顆粒為試驗藥物，開展了小鼠腹瀉試驗、小鼠胃腸蠕動試驗、小鼠抗炎試驗、小鼠鎮(zhèn)痛試驗，試驗結果表明，苦參止痢顆?？娠@著降低蓖麻油所致小鼠的腹瀉次數(shù)，抑制正常小鼠胃排空作用，降低二甲苯所致小鼠耳廓的腫脹率，提高小鼠耐熱痛閾值。因此，苦參止痢顆粒具有很好的止瀉、調(diào)節(jié)胃腸蠕動、抗炎、鎮(zhèn)痛等作用效果，該研究為臨床合理使用該藥物提供參考依據(jù)。

表4 苦參止痢顆粒對小鼠耐熱痛閾值的影響

注：同一列小寫字母不同，表示差異顯著(P<0.05)；同一列大寫字母不同，表示差異極顯著(P<0.01)。

Note:In the same column,values with different small letters mean significant difference (P<0.05); while with different capital letters mean extremely significant difference (P<0.01).

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StudyonPharmacodynamicsofRadixSophoraeFlavescentisGranule

XING Yu-juan1,GAO Ya-jun2,3,QIN Jun-jie2,3,ZHU Hao2,3,HOU Xiao-jiao2,3,WANG Xiu-min2,3

(1.JiangsuAgri-animalHusbandryVocationalCollege,Taizhou,Jiangsu，225300，China; 2.BeijingCentreBiologyCo.,Ltd,Beijing,102600，China； 3.BeijingEngineeringResearchCenterforChineseTraditionalVeterinaryMedicine,Beijing,102600，China)

In order to understand the pharmacodynamic action of Radix Sophorae Flavescentis granule through the mouse gastrointestinal peristalsis test,the mouse diarrhea test,the anti-inflammatory test and the analgesic test,the pharmacodynamic action of Radix Sophorae Flavescentis granule was studied.The results showed that compared with the blank control group,Radix Sophorae Flavescentis granule could significantly reduce the number of diarrhea in mice induced by castor oil (P<0.01),there was a significant inhibitory effect on gastric emptying in normal mice (P<0.01),the swelling rate of mouse auricles induced by xylene was significantly decreased (P<0.01),and significantly increase the threshold of heat tolerance pain in mice (P<0.01).Radix Sophorae Flavescentis granule has the effect of relieving diarrhea,regulating gastrointestinal peristalsis,resisting inflammation and relieving pain.

Radix Sophorae Flavescentis; mouse gastrointestinal peristalsis test; mouse diarrhea test; anti-inflammatory test; analgesia test

2017-06-15

邢玉娟(1964-)，女，山東濟南人，副教授，主要從事動醫(yī)臨床教學與實踐工作。

S853.7

A

1007-5038(2017)12-0091-04