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    梔子厚樸湯對小鼠抗抑郁作用研究

    2017-12-26 02:22:32初云海來杰賈靜麗國紫薇田明
    中醫(yī)藥學報 2017年6期
    關鍵詞:利血平梔子抗抑郁

    初云海,來杰,賈靜麗,國紫薇,田明*

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150040;2.黑龍江省食品藥品檢驗所,黑龍江 哈爾濱 150088;3.黑龍江中醫(yī)藥大學,黑龍江 哈爾濱 150040)

    梔子厚樸湯對小鼠抗抑郁作用研究

    初云海1,來杰2,賈靜麗3,國紫薇3,田明3*

    (1.黑龍江中醫(yī)藥大學第一附屬醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150040;2.黑龍江省食品藥品檢驗所,黑龍江 哈爾濱 150088;3.黑龍江中醫(yī)藥大學,黑龍江 哈爾濱 150040)

    目的:研究評價梔子厚樸湯抗抑郁的藥效學作用。方法:選用小鼠行為絕望模型小鼠懸尾和強迫游泳實驗,以及利血平引起的體溫下降拮抗實驗和育亨賓毒性增強實驗,評價梔子厚樸湯抗抑郁作用及機制。結(jié)果:梔子厚樸湯的高、中劑量組(24 g/kg,12 g/kg)能顯著減少小鼠懸尾不動和強迫游泳不動時間(P<0.05);梔子厚樸湯高、中、低三個劑量組(24 g/kg、12 g/kg、6 g/kg)能有效抵抗利血平引起的體溫下降并增強育亨賓對小鼠的毒性(P<0.05)。結(jié)論:梔子厚樸湯具有抗抑郁的作用。

    梔子厚樸湯;抗抑郁

    梔子厚樸湯出自《傷寒論》,由梔子、厚樸、枳實三味藥組成,具有清熱除煩,寬胸消滿之功效。中醫(yī)臨床是主治熱擾胸腹證的基礎方。本文用梔子厚樸湯對小鼠抗抑郁作用及機制進行了研究。

    1 實驗材料與儀器

    1.1 動物

    清潔級昆明小鼠,體質(zhì)量20±2 g,雄性,由黑龍江中醫(yī)藥大學藥物安評中心提供。

    1.2 藥品與儀器

    梔子厚樸湯(自制,梔子14 g,厚樸12 g,枳實4 g,水煎煮,濾過,濾液濃縮制成1 g/mL的流浸膏)。鹽酸氯米帕明(上海信誼九福藥業(yè)有限公司,100601),利血平注射液(天津金耀氨基酸有限公司,1005281),育亨賓(yohimbine,廣州市金華大化學試劑有限公司,200543)。電子體溫計(倍爾康jxb-178),秒表(深圳市君斯達實業(yè)有限公司),自制懸尾支架。

    2 實驗方法

    2.1 對急性應激所致動物絕望行為的影響

    2.1.1 分組及給藥方法

    小鼠50只隨機分成5組,即空白組、陽性對照組、梔子厚樸湯高、中、低劑量組。陽性對照組鹽酸氯米帕明40 mg/kg,低、中、高劑量梔子厚樸湯組(6 g/kg、12 g/kg、24 g/kg),空白組灌胃給予生理鹽水,每組均按0.4 mL/10 g體質(zhì)量灌胃給藥,每日1次,連續(xù)給藥7天。

    2.1.2 小鼠懸尾實驗(TST)

    參照 Steru等[1]的方法,小鼠末次灌胃給藥1 h后,將小鼠尾端(在距尾尖2 cm處)用膠布固定在自制懸尾支架上,使其呈倒懸狀態(tài),頭部離懸尾箱底約5 cm,每次同時測試2只動物,相互之間用紙板隔開。適應2 min后,記錄4 min之內(nèi),累計不動時間(小鼠停止掙扎)。

    2.1.3 小鼠強迫游泳實驗(FST)

    參照Porsolt等[2-3]的方法,小鼠于末次給藥后1 h,將小鼠單個放入高20 cm、直徑18 cm、水深10 cm、水溫(30±2)℃的水槽中,記錄累計不動時間(小鼠在水中停止掙扎或呈漂浮狀態(tài))。

    2.2 小鼠利血平拮抗實驗

    2.2.1 分組及給藥方法

    小鼠60只隨機分成6組,即空白組、模型組、陽性對照組、梔子厚樸湯高、中、低劑量組。陽性對照組鹽酸氯米帕明40 mg/kg,高、中、低劑量梔子厚樸湯組(24 g/kg、12 g/kg、6 g/kg),空白組每天給予等量的生理鹽水,每組均按0.4 mL/10 g體質(zhì)量灌胃給藥。每日灌胃一次,連續(xù)給藥7天。

    2.2.2 體溫下降的觀測

    參考Schelkunov[4-5]的方法,于末次給藥后1 h,除空白組外,腹腔注射4 g/kg利血平注射液,空白組腹腔注射等量的生理鹽水,4 h后測量體溫。記錄各組數(shù)據(jù),比較給藥組及對照組中體溫的差異。

    2.3 小鼠育亨賓毒性增強實驗

    2.3.1 分組及給藥方法

    小鼠120只隨機分成6組,即空白組、模型組、陽性對照組、梔子厚樸湯高、中、低劑量組。陽性對照組鹽酸氯米帕明40 mg/kg,梔子厚樸湯高、中、低劑量組(6 g/kg、12 g/kg、24 g/kg),空白組每天給予等量的生理鹽水,每組均按0.4 mL/10 g體質(zhì)量灌胃給藥,每日1次,連續(xù)給藥7天。

    2.3.2 小鼠死亡率的觀測

    參考Quinton[6-7]的方法,每只小鼠末次灌胃給藥1 h后,除空白組給予生理鹽水外,其余各組小鼠皮下注射育亨賓40 mg/kg。觀察注射育亨賓18 h后,各組小鼠的死亡率。記錄小鼠的死亡率,比較給藥組、對照組小鼠的死亡率。

    2.4 數(shù)據(jù)處理方法

    3 實驗結(jié)果

    3.1 小鼠懸尾實驗(TST)

    實驗結(jié)果見表1,梔子厚樸湯中劑量組(12 g/kg)與高劑量組(24 g/kg)均能縮短小鼠的不動時間,與空白組比較P<0.05差異顯著,且高劑量效果最好。

    表1 梔子厚樸湯對小鼠懸尾不動時間的影響

    注:與空白組比較,*P<0.05

    3.2 小鼠強迫游泳實驗(FST)

    實驗結(jié)果見表2,梔子厚樸湯中劑量組(12 g/kg)與高劑量組(24 g/kg)均能縮短小鼠的不動時間,與空白組比較P<0.05差異顯著,且中劑量效果最好。

    表2 梔子厚樸湯對小鼠強迫游泳不動時間的影響

    注:與空白組比較,*P<0.05,**P<0.01

    3.3 小鼠利血平拮抗作用實驗

    實驗結(jié)果見表3,梔子厚樸湯低、中、高三個劑量組均能拮抗利血平所致的溫度下降,與空白組比較P<0.05差異顯著。

    表3 梔子厚樸湯對利血平所致小鼠體溫下降的影響

    注:與空白組比較,▲P<0.05;與模型組比較,*P<0.05

    3.4 小鼠育亨賓增強實驗

    實驗結(jié)果見表4,梔子厚樸湯低、中、高三個劑量組均能顯著增加皮下注射育亨賓40 mg/kg小鼠的死亡率,與空白組比較P<0.05差異顯著。表明該方可能是通過影響去甲腎上腺素(NE)能神經(jīng)傳遞,產(chǎn)生抗抑郁作用。

    表4 梔子厚樸湯對小鼠育亨賓毒性增強作用的影響

    注:與空白組比較,▲P<0.05;與模型組比較,*P<0.05

    4 討論

    抑郁癥是一種情感性精神障礙,以顯著而持久的心境低落為主要臨床特征,中醫(yī)學屬于郁癥的范疇[8]。抑郁癥發(fā)病機率高,危害性大,嚴重影響人類的身心健康[9]。在抑郁癥治療藥物篩選中,F(xiàn)ST和TST實驗[10]常用作行為絕望模型(behavioural despair,BD)應用,也是行為藥理實驗中用于篩選和觀察抗抑郁藥物的可靠的實驗方法[11],更是經(jīng)典的抗抑郁評價模型[12],雖然這一模型存在難以克服的藥物作用的假陽性和假陰性反映問題,但與其他抑郁模型相比,該方法簡單、快捷,有可靠性強的特點[13]。本實驗合并使用FST和TST兩種模型對梔子厚樸膠囊的初步研究,結(jié)果表明梔子厚樸湯高、中劑量組均能減少小鼠強迫游泳和懸尾的不動時間,說明了梔子厚樸湯對絕望引起的抑郁癥狀有作用。

    利血平是一種囊泡再攝取抑制劑,它能使神經(jīng)遞質(zhì)甲腎上腺素(NE)、5-羥色胺(5-HT)等耗竭,引起如體溫下降等生理上的變化[14]。本實驗通過小鼠利血平拮抗作用和小鼠育亨賓增強實驗,顯示梔子厚樸湯能拮抗利血平所致的小鼠體溫下降;能增強育亨賓毒性。因此本實驗初步推測梔子厚樸湯的抗抑郁作用機制,可能是與阻斷NE、5-HT等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的重攝取而抑制其生物胺失活,從而影響腦單胺遞質(zhì)受體功能狀態(tài)有關。

    《傷寒論》說:“傷寒下后,心煩腹?jié)M,臥起不安者,梔子厚樸湯主之?!贝朔诫m小,主治卻很明了。梔子除心煩,厚樸消胸腹脹滿,枳實除心下痞悶[15]。此方與小承氣湯僅一味之差,雖都治腹?jié)M,然小承氣湯所治偏下,本方所主則病位偏上。“臥起不安”點出了病情的嚴重程度,也暗含了失眠之義。臨床上遇到神經(jīng)官能癥、焦慮癥、失眠癥,應用此方則患者的精神狀態(tài)隨之好轉(zhuǎn)[16]。梔子厚樸湯處方各藥味所含的主要藥效成分,如厚樸酚、梔子苷、橙皮苷等多有抗抑郁作用的實驗研究[17]。梔子厚樸湯雖然是一個經(jīng)典小方,但具有進一步研究開發(fā)價值。

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    R285.5;R277.7

    A

    1002-2392(2017)06-0049-03

    2017-06-23

    2017-11-12

    黑龍江省中醫(yī)藥科研項目(ZHY16-094)

    初云海(1973-),男,副主任藥師,主要研究方向:從事中藥調(diào)劑及方劑研究工作。

    *通訊作者:田明(1963-),男,教授,碩士研究生導師,主要研究方向:中藥新藥研發(fā)。

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