兒童青紫型與非青紫型先天性心臟病胸腺病理及免疫功能的對(duì)比觀察

郭晨　艾凌云　胡淑霞

[摘要]目的 探討兒童青紫型與非青紫型先天性心臟病患者的胸腺病理及免疫功能，為疾病診治提供依據(jù)。方法 選取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患兒（A組）與40例非青紫型先心病患兒（B組）作為研究對(duì)象。比較兩組患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞水平，觀察比較兩組的手術(shù)切除胸腺常規(guī)病理組織形態(tài)變化。結(jié)果 B組患兒的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組1～2歲患兒的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞計(jì)數(shù)均低于同組0～1歲患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組患兒病理檢查可見(jiàn)胸腺結(jié)構(gòu)存在，皮髓境界清楚，皮質(zhì)淋巴細(xì)胞豐富，髓質(zhì)胸腺小體結(jié)構(gòu)存在，間質(zhì)無(wú)著變，B組1～2歲患兒可見(jiàn)少量星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮，A組0～1歲患兒可見(jiàn)星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮，A組1～2歲患兒可見(jiàn)較多星空現(xiàn)象和胸腺明顯萎縮。結(jié)論 青紫型先心病患兒較非青紫型先心病胸腺萎縮明顯而免疫功能降低，且先心病患兒胸腺萎縮和免疫功能低下隨年齡增長(zhǎng)而加重。

[關(guān)鍵詞]兒童；青紫型；非青紫型；先天性心臟病；胸腺病理；免疫功能；對(duì)比

[中圖分類(lèi)號(hào)] R725.4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）11（b）-0067-04

[Abstract]Objective To investigate the pathology and immune function of thymus in children with cyanotic and non-cyanotic congenital heart disease，and to provide basis for the diagnosis and treatment of disease.Methods 30 patients with cyanotic congenital heart disease （group A） and 40 patients with non-cyanotic congenital heart disease （group B） treated in our hospital from May 2016 to March 2017 were selected as subjects.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in two groups were detected and compared.The hist opathological changes of thymus in two groups were observed and compared.Results The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in group B were higher than those of group A，and the differences were significant （P<0.05）.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in children aged 1-2 years in both groups were lower than those of 0-1 years old children in the two groups，and the differences were significant （P<0.05）.Pathological examination resaults showed that both of the two groups had thymus structure exists，clear edge state，rich cortical lymphocytes，medullary thymus body structure exists，and no interstitial change，besides group B aged 1-2 years old children had small number of stars and thymus mild atrophy，group A aged 0-1 years old children had stars phenomenon and thymus mild atrophy，and group A aged 1-2 years old children had much stars and thymus atrophy.Conclusion Thymic atrophy in children with cyanotic congenital heart disease are severe than that of the children with non-cyanotic congenital heart disease，and immune function in children with cyanotic congenital heart disease are lower than those of the children with non-cyanotic congenital heart disease.And the thymic atrophy and immune function lowering of children with congenital heart disease are aggravated with age.

[Key words]Children；cyanosis；Non-cyanotic；Congenital heart disease；Thymus pathology；Immune functionendprint

先天性心臟病為心臟大血管畸形引發(fā)的血流動(dòng)力學(xué)異常等現(xiàn)象，可分為青紫型和非青紫型，?？蓪?dǎo)致酸堿失衡、營(yíng)養(yǎng)不良、感染等并發(fā)癥而嚴(yán)重影響患兒健康[1-3]。而胸腺是對(duì)各種應(yīng)激反應(yīng)的敏感器官和免疫器官，已有研究表明先天性心臟病患兒胸腺退化早，且其手術(shù)治療需切除胸腺[4-6]。因此，先天性心臟病手術(shù)可能影響患兒免疫功能和健康狀況，而對(duì)先天性心臟病患兒胸腺和免疫功能變化進(jìn)行觀察，可能有助于對(duì)其進(jìn)行正確診治。因此，本研究選取我院收治的30例青紫型先心病患兒與40例非青紫型先心病患兒作為研究對(duì)象，分析比較了青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒的胸腺病理變化以及免疫功能變化，旨在為青紫型和非青紫型先天性心臟病的診治提供依據(jù)，具體報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患兒（A組）與40例非青紫型先心病患兒（B組）作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：A組均經(jīng)心臟超聲確診為法洛四聯(lián)癥，病情穩(wěn)定無(wú)急性缺氧，口唇明顯發(fā)紺；B組經(jīng)心臟超聲確診為房間隔缺損、室間隔缺損、二尖瓣狹窄、主動(dòng)脈狹窄等，且無(wú)明顯口唇發(fā)紺。排除標(biāo)準(zhǔn)：兩組均排除合并其他復(fù)雜心臟急性、合并電解質(zhì)紊亂、急性感染、肝腎功能異常、心衰等患兒。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核及同意，患者家屬均知曉本研究情況并簽署知情同意書(shū)。兩組患兒的性別、年齡、出生體質(zhì)量等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患兒均根據(jù)具體病情擇期手術(shù)治療，由相關(guān)手術(shù)經(jīng)驗(yàn)>3年的醫(yī)師進(jìn)行手術(shù)操作，并積極對(duì)合并疾病進(jìn)行治療。

1.2.2檢測(cè)方法 兩組均在入選時(shí)取股靜脈血3 ml，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)指標(biāo)。比較兩組CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞水平，分別向血液標(biāo)本中加入相應(yīng)細(xì)胞單克隆抗體（北京同立海源生物科技有限公司提供）和1.5 ml紅細(xì)胞裂解液（北京索萊寶科技有限公司提供），在艾本德離心機(jī)4℃環(huán)境中以5000 r/min轉(zhuǎn)速和3 cm半徑離心5 min，加入1 ml磷酸鹽緩沖液后上CytoNova 流式細(xì)胞儀（北京博奧晶典生物技術(shù)有限公司）進(jìn)行檢測(cè)，具體檢測(cè)操作嚴(yán)格按照試劑盒和儀器說(shuō)明書(shū)引導(dǎo)進(jìn)行。對(duì)手術(shù)切除胸腺進(jìn)行HE染色觀察比較兩組手術(shù)切除胸腺常規(guī)病理組織形態(tài)變化，將手術(shù)獲得的胸腺組織常規(guī)制成石蠟切片，切片以二甲苯和松節(jié)油透明脫蠟10 min，100%乙醇溶液脫苯2次，2 min/次，其后以95%、90%、80%、70%梯度酒精水化各1 min，蘇木精染色10 min，1%鹽酸乙醇分化15 s，0.5%伊紅液染色2 min，70%、80%、90%、95%梯度酒精脫水各1 min，99%乙醇溶液脫水2次，5 min/次，二甲苯透明2次，2 min/次，中性樹(shù)膠封片后在光學(xué)顯微鏡下隨機(jī)選取6個(gè)視野（200×）進(jìn)行觀察。

1.3觀察指標(biāo)

比較兩組患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞水平，并觀察比較兩組手術(shù)切除胸腺常規(guī)病理組織形態(tài)變化。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患兒免疫功能指標(biāo)的比較

B組患兒的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞計(jì)數(shù)均高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組1～2歲患兒的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞計(jì)數(shù)均低于同組0～1歲患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

2.2兩組患兒病理檢查結(jié)果的比較

兩組患兒病理檢查可見(jiàn)胸腺結(jié)構(gòu)存在，皮髓境界清楚，皮質(zhì)淋巴細(xì)胞豐富，髓質(zhì)胸腺小體結(jié)構(gòu)存在，間質(zhì)無(wú)著變。A組0～1歲患兒可見(jiàn)星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮（圖1），1～2歲患兒可見(jiàn)較多星空現(xiàn)象和胸腺明顯萎縮（圖2）。B組0～1歲患兒胸腺結(jié)構(gòu)正常（圖3），1～2歲患兒可見(jiàn)少量星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮（圖4）。

3討論

近年來(lái)隨著檢查技術(shù)的不斷發(fā)展，各類(lèi)先天性畸形疾病的診出率不斷增加。先天性心臟病是新生兒常見(jiàn)先天性心臟急性疾病，其臨床發(fā)病率較高，可分為青紫型和非青紫型兩種，其中青紫型先天性心臟病病情復(fù)雜危重，需盡早進(jìn)行手術(shù)干預(yù)以改善病情和預(yù)后[7-10]。因此，對(duì)青紫型和肺青紫型先天性心臟病進(jìn)行及時(shí)有效地診斷以及治療十分重要，而其臨床診治常以臨床病理和實(shí)驗(yàn)室檢查為參考。臨床先天性心臟病切除術(shù)常需對(duì)其胸腺組織進(jìn)行切除，而胸腺組織為免疫器官，采取切除治療可能對(duì)患兒免疫功能等造成影響[11-12]。且已有研究表明，先天性心臟病患兒可出現(xiàn)胸腺發(fā)育異常和早期退化[13-15]。因此，對(duì)先天性心臟病患兒進(jìn)行胸腺組織以及免疫功能變化的觀察，可能有助于了解其具體病情，指導(dǎo)臨床治療以期改善療效和預(yù)后，然而目前此方向研究甚少，尚需進(jìn)一步研究證實(shí)。

本研究對(duì)先天性心臟病患兒進(jìn)行了胸腺病理檢查和免疫功能指標(biāo)的流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，并進(jìn)行了青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒之間上述指標(biāo)的比較。本研究結(jié)果提示，青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒的胸腺病理檢查均可見(jiàn)胸腺結(jié)構(gòu)存在，皮髓境界清楚，皮質(zhì)淋巴細(xì)胞豐富，髓質(zhì)胸腺小體結(jié)構(gòu)存在以及間質(zhì)無(wú)著變，且非青紫型0～1歲患兒胸腺結(jié)構(gòu)無(wú)明顯異常，非青紫型1～2歲患兒已可見(jiàn)少量星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮，青紫型0～1歲患兒即可見(jiàn)星空現(xiàn)象和胸腺輕度萎縮，青紫型1～2歲患兒則可見(jiàn)較多星空現(xiàn)象和胸腺明顯萎縮，先天性心臟病患兒胸腺萎縮低下隨年齡增長(zhǎng)而加重，且青紫型患兒胸腺萎縮狀況更嚴(yán)重。相對(duì)于青紫型先天性心臟病患兒，青紫型先天性心臟病患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞水平均降低，且兩組1～2歲患兒的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細(xì)胞及殺傷T細(xì)胞計(jì)數(shù)等均低于其0～1歲患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），先天性心臟病患兒免疫功能低下，隨年齡增長(zhǎng)而加重，且青紫型患兒免疫功能低下?tīng)顩r更嚴(yán)重。因此，臨床應(yīng)盡早對(duì)先天性心臟病患兒進(jìn)行診治，而新出生嬰兒需密切關(guān)注其變化，出現(xiàn)可疑青紫型者及時(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室、超聲等檢查確診并及時(shí)干預(yù)以期改善療效和預(yù)后，而采取措施改善先天性心臟病患兒的免疫功能可能有助于其療效以及預(yù)后的改善。endprint

綜上所述，先心病患兒胸腺萎縮和免疫功能低下嚴(yán)重，隨年齡增長(zhǎng)而加重，且青紫型病情較非青紫型病情嚴(yán)重，需及時(shí)有效治療。然而本研究樣本量偏小，術(shù)后缺乏長(zhǎng)期療效和預(yù)后觀察，青紫型和非青紫型先天性心臟病胸腺和免疫功能差異需進(jìn)一步研究探討證實(shí)。

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（收稿日期：2017-08-30 本文編輯：孟慶卿）endprint