金釵石斛IAA內(nèi)生細(xì)菌篩選及對干旱脅迫下玉米種子萌發(fā)的影響

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(貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院， 貴陽 550001)

金釵石斛IAA內(nèi)生細(xì)菌篩選及對干旱脅迫下玉米種子萌發(fā)的影響

高陽，朱雙麗，吳慶珊，雷珣，安忠琦，王玉倩，牛曉娟，翁慶北

(貴州師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院， 貴陽 550001)

從金釵石斛植株中分離并篩選產(chǎn)吲哚乙酸(IAA)的內(nèi)生細(xì)菌，研究在不同濃度PEG-6000模擬的干旱脅迫條件下，產(chǎn)IAA內(nèi)生菌發(fā)酵上清液浸種處理對玉米種子萌發(fā)的影響。從金釵石斛分離出645株內(nèi)生細(xì)菌，通過salkowskis法篩選表明，63.4%的內(nèi)生菌具有分泌IAA的能力，其中有9株菌分泌量較高，分泌量為12.8～34.5 mg/L?；?6 SrRNA基因序列分析，初步鑒定它們?yōu)檠挎邨U菌屬(Bacillus)和類芽孢桿菌屬(Paenibacillus)細(xì)菌。將內(nèi)生菌發(fā)酵上清液浸種處理玉米種子，在未加PEG以及5%、10%和15% PEG的干旱脅迫條件下，其種子萌發(fā)率與對照組的相當(dāng)或降低。但部分產(chǎn)IAA內(nèi)生菌浸種處理可緩解高度干旱脅迫作用：在20% PEG條件下，有7株內(nèi)生菌浸種處理后玉米種子萌發(fā)率顯著提高，較對照組提高了4.7%～13.3%；25% PEG條件下，內(nèi)生菌LJYPD 10處理的玉米種子萌發(fā)率比對照組顯著提高了5.3%。

金釵石斛； 內(nèi)生細(xì)菌； IAA； 玉米； 種子萌發(fā)； 干旱脅迫

植物內(nèi)生菌指在其生活史的一定階段或全部階段，生活于健康植物各種組織和器官內(nèi)部，又不會(huì)引起植物明顯病害的一類微生物[1]。植物內(nèi)生菌在植物微生態(tài)系統(tǒng)中具有重要作用[2]，其能提高植物在逆境中的抗性[3-4]，并產(chǎn)生細(xì)胞分裂素(cytokinin)、赤霉素(gibberellin)[5]、吲哚乙酸(indole-3-acetic acid，IAA)等植物激素，對植物具促生作用[6-8]。

IAA是一種植物體內(nèi)普遍存在的內(nèi)源生長素，具有促進(jìn)細(xì)胞分裂，調(diào)節(jié)種子萌發(fā)和植物生長發(fā)育的作用[8]。研究表明，當(dāng)處于水分、干旱、高鹽等逆境下，植物自身合成 IAA 的能力受到抑制，植物生長受到限制[9-11]，外源IAA可以促進(jìn)植物幼苗的伸長并降低幼苗細(xì)胞膜透性，并增強(qiáng)植物對不良環(huán)境的適應(yīng)能力[11]。對具有分泌IAA能力的內(nèi)生細(xì)菌進(jìn)行研究有利于將植物促生細(xì)菌應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。

我國干旱、半干旱土地面積約占全國總面積的47%[12]。貴州位于中國西南部，季風(fēng)氣候不穩(wěn)定，氣象災(zāi)害頻發(fā)，主要表現(xiàn)為春旱和夏旱，干旱對貴州省尤其是西部地區(qū)農(nóng)作物的種植帶來很大影響[13]。玉米是我國主要的糧食作物之一，在貴州省種植范圍較廣。如何增強(qiáng)玉米自身的抗旱能力，是目前玉米栽培研究急需解決的問題。

金釵石斛(D.nobileLindl)因其藥用價(jià)值與野生資源短缺而備受關(guān)注。野生金釵石斛大多附生在巖石上或樹上，喜陰涼濕潤環(huán)境，冬春季節(jié)稍耐干旱，能夠抵抗惡劣環(huán)境[14]。本研究從石斛植物組織中分離內(nèi)生細(xì)菌，篩選產(chǎn)IAA的菌株，研究其對PEG-6000模擬干旱脅迫條件下玉米種子萌發(fā)率的影響，為進(jìn)一步研究內(nèi)生菌對植物的促生及其抗逆作用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

于2014年在貴州省赤水市旺隆鎮(zhèn)等地隨機(jī)采集金釵石斛植株，置密封袋中，并盡快用于分析。玉米種子裕玉207購自遵義裕農(nóng)種業(yè)有限責(zé)任公司。

1.2 培養(yǎng)基

內(nèi)生菌分離培養(yǎng)基：NA培養(yǎng)基，YG培養(yǎng)基，R2A培養(yǎng)基，LB培養(yǎng)基，TSA培養(yǎng)基，金氏B培養(yǎng)基，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，YPD培養(yǎng)基，2×YT培養(yǎng)基，TB培養(yǎng)基[15]。

1.3 金釵石斛內(nèi)生細(xì)菌的分離純化

將金釵石斛植株洗凈晾干，將根、莖、葉用75%乙醇浸泡2 min，無菌水沖洗3次；3%NaClO浸泡3 min，無菌水沖洗3次；0.1%升汞浸泡10 min，無菌水沖洗4～5次；75%乙醇浸泡1 min，無菌水沖洗3次。將表面消毒后的根、莖、葉分別置于盛有無菌水的研缽中研磨，并將稀釋至102和103倍的研磨組織液涂布平板，37 ℃培養(yǎng)2～5 d[16]。最后1次沖洗植株的無菌水涂布平板，作為空白對照。挑取形態(tài)不同的菌落，接種試管斜面，37 ℃培養(yǎng)過夜后，4 ℃低溫保存。

1.4 內(nèi)生菌的發(fā)酵培養(yǎng)

從保存的斜面挑取適量菌體接種于5 mL液體培養(yǎng)基中，28 ℃ 120 r/min搖床培養(yǎng)16 h。將發(fā)酵液4 000 r/min離心15 min后，取上清液備用。

1.5 產(chǎn)IAA菌株的篩選

取0.1 mL上清液與等量salkowskis試劑(4.5 g/L FeCl3、10.8 mol/L H2SO4溶液)混勻，滴置于白色陶瓷板上室溫避光30 min。顏色變紅則表示能夠分泌IAA。根據(jù)顯色后顏色變化，初步篩選內(nèi)生菌分泌IAA的能力[17]。以IAA(購自北京中生瑞泰科技有限公司)10.0 mg/L標(biāo)準(zhǔn)液為陽性對照，空白培養(yǎng)基為陰性對照。

配制IAA標(biāo)準(zhǔn)液濃度分別為0，5.0，10.0，15.0，20.0，25.0，30.0，35.0，40.0，45.0，50.0 mg/L。量取2.0 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入salkowskis試劑2.0 mL，混合并避光靜置30 min后，測定OD530值[18]。以IAA濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合得到回歸方程。取2.0 mL內(nèi)生菌發(fā)酵上清液與等量salkowskis試劑混合，避光靜置30 min。測定OD530值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出IAA含量。以培養(yǎng)基代替發(fā)酵液作為空白對照。

1.6 內(nèi)生細(xì)菌的分子鑒定

采用CTAB法提取內(nèi)生細(xì)菌總DNA[19]。利用細(xì)菌通用引物27 F(5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′)和1492 R(5′-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3′)，PCR擴(kuò)增16S rRNA 基因。PCR擴(kuò)增體系：DNA 模板(70 ng/μL)2.0μL，引物(10μmol/L)各 1.0μL，2×PCR mix 25.0μL，補(bǔ)足雙蒸水至50μL。PCR擴(kuò)增條件：94 ℃預(yù)變性4 min，94 ℃變性1 min，55 ℃退火1 min，72 ℃延伸3 min，30個(gè)循環(huán)后，72 ℃再延伸10 min。擴(kuò)增產(chǎn)物送生工生物工程(上海)股份有限公司測序。

根據(jù)測定序列，利用BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/Blast.cgi)與GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列比對分析，進(jìn)行初步鑒定。

1.7 產(chǎn)IAA內(nèi)生細(xì)菌對種子萌發(fā)的影響

選取成熟飽滿、大小適中且均勻一致的玉米種子，自來水反復(fù)沖洗表面污垢，75%酒精浸泡2 min，蒸餾水沖洗5次，置無菌濾紙上吸去表面水分后備用。用待測內(nèi)生菌發(fā)酵上清液室溫浸泡玉米種子，5 h后將種子均勻排列在鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿中，25 ℃恒溫培養(yǎng)。培養(yǎng)7 d后統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率。每個(gè)處理60粒，3次平行。以培養(yǎng)基代替發(fā)酵上清液為對照。

表1 分泌IAA較強(qiáng)的內(nèi)生菌

菌株分類最大相似菌株相似度分離部位IAA含量(mg/L)顯色反應(yīng)LJR2A1BacillussubtilisNR_114997.199%莖16.6+++LYYT31BacillussubtilisNR_114997.199%葉16.9+++LJTSA1BacillussubtilisNR_114997.199%莖34.5++++LGYPD10BacillussubtilisNR_114997.199%根27.2++++WGKB2BacillussubtilisNR_114997.199%根20.5+++LJNA1BacillussubtilisNR_114997.199%莖13.6++WGLB2PaenibacilluscinerisNR_042189.199%根24.2+++LJYG4PaenibacilluscinerisNR_042189.199%莖12.8++LYTB6BacillussubtilisNR_114997.199%葉13.3++

注：“++++”、“+++”、“++”、分別表示紫紅色、紅色、粉紅色。

1.8 模擬干旱脅迫

在培養(yǎng)皿中加入15.0 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為5%、10%、15%、20%、25%的PEG-6000(天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司)溶液以飽和雙層濾紙[20]，其上放置種子。以15.0 mL雙蒸水代替PEG-6000溶液作為對照。

1.9 統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用SPSS 21.0對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，單因素方差分析(One-way ANOVA)進(jìn)行均值顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 產(chǎn)IAA菌株篩選

從赤水采集的金釵石斛植株根、莖、葉中分離內(nèi)生細(xì)菌，將分離的645株內(nèi)生細(xì)菌用于產(chǎn)IAA菌株篩選。通過salkowskis試劑比色法對分泌IAA的內(nèi)生菌進(jìn)行初篩。其中409株內(nèi)生菌發(fā)酵上清液與salkowskis混合后，顏色發(fā)生變化，表明大部分金釵石斛內(nèi)生細(xì)菌具有分泌IAA的能力。但大部分內(nèi)生菌發(fā)酵液與salkowskis混合顯色后顏色較淺，分泌量較低。與對照10.0 mg/L IAA顯色后的粉紅色相比，篩選出9株顯色較深的內(nèi)生菌進(jìn)一步用于定量測定，包括顯色為粉紅色，與10.0 mg/L IAA顯色相當(dāng)?shù)腖JNA 1、LJYG 4和LYTB 6；顯色反應(yīng)為紅色的LJR 2 A 1、LYYT 31、WGKB 2、WGLB 2；以及顯色為紫紅色的LJTSA 1、LGYPD 10(表1)。培養(yǎng)基顯色為無色。

進(jìn)一步通過定量檢測方法測定篩選出的內(nèi)生菌IAA分泌量。分光光度計(jì)測定OD530，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線線性回歸方程(圖1)計(jì)算各內(nèi)生細(xì)菌IAA的分泌量。如表1所示，篩選獲得的9株內(nèi)生菌的IAA分泌量在12.8～34.5 mg/L之間。其中LJTSA 1的量最高(34.5 mg/L)，LGYPD 10次之(27.2 mg/L)，而LJYG 4最低(12.8 mg/L)。

圖1 IAA標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 金釵石斛產(chǎn)IAA內(nèi)生菌的分子鑒定

提取金釵石斛內(nèi)生菌DNA，PCR擴(kuò)增16 SrRNA基因，測序，并與NCBI核酸數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行比對。結(jié)果表明，WGLB 2和LJYG 4初步鑒定為類芽孢桿菌屬(Paenibacillus)，其余7株為芽孢桿菌屬(Bacillus)(表1)。

這9株內(nèi)生菌分別分離自金釵石斛的根、莖、葉不同部位，其中，LJR 2 A 1、LJTSA 1、LJNA 1和LJYG 4等4株菌分離自莖，LGYPD 10、WGKB 2和WGLB 2等3株菌分離自根，LYYT 31和LYTB 6分離自葉。

2.3 產(chǎn)IAA內(nèi)生菌對玉米種子萌發(fā)率的影響

將產(chǎn)IAA的內(nèi)生菌發(fā)酵上清液浸種處理玉米種子。如表2所示，在干旱脅迫條件下，用培養(yǎng)基浸種處理后的對照組萌發(fā)率隨著PEG濃度增加(干旱脅迫程度增加)而減小。在5% PEG的輕度干旱脅迫下，萌發(fā)率無顯著變化。在10%、15% PEG的中度干旱脅迫條件下，萌發(fā)率從91.0%下降為88.0%、86.0%。在20%、25% PEG的重度干旱脅迫下，玉米種子萌發(fā)率極顯著下降為66.0%和63.7%(p<0.01)。

表2 不同濃度PEG-6000干旱脅迫下產(chǎn)IAA內(nèi)生菌對玉米種子萌發(fā)率的影響

PEG-6000濃度(%)對照(%)LJR2A1(%)LTYT31(%)LJTSA1(%)LGYPD10(%)WGKB2(%)LJNA1(%)WGLB2(%)LJYG4(%)LJTB6(%)091.0±1.5a82.0±0.6a87.0±3.2a87.0±1.2a89.0±2.1a83.3±0.9b90.3±1.3a87.7±0.9a87.7±0.7a87.7±0.3a591.0±2.1a83.0±0.6a89.0±2.1a86.0±3.0ab87.7±0.9a89.0±0.6a87.3±0.9a84.3±1.2b82.0±0.6b85.0±2.1a1088.0±1.7a77.3±1.2b80.0±0.6b83.0±1.5ab82.0±1.5b86.0±1.5ab86.7±1.2a81.3±0.9c87.0±0.6a83.3±1.2a1586.0±1.2a77.3±1.8b77.0±1.5b80.0±0.6bc82.0±1.5b88.0±0a81.3±0.9b77.7±0.9d85.0±1.2a84.3±0.9a2066.0±1.5b66.3±1.3c71.0±1.0c75.0±1.5c73.0±0.6c75.0±0.6c77.7±1.2c59.0±0.6e79.3±0.9c70.7±0.9b2563.7±2.2b64.7±0.9c61.0±1.5d46.0±1.0d69.0±0.6c52.7±1.5d51.3±0.7d49.3±0.9f65.3±0.7d64.3±1.8c

將產(chǎn)IAA的內(nèi)生菌發(fā)酵上清液浸種處理玉米種子，測定內(nèi)生菌處理對玉米種子萌發(fā)率的影響(表2)。隨干旱脅迫程度加深，產(chǎn)IAA內(nèi)生細(xì)菌浸種處理后玉米種子萌發(fā)率較對照組的總體表現(xiàn)為降低—增加—再降低。但不同內(nèi)生菌對萌發(fā)率影響不同。未加入PEG時(shí)，與對照組相比，9株產(chǎn)IAA內(nèi)生菌浸種后玉米種子萌發(fā)率均略有下降，其中LJR 2 A 1和WGKB 2浸種處理后的玉米種子萌發(fā)率顯著下降，但其他內(nèi)生菌對玉米種子萌發(fā)未有顯著影響。在5%、10%和15% PEG條件下，產(chǎn)IAA內(nèi)生菌上清液浸種處理后的玉米種子萌發(fā)率與對照組的相比，總體相當(dāng)或略低。在5% PEG干旱脅迫下，僅LJYG 4菌株浸種后的玉米種子萌發(fā)率較對照組的顯著降低，其他菌株對萌發(fā)率沒有顯著影響；在10% PEG干旱脅迫下，LJR 2 A 1、LYYT 31和WGLB 2浸種處理后的萌發(fā)率顯著低于對照組；在15% PEG干旱脅迫下，只有WGKB 2菌株浸種玉米種子的萌發(fā)率略高于對照組的，但不顯著，而LJR 2 A 1、LYYT 31、LJTSA 1、LJNA 1和WGLB 2浸種后的玉米種子萌發(fā)率則顯著低于對照組的。

隨著干旱脅迫程度加深，在20% PEG條件下，除WGLB 2浸種后的玉米種子萌發(fā)率(59.0%)顯著低于對照組的(66.0%)、LJR 2 A 1處理后的萌發(fā)率與對照組的相當(dāng)外，其余7株內(nèi)生菌處理后的種子萌發(fā)率均高于對照組的。其中LJTSA 1、LGYPD 10和WGKB 2處理后的玉米種子萌發(fā)率分別為75.0%、73.0%和75.0%，顯著高于對照組(p<0.05)，LJNA 1和LJYG 4處理后的玉米種子萌發(fā)率分別為77.7%和79.3%，極顯著高于對照組(p<0.01)。但當(dāng)PEG增加為25%時(shí)，大部分菌株處理后的玉米種子萌發(fā)率又低于對照組，僅內(nèi)生菌LGYPD 10處理后的種子萌發(fā)率(69.0%)高于對照組(63.7%)。

3 討 論

干旱脅迫是植物生長的逆境之一。在逆境條件下，IAA能夠幫助種子抵抗逆境，促進(jìn)種子萌發(fā)。本研究從金釵石斛植株內(nèi)生細(xì)菌中篩選獲得9株分泌IAA較好的內(nèi)生菌，并研究了在不同濃度PEG-6000干旱脅迫條件下，產(chǎn)IAA內(nèi)生菌對玉米種子萌發(fā)的影響。為金釵石斛內(nèi)生菌資源利用以及產(chǎn)IAA內(nèi)生菌對干旱脅迫植物生長研究提供了依據(jù)。

IAA是植物生長過程中必需的一種激素。從植物中分離的內(nèi)生細(xì)菌許多都能分泌IAA，包括芽孢桿菌屬、類芽孢桿菌屬、假單胞菌屬(Pseudomonas)、微桿菌屬(Microbacterium)、鏈霉菌屬(Streptomyces)、腸桿菌屬(Enterobacter)和泛菌屬(Pantoea)等[11, 21-22]。內(nèi)生菌分泌IAA的量差異較大，目前從春蘭、細(xì)莖石斛等分離的內(nèi)生和根圍細(xì)菌產(chǎn)IAA量為0.5～287.5 mg/L[21-22]。本研究從金釵石斛中分離的645株菌內(nèi)生菌，通過salkowski試劑法比色反應(yīng)檢測，63.4%的內(nèi)生菌能分泌IAA，但大部分菌株分泌量低。篩選的9株產(chǎn)IAA較高的菌株IAA分泌量為12.8～34.5 mg/L，為芽孢桿菌屬和類芽孢桿菌屬細(xì)菌。色氨酸是植物體內(nèi)生長素生物合成重要的前體物質(zhì)，在培養(yǎng)基中加入色氨酸可提高內(nèi)生菌IAA的分泌量[21,23]。

在干旱脅迫下，隨著PEG濃度增加，產(chǎn)IAA金釵石斛內(nèi)生菌對浸種處理后的玉米種子萌發(fā)的調(diào)控作用總體表現(xiàn)為抑制—促進(jìn)—抑制。在5%、10%和15% PEG的中、低度干旱脅迫下，產(chǎn)IAA內(nèi)生菌處理后的玉米種子萌發(fā)率總體低于對照處理的。在20% PEG重度干旱脅迫下，玉米種子萌發(fā)率極顯著降低，而產(chǎn)IAA內(nèi)生菌浸種處理有助于緩解玉米種子干旱脅迫影響，除WGLB 2和LJR 2 A 1 2株內(nèi)生菌外，LTYT 31、LJTSA 1、LGYPD 10、WGKB 2、LJNA 1、LJYG 4、LJTB 6等7株內(nèi)生菌浸種處理后，玉米種子萌發(fā)率較對照組(66.0%)提高了4.7%～13.3%不等。但當(dāng)PEG增加到25%時(shí)，除內(nèi)生菌LJYPD 10仍能緩解重度干旱脅迫影響，萌發(fā)率(69.0%)較對照組提高了5.3%外，其余內(nèi)生菌菌株浸種處理抑制了玉米種子的萌發(fā)或與對照組相當(dāng)，萌發(fā)率低于或略高于對照組的63.7%。

不同菌株處理對玉米種子干旱脅迫下萌發(fā)率影響不同。一方面，不同內(nèi)生菌產(chǎn)生IAA量不同，而IAA作為一種植物生長激素，對不同植物都有一定的最適處理濃度范圍，濃度太低則促生作用不明顯，濃度太高則抑制種子萌發(fā)或植物生長。且在不同產(chǎn)地[24]、不同脅迫條件[25]下種子萌發(fā)的IAA最適濃度也不同。另一方面，內(nèi)生菌還能產(chǎn)生除IAA外的其他促生物質(zhì)并共同作用于植株。由于植物在種子萌發(fā)、苗期生長等過程中還需要氮、磷等元素，單獨(dú)具有產(chǎn)IAA活性的菌株其促生能力比兼具解磷或固氮活性的菌株低[26]。

植物生長調(diào)節(jié)劑對種子萌發(fā)的調(diào)節(jié)是一個(gè)較為復(fù)雜的代謝過程。干旱脅迫可引起植物激素平衡的改變，內(nèi)生菌可通過改變ANAC 072 轉(zhuǎn)錄因子、脫水響應(yīng)原件結(jié)合蛋白2 A等植株干旱相關(guān)基因的表達(dá)或表達(dá)水平，產(chǎn)生IAA、赤霉素等植物激素，減少GsH、CAT、POD和多酚氧化酶等緩解干旱[27]，來增加共生植株的干旱耐受[28]，從而緩解干旱脅迫對植物的傷害，使植物在缺水環(huán)境下也能生長。目前，除產(chǎn)IAA內(nèi)生菌外，本實(shí)驗(yàn)室還從金釵石斛內(nèi)生菌中篩選了溶磷、解鉀、固氮等具促生作用的內(nèi)生菌。這些內(nèi)生菌對逆境脅迫下金釵石斛種子萌發(fā)和植株的促生作用及機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

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Screening of IAA Producing Endophytic Bacteria inDendrobiumnobileLindl and Effect onZeamaysSeed Germination Under Drought Stress

GAOYang,ZHUShuangli,WUQingshan,LEIXun，ANZhongqi,WANGYuqian，NIUXiaojuan,WENGQingbei

(School of Life Sciences, Guizhou Normal University,Guiyang 550001，China)

The indole-3-acetic acid (IAA) producing endophytic bacteria were isolated and screened fromDendrobiumnobileLindl.Under the condition of dought stress stimulated with different concentration of PEG-6000,the maize seed germination were studied after treating with the IAA-producing strains.The results showed that a total of 645 strains endophytic bacteria were isolated fromD.nobileLindl.,and 63.4% of the strains have the ability to produce IAA,using with the salkowskis reagent method,9 strains were screened,which produced 12.8-34.5 mg/L IAA and showed a higher ability of IAA production.Based on 16 S rRNA gene sequence analysis,these endophytic bacteria were identified asBacillussp.andPaenibacillussp..The IAA-producing endophytic bacteria were fermentated and the supernatant were used to soak the maize seeds.Under the condition of absence PEG or drought stress of 5%,10% and 15% PEG,the germination rate of the seeds treated with the endophytic bacteria were less than or equal to the control’s.Howerer,soaking with the IAA-producing endophytic bacteria could elliminate the high drought stress effect of the maize seeds.Under the condition of 20% PEG,there are 7 strains can significantly promote the seed germination,the germination rate of endophytic bacteria soaking seeds were increased by 4.7%-13.3% compared with the control.Under the condition of 25% PEG,the germination rate of the seeds treated with the endophytic bacteria LJYPD 10 was increased by 5.3% than the control’s.

DendrobiumnobileLindl； endophytic bacteria； IAA； maize (Zeamays)；seed germination； drought stress

2016-11-24

貴州省優(yōu)秀科技教育人才省長專項(xiàng)資金([2011] 47)；貴州省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201410663004)。

高 陽(1991—)，女，碩士研究生，研究方向：應(yīng)用生物化學(xué)；E-mail:504734134@qq.com。

翁慶北(1975—)，女，博士，教授，研究方向：資源微生物學(xué)；E-mail:wengqb@ 126.com。

10.16590/j.cnki.1001-4705.2017.04.0036

S 513

A

1001-4705(2017)04-0036-06