秀麗高原鰍繁殖生物學研究

梁祥+冷云+李光華+張宇+張建斌+繆祥軍+鐘文武+崔麗莉+左鵬翔+王志飛+姜志武

摘要：2013年4月至2014年3月，在仕莊龍?zhí)秾σ吧沱惛咴q用地籠逐月隨機采樣，樣本中鑒定出2～6齡魚發(fā)育到Ⅳ、Ⅴ期的性腺出現(xiàn)率為100%，即2齡即可達到性成熟，同齡魚中，性腺發(fā)育周期存在一定差異；最小性成熟雌魚體長5.1 cm，空殼質(zhì)量1.4 g，成熟系數(shù)14.2%；個體絕對繁殖力平均為1 928粒，數(shù)量介于233～6 971粒；個體相對繁殖力平均為420粒/g，介于43～1 211粒/g；性腺成熟系數(shù)平均為10.63%，介于1.50%～24.60%。通過目測和組織顯微觀察，發(fā)現(xiàn)4、6、8、11月的卵巢均出現(xiàn)處于繁殖前夕的Ⅴ期，但5、7、9、12月均出現(xiàn)卵巢產(chǎn)卵前處于發(fā)育期的Ⅳ期卵，表明其繁殖時間分散，產(chǎn)卵不徹底，一次并未產(chǎn)完成熟卵，推測其屬于不完全同步、分批產(chǎn)卵的Ⅵ期卵巢類型。反映秀麗高原鰍在個體卵巢發(fā)育過程中，卵細胞發(fā)育不同步性，分布有不同發(fā)育時期的卵細胞。

關(guān)鍵詞：秀麗高原鰍；年齡；卵巢；繁殖力；繁殖策略

中圖分類號： S961.2 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2017）20-0187-03

秀麗高原鰍屬于硬骨魚綱、鯉形目、鰍科、高原鰍屬魚類，屬于云南省特有魚類，分布于大理州鶴慶縣黑龍?zhí)?、白龍?zhí)?、西龍?zhí)兜茸匀凰騕1]，其味道鮮美，深受產(chǎn)地居民喜愛。近年來，由于自然干旱及水系水利水電工程建設(shè)等自然和人為因素影響，秀麗高原鰍野外種群生存面臨嚴峻挑戰(zhàn)，其基礎(chǔ)繁殖生物學研究尚屬空白，亟需進行相關(guān)研究，以期為人工干預(yù)秀麗高原鰍繁殖提供必要的生物學積累。

1 材料和方法

1.1 性成熟年齡與繁殖力

于2013年4月至2014年3月不間斷采樣，對34尾樣本進行活體解剖并目測觀察性腺發(fā)育形態(tài)，進行分期（Ⅰ～Ⅵ期）[2]，記錄相應(yīng)的數(shù)據(jù)以備分析；參照文獻[3-5]，確定微耳石作為年齡鑒定材料；將相對應(yīng)樣本帶回筆者實驗室解剖鏡下提取微耳石，經(jīng)環(huán)保透明液透明，中性快干膠載玻片包埋干燥，用7 000目砂紙磨片后，顯微拍照以備年齡鑒定[6]。

繁殖力以雌性魚類的懷卵量表示，分為個體絕對繁殖力（絕對懷卵量）和個體相對繁殖力（絕對懷卵量/空殼質(zhì)量），對秀麗高原鰍樣本Ⅳ期或Ⅴ期卵巢計數(shù)單位質(zhì)量卵粒，取成熟期卵巢稱性腺質(zhì)量，截取前、中、后部的卵巢組織稱質(zhì)量，5%福爾馬林固定后，分別計數(shù)并求平均數(shù)（粒/g），再乘以卵巢總質(zhì)量，獲得個體絕對懷卵量；將性腺及內(nèi)臟去除，稱質(zhì)量，獲得空殼質(zhì)量，以計算個體相對懷卵量；并計算成熟系數(shù)（性腺質(zhì)量/空殼質(zhì)量×100%），以表示1個種或種群的繁殖力。

1.2 性腺發(fā)育周年變化

2013年4月至2014年4月，逐月于云南省大理州鶴慶縣仕莊龍?zhí)?，采用地籠采集秀麗高原鰍活體樣本，進行活體解剖，目測性腺發(fā)育，記錄66尾雌魚卵巢的形態(tài)和大部分卵細胞的發(fā)育概況，隨機抽取部分性腺樣本，性腺樣本組織經(jīng)甲醇固定、乙醇逐級脫水、二甲苯透明、熔蠟中浸蠟、熔蠟?zāi)＞甙?、leica切片機切片、溫水展片、載玻片貼片、蘇木精-伊紅染色、中性快干膠蓋玻片封固等步驟，獲得HE染色的組織切片，于NIKON Eclipse 50i正置顯微鏡觀察。

1.3 數(shù)據(jù)分析

樣本試驗數(shù)據(jù)通過Excel 2007、SPSS 17.0處理分析。

2 分析與討論

2.1 性成熟年齡與繁殖力

雌性魚類卵巢在Ⅰ期時，成一條細線，雌雄難辨，當發(fā)育到Ⅳ期時，卵粒大量沉積卵黃，形態(tài)飽滿，卵巢充滿大部分腹腔，卵巢質(zhì)量達到頂峰，但還不能產(chǎn)卵，此時達到性成熟。精巢呈乳白色，但還不能排精，稍用力輕擠有精液流出。

由表1可知，年齡與性腺發(fā)育對應(yīng)樣本同齡魚中，因同齡樣本采集時間月份不一樣，發(fā)育階段不同，導(dǎo)致性腺發(fā)育存在一定差異。

圖1為對應(yīng)樣本中各年齡的數(shù)量組成，樣本顯示秀麗高原鰍種群主要為2～3齡魚，樣本種群處于成長期，低齡魚類為優(yōu)勢種群魚類，屬于增長型種群結(jié)構(gòu)，得益于樣本采集地良好的水生生態(tài)環(huán)境，以及較弱的捕撈強度。

由圖2可知，在樣本中鑒定出的2～6齡魚，發(fā)育到Ⅳ和Ⅴ期的性腺出現(xiàn)率為100%，即秀麗高原鰍2齡即可達到性成熟，樣本中性成熟個體達到50%，且隨著年齡增長，同齡個體達到性成熟的概率相對增大，性成熟有多方面的影響因素，除自身機體神經(jīng)-內(nèi)分泌調(diào)控外，營養(yǎng)影響是重要的因子，通過對秀麗高原鰍進行活體解剖觀察胃部發(fā)現(xiàn)，充塞度達到2級以上的，均能發(fā)現(xiàn)鉤蝦（Gammarus sp.），鉤蝦蛋白質(zhì)含量可達40.01%，鈣、磷含量分別達到6.88%和6.44%，富含甲殼素，攝食鉤蝦可使體色艷麗[7-9]，從樣本采集地寺莊龍?zhí)墩{(diào)查發(fā)現(xiàn)，生境中鉤蝦種群旺盛，為秀麗高原鰍提供了豐沛的動物源性餌料，促進了秀麗高原鰍的性腺發(fā)育，低齡魚中性成熟期胸腹部形態(tài)異常膨大。

樣本個體絕對繁殖力平均為1 928粒，數(shù)量介于233～6 971 粒，其頻率分布見圖3。

個體相對繁殖力平均為420粒/g，比值介于43～1 211粒/g，其數(shù)量分布頻率見圖4。

性腺成熟系數(shù)平均為10.63%，介于1.50%～24.60%，其分布頻率見圖5。

性成熟的雌性秀麗高原鰍樣本中，其性成熟最小型為生殖群體中最小性成熟雌魚體長5.1 cm、空殼質(zhì)量1.4 g、成熟系數(shù)14.20%，與已知的同屬貝氏高原鰍性成熟最小型基本指標一致。但樣本總體平均明顯低于其平均水平33.31%；同樣也低于葉爾羌高原鰍性成熟系數(shù)17.30%。

樣本中絕對繁殖力平均顯著少于貝氏高原鰍（2 519粒），同時少于葉爾羌高原鰍（28 716粒），以及相對繁殖力也顯著低于貝氏高原鰍（540.61粒/g），同時低于葉爾羌高原鰍（2 310粒/g）。

秀麗高原鰍成熟系數(shù)較低，根據(jù)成熟系數(shù)以衡量性腺發(fā)育程度和魚體能量在性腺和軀體之間比例的重要指標來看，秀麗高原鰍個體小，但由于生境水溫較低（生境與鉤蝦餌料豐度一致），即使餌料豐富，產(chǎn)地生境保護完善，親體的能量也只能以一定的比例轉(zhuǎn)化為性腺，也是對良好生境的進化適應(yīng)。endprint

2.2 卵巢發(fā)育周年變化

Ⅰ期卵巢相連為一個整體，分別貼于腹腔內(nèi)壁左右，細線狀難以辨別雌雄：

（1）Ⅱ期卵巢扁帶狀，肉眼尚看不清卵粒，為性腺正發(fā)育中的性未成熟或產(chǎn)后恢復(fù)階段。

（2）Ⅲ期卵巢：卵巢體積較大，肉眼可看清卵粒，但卵粒還難以從卵巢隔膜上分離剝落，卵黃開始沉積。

（3）Ⅳ期卵巢：整個卵巢很大，占據(jù)腹腔的大部分空間，卵巢呈淡黃色或深黃色，血管十分發(fā)達，卵巢膜具有彈性，卵粒內(nèi)充滿卵黃，大而飽滿。

（4）Ⅴ期卵巢：輕壓腹部即有成熟卵流出，卵巢松軟。

圖6為樣本卵巢周年發(fā)育形態(tài)。通過活體樣本解剖并觀察卵巢形態(tài)，發(fā)現(xiàn)4、6、8、11月的卵巢均有處于繁殖前夕的V期，但5、7、9、12月均出現(xiàn)卵巢產(chǎn)卵前處于發(fā)育期的Ⅳ期卵，說明其繁殖時間分散，產(chǎn)卵不徹底，一次并未產(chǎn)完成熟卵，推測屬于不完全同步、分批產(chǎn)卵的Ⅵ期卵巢類型，已產(chǎn)完卵的卵巢中有不同時相的Ⅲ、Ⅳ期卵母細胞，排出卵的空濾泡膜并不多，卵巢退化到Ⅲ期，又向Ⅳ期發(fā)育。分批不同步產(chǎn)卵類型的魚類，繁殖期延續(xù)一段時間，說明高原環(huán)境每年有較長的時間適合這些魚類產(chǎn)卵繁殖，采取分散在長時間內(nèi)分批產(chǎn)完全部成熟卵粒的策略，是繁殖的環(huán)境要求與生境相適應(yīng)的需要。

通過對樣本卵巢組織顯微觀察（圖7），初級卵母細胞小生長期（a），細胞呈多角形，細胞質(zhì)嗜堿性；大生長期的初級卵母細胞（b），細胞質(zhì)為弱嗜堿性，出現(xiàn)液泡和少量卵黃顆粒；晚期的初級卵母細胞（c），體積增大，輻射帶增厚，卵黃顆粒幾乎充滿核外空間，細胞質(zhì)嗜堿性，細胞核極化；次級卵母細胞（圖8）有明顯的極化現(xiàn)象，核膜溶解，細胞掉到卵巢腔中或排出。

3 結(jié)論

野生秀麗高原鰍群體個體較小，低齡即可性成熟，與鯉科大部分魚類相比較，其懷卵量相對較少，群體周年補充量較少，對外部影響的應(yīng)激反應(yīng)相對敏感；雌魚性腺發(fā)育存在分批不同步現(xiàn)象，人工干預(yù)繁殖難度較大，在對物種開展保護的過程中，應(yīng)慎重進行群體異地遷移。

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