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    酒精性肝損傷大鼠模型血脂水平動(dòng)態(tài)變化及烏藥的干預(yù)研究*

    2017-11-20 13:40:27王軍偉陳英俊余力丁慧珍譚明明樓招歡
    浙江中醫(yī)雜志 2017年11期
    關(guān)鍵詞:烏藥灌胃酒精性

    王軍偉陳英俊余力丁慧珍譚明明樓招歡

    1浙江省天臺(tái)縣人民醫(yī)院浙江天臺(tái)317200

    2浙江中醫(yī)藥大學(xué)浙江杭州310053

    酒精性肝損傷大鼠模型血脂水平動(dòng)態(tài)變化及烏藥的干預(yù)研究*

    王軍偉1陳英俊1余力1丁慧珍1譚明明1樓招歡2#

    1浙江省天臺(tái)縣人民醫(yī)院浙江天臺(tái)317200

    2浙江中醫(yī)藥大學(xué)浙江杭州310053

    目的:觀察酒精性肝損傷大鼠模型血脂的動(dòng)態(tài)改變以及烏藥的干預(yù)作用。方法:采用SD大鼠灌胃給予體積濃度50%的白酒,每日1次,灌胃容積1.2ml/100g,連續(xù)33d建立酒精性肝損傷模型,造模的同時(shí)灌胃給予烏藥不同提取物。分別于給藥第14d、第21d及末次給藥并禁食12h后,眼眶靜脈叢取血,離心制備血清,全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定大鼠血清TC、TG含量。結(jié)果:模型組TC、TG顯著升高;動(dòng)態(tài)觀察顯示模型組血清TC、TG含量早中期逐漸升高,第3周達(dá)高峰,后期回落;較之模型組,烏藥組的血清TC、TG含量均顯著下降,烏藥醇提取物組、烏藥醇提取物石油醚萃取物組及烏藥醇提取物正丁醇萃取物組對(duì)TC下降較優(yōu),而烏藥醇提取物組及烏藥醇提取物石油醚萃取物組對(duì)TG下降較優(yōu)。結(jié)論:酒精性肝損傷大鼠模型血脂動(dòng)態(tài)改變規(guī)律為先升高后降低,第3周末血脂達(dá)高峰;烏藥可以抑制酒精引起的高脂血癥。

    酒精性肝損傷血脂烏藥大鼠實(shí)驗(yàn)研究

    肝功能異常往往會(huì)并發(fā)血脂異常,而治療后隨著肝功能的恢復(fù),血脂水平隨之下降。烏藥為傳統(tǒng)理氣中藥,有調(diào)節(jié)胃腸道、保肝、抗炎、降脂等作用。本研究在既往工作[1]的基礎(chǔ)上,觀察酒精性肝損傷大鼠模型血脂的動(dòng)態(tài)改變,以及烏藥的干預(yù)作用。

    1 材料

    1.1 動(dòng)物:健康SD大鼠,雌性,體重180~220g,88只,購(gòu)自浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):0016074。

    1.2 藥品與試劑:烏藥,浙江紅石梁集團(tuán)天臺(tái)山烏藥生物工程有限公司提供,參考文獻(xiàn)[1]方法得各種提取物,即烏藥水提取物(WYSTW)、烏藥醇提取物(WYCTW)、烏藥醇提取物石油醚萃取物(WYCTC1)、烏藥醇提取物乙酸乙酯萃取物(WYCTC2)、烏藥醇提取物正丁醇萃取物(WYCTC3)。陽(yáng)性對(duì)照藥:思密達(dá)(浙江萬(wàn)邦藥業(yè)股份有限公司,批號(hào):02130121)。白酒:紅星二鍋頭酒(酒精度52%),2.0L/瓶,北京紅星股份有限公司。與雙蒸水按一定體積比例稀釋,酒精體積分?jǐn)?shù)為50%。TC試劑盒,批號(hào)20140723;TG試劑盒,批號(hào)20140804,均購(gòu)于寧波美康生物科技股份有限公司。

    1.3 儀器:TBA-40FR全自動(dòng)生化儀,日本東芝醫(yī)療系統(tǒng)株式會(huì)社。

    2 方法

    2.1 實(shí)驗(yàn)方法:選取健康雌性SD大鼠88只,隨機(jī)分為8組,每組11只,即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(思密達(dá)0.9g/kg)、烏藥水提物(WYSTW)組、烏藥醇提物(WYCTW)組、烏藥石油醚萃取物(WYCTC1)組、烏藥乙酸乙酯萃取物(WYCTC2)組、烏藥正丁醇萃取物(WYCTC3)組。所有大鼠均給予基礎(chǔ)飼料,自由采食飲水。除正常對(duì)照組(以等體積的蒸餾水灌胃)外,其余各組大鼠均灌胃給予濃度為50%(v/v)的白酒,每日1次,灌胃容積1.2ml/100g,連續(xù)33d。自造模第l天起,除正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服蒸餾水外,其余各給藥組分別灌胃給予相應(yīng)的藥物,4g/kg,每日1次,灌胃容積為1ml/100g體重,連續(xù)33d。分別于給藥第14d、第21d及末次給藥并禁食12h后,眼眶靜脈叢取血,離心制備血清,全自動(dòng)生化分析儀分別測(cè)定大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。

    2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±s表示,用單因素方差分析,兩組間比較方差齊性用LSD方法檢驗(yàn),方差不齊用Dunnett檢驗(yàn)。

    3 結(jié)果

    3.1 酒精性肝損傷模型大鼠TC含量的動(dòng)態(tài)變化及烏藥干預(yù)后變化:與正常對(duì)照組相比,造模14d、21d、33d的TC含量均顯著升高,尤以21d時(shí)達(dá)到最高水平,模型對(duì)照組大鼠21d、33d的TC含量與正常組相比有顯著性差異(P<0.01)。與模型對(duì)照組相比,給藥第21d,WYSTW、WYCTW、WYCTC1、WYCTC2及WYCTC3組大鼠血清TC含量均明顯降低(P<0.05或0.01);給藥第33d,WYCTW、WYCTC1及WYCTC3組大鼠血清TC含量明顯降低(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表1。

    表1 烏藥不同提取部位對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血清TC含量的影響(±s)

    表1 烏藥不同提取部位對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血清TC含量的影響(±s)

    注:與正常對(duì)照組比較,#P<0.05,##P<0.01;與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

    組別TC(mmol/L)給藥33d 1.07±0.23 1.54±0.37##1.37±0.19 1.34±0.23 1.17±0.21*1.05±0.16**1.34±0.36 1.22±0.15*正常對(duì)照組模型對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組WYSTW組WYCTW組WYCTC1組WYCTC2組WYCTC3組給藥14d 1.43±0.28 1.52±0.23 1.50±0.43 1.66±0.18 1.56±0.37 1.55±0.43 1.58±0.31 1.55±0.27給藥21d 1.45±0.21 1.87±0.35##1.42±0.27**1.62±0.21*1.49±0.25**1.52±0.39*1.59±0.36*1.51±0.17**

    3.2 酒精性肝損傷模型大鼠TG含量的動(dòng)態(tài)變化及烏藥干預(yù)后變化:與正常對(duì)照組相比,造模14d、21d、33d的TG含量均顯著升高,尤以21d時(shí)達(dá)到最高水平,模型對(duì)照組大鼠14d、21d、33d的TG含量與正常組相比有顯著性差異(P<0.05或0.01)。與模型對(duì)照組相比,給藥第14d及第21d,WYCTW、WYCTC1、WYCTC2及WYCTC3組大鼠血清TG含量均明顯降低(P<0.05或0.01);給藥第33d,各給藥組大鼠血清TG含量均明顯降低(P<0.05或0.01)。見(jiàn)表2。

    表2 烏藥不同提取部位對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血清TG含量的影響(±s)

    表2 烏藥不同提取部位對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血清TG含量的影響(±s)

    注:與正常對(duì)照組比較,#P<0.05,##P<0.01;與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01。

    給藥33d 0.35±0.07 0.55±0.17#0.41±0.08*0.37±0.08*0.34±0.06**0.33±0.10**0.40±0.11*0.41±0.07*組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組陽(yáng)性對(duì)照組WYSTW組WYCTW組WYCTC1組WYCTC2組WYCTC3組TG(mmol/L)給藥14d 0.53±0.13 0.83±0.20##0.70±0.18 0.74±0.19 0.54±0.11**0.54±0.12**0.63±0.16**0.66±0.11**給藥21d 0.72±0.18 1.19±0.32##1.12±0.21 1.10±0.31 0.76±0.14**0.87±0.23**0.86±0.16**0.99±0.12*

    4 討論

    酒精性肝損傷致血脂異常及脂肪肝的機(jī)理與以下病理生理過(guò)程有關(guān):當(dāng)酒精進(jìn)入肝細(xì)胞后,在乙醇氧化酶系統(tǒng)作用下轉(zhuǎn)變?yōu)橐胰?,進(jìn)而再次氧化轉(zhuǎn)變成乙酸,此過(guò)程使輔酶不斷轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原型輔酶,兩者比例的改變抑制線粒體內(nèi)的三羧酸循環(huán),導(dǎo)致脂肪氧化減弱,肝內(nèi)脂肪酸的合成增多,引起甘油三酯合成增多,導(dǎo)致血甘油三酯水平上升和脂肪肝的形成。膽固醇的最終代謝產(chǎn)物是膽汁酸,而膽汁酸僅在肝臟合成,在肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)微粒體酶的作用下,膽固醇在肝內(nèi)逐步轉(zhuǎn)化成膽汁酸,肝功能受損時(shí),肝臟脂肪代謝出現(xiàn)紊亂,膽固醇降解成膽汁酸的過(guò)程受阻,從而導(dǎo)致血膽固醇升高[1]。

    研究結(jié)果表明,酒精性肝損傷模型大鼠TC、TG顯著升高,動(dòng)態(tài)觀察顯示模型組血清TC、TG含量早中期逐漸升高,第3周達(dá)高峰,后期回落,與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2]??紤]早中期血脂升高與肝功能受損相關(guān),而后期回落可能與大鼠老化及肝功能受損后進(jìn)食量減少有關(guān),有待進(jìn)一步論證。較之模型組,烏藥組的血清TC、TG含量均有顯著下降。比較烏藥不同提取物對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血脂生化指標(biāo)的影響,可得出烏藥醇提取物調(diào)節(jié)血脂作用優(yōu)于水提取物(藥效作用時(shí)間久,效果穩(wěn)定);醇提取物三個(gè)萃取部位作用比較后,烏藥醇提石油醚萃取物效果最優(yōu),藥效作用依次為:烏藥醇提石油醚萃取物>醇提正丁醇萃取物>醇提乙酸乙酯萃取物。

    [1] 王美娟,王軍偉,吳人照,等.烏藥不同提取物對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠血脂的影響[J].浙江中醫(yī)雜志,2014,49(6):457-458.

    [2] 趙敏,楊杏芬,黃俊明,等.小鼠酒精性肝損傷模型的動(dòng)態(tài)研究[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2005,21(9):1101-1102.

    國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目基于“腸-肝軸”的烏藥抗慢性酒精性肝損傷的作用機(jī)制研究,編號(hào):81503328;浙江省科技計(jì)劃項(xiàng)目烏藥抗酒精性肝損傷有效部位研究,編號(hào):2016C33184;浙江省醫(yī)藥衛(wèi)生科技計(jì)劃項(xiàng)目烏藥不同提取物對(duì)慢性酒精性肝損傷模型大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的干預(yù)作用,編號(hào):2015DTA021;臺(tái)州市科技計(jì)劃項(xiàng)目烏藥對(duì)急性酒精性肝損傷模型大鼠腸源性內(nèi)毒素血癥的干預(yù)作用,編號(hào):2014A33339

    #通訊作者:樓招歡,E-mail:lou_jasmine@163.com

    2017-04-12

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