白癜風(fēng)皮損浸潤T細胞亞群的研究進展

戴遠洋+宋鵬飛+王京

摘要：白癜風(fēng)是一種常見獲得性、進展性、色素脫失性皮膚病，本病為因表皮黑素細胞被破壞導(dǎo)致的皮膚黏膜白斑，進展可造成毛發(fā)的色素脫失。關(guān)于白癜風(fēng)發(fā)病的機制存在多種學(xué)說，其中以T淋巴細胞介導(dǎo)的細胞免疫學(xué)說最為人接受。T細胞是在胸腺中發(fā)育成熟的淋巴細胞，主要介導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答。近年關(guān)于白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)T細胞亞群的研究主要集中在CD8+T細胞、CD4+T細胞、Th17細胞和調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）等。這些細胞在功能和（或）數(shù)量的變化，與白癜風(fēng)病情的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系。

關(guān)鍵詞：白癜風(fēng)；自身免疫疾病；細胞免疫；T細胞；T細胞亞群

中圖分類號：R758.4+1 文獻標識碼：A 文章編號：1006-1959（2017）21-0020-03

Advances in the Study of Infiltrating T Cell Subsets in Skin Lesions of Vitiligo

DAI Yuan-yang1，SONG Peng-fei2，WANG Jing2

（1.Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，Guangdong，China；

2.The Eighth Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University，Shenzhen 518000，Guangdong，China）

Abstract：Vitiligo is a common acquired，progressive，depigmentation of the skin，the skin leukoplakia disease is due to melanocytes destruction，can cause hair depigmentation progress.Mechanism of vitiligo has many kinds of theories，the theory of cellular immunity mediated by T lymphocytes is the most accepted.T cell is a mature cell development in the thymus，mainly mediated by cellular immunity.Recent studies related to T cell subsets on the pathogenesis of vitiligo is mainly focused on CD8+T cells，CD4+T cells，Th17 cells and regulatory T cells（Treg）.These cells in function and（or）the number of change is closely related with the occurrence and development of vitiligo disease.

Key words：Vitiligo；Autoimmune diseases；Cellular immunity；T cells；T lymphocyte subsets

白癜風(fēng)是一種以進行性的色素脫失為主要特征的一類常見皮膚病。我國發(fā)病率在0.1%～2.7%， 多于兒童期或青年期發(fā)病，50%的患者發(fā)病年齡在20歲以內(nèi)，25%的患者發(fā)病小于14歲[1]。具體發(fā)病機制尚不清楚，大量研究表明，細胞免疫在白癜風(fēng)的發(fā)病機制中起著重要的作用，且以T淋巴細胞參與的細胞免疫研究最為突出[2]。T細胞是皮膚細胞免疫的主要效應(yīng)細胞，臨床上觀察到白癜風(fēng)患者常有皮損區(qū)T細胞及其亞群的數(shù)量和功能的變化。為進一步探究白癜風(fēng)發(fā)病與T細胞亞群的關(guān)系，復(fù)習(xí)近年文獻，現(xiàn)將相關(guān)研究進展總結(jié)如下。

1 白癜風(fēng)與CD8+T 細胞

CD8+T細胞效應(yīng)受自身主要組織相容性復(fù)合物（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類分子的限制，進一步刺激活化為細胞毒性T細胞，可特異性殺傷黑素細胞，在白癜風(fēng)發(fā)病中占有重要的地位。

在白癜風(fēng)皮損區(qū)，皮膚黑素細胞喪失的同時，常伴隨CD8+T淋巴細胞的浸潤，白癜風(fēng)患者皮損區(qū)CD8+T淋巴細胞數(shù)量、CD8+/CD4+比值均高于對照組[3]。在白癜風(fēng)患者皮損處進行皮膚活檢發(fā)現(xiàn)：皮損中T細胞比率高于非皮損處，主要由CD8+T細胞和少量CD4+T細胞組成，大多存在于色素消退的邊緣，并同時存在CD8+T/CD4+T比值升高[4]。Vanden等[5]利用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀察到CD8+T淋巴細胞浸潤到白癜風(fēng)皮損區(qū)表皮及真皮層，致使表-真皮連接受到損害及黑素細胞的丟失，直觀地論證了CD8+T淋巴細胞在白癜風(fēng)發(fā)病中起重要作用。

進一步觀察發(fā)現(xiàn)，皮膚歸巢細胞毒性T細胞（skin-homing cytotoxic T cells，即CD8+-CLA+T 細胞）在白癜風(fēng)患者外周血中明顯減少[6]。當(dāng)CD8+細胞毒性 T 淋巴細胞表達 CLA 時，在白癜風(fēng)皮損邊緣的表皮及真皮中CD8+-CLA+T 細胞明顯增加。在針對 Melan-A/MART1、酪氨酸酶及特異性細胞毒性T細胞反應(yīng)的血液檢測中發(fā)現(xiàn)，所有患者循環(huán)黑素細胞特異CD8+T細胞以高頻率出現(xiàn)，此類細胞表面表達皮膚歸巢受體（CLA）和IL-2受體，可表達穿孔素和顆粒酶，同時具有破壞黑素細胞以及歸巢能力[7]。

皮損局部浸潤的CD8+T淋巴細胞能特異性識別黑素細胞分化抗原， Mandelcorn-Monson 等[8]發(fā)現(xiàn)CD8+T淋巴細胞對黑素細胞抗原gp100的反應(yīng)性與白癜風(fēng)的活動進展呈正相關(guān)性。Lang等[9]觀察發(fā)現(xiàn)人類白細胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-A2限制性黑素細胞特異性CD8+T 淋巴細胞與白癜風(fēng)的活動進展相關(guān)，可直接針對自身抗原Melan-A/MART-1 產(chǎn)生細胞毒性作用，致使黑素細胞缺失。endprint

此外，通過對白癜風(fēng)患者的相關(guān)血清抗體檢測發(fā)現(xiàn)，抗黑素細胞抗體、抗酪氨酸酶抗體、抗酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1抗體、黑素濃集素受體1（MCHR 1）抗體的水平升高，說明了存在體液免疫的異常 [10]。研究發(fā)現(xiàn)，患者皮損基底膜帶上觀察到IgG和C3的沉積，在培養(yǎng)的黑素細胞中加入IgG會促進疾病的進展[11]。以上過程由CD8+T 淋巴細胞抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用（antibody dependent cell cytotoxicity，ADCC）造成黑素細胞的破壞。

2 白癜風(fēng)與CD4+T細胞

CD4+T 細胞效應(yīng)受 MHCⅡ類分子的限制，活化后即為效應(yīng) Th 細胞，其生物學(xué)作用主要由分泌的細胞因子決定。針對白癜風(fēng)患者行細胞因子檢測，發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)主要是以TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-12為主的Th 1型分泌模式。

IFN-γ通過增加細胞間黏附分子-1（ICAM-1）的表達提高T細胞歸巢能力，同時IFN-γ所誘導(dǎo)產(chǎn)生的CXCL 10可募集和激活T細胞[12]。CXCL 10作為趨化因子，介導(dǎo)Th1型淋巴細胞的歸巢并分泌IFN-γ和TNF-α[13]，這些產(chǎn)物又會促進CXCL 10的產(chǎn)生，從而形成放大環(huán)路。

白癜風(fēng)患者皮膚組織中TNF-α水平與白癜風(fēng)病情活動呈線性相關(guān)[13]。TNF-α通過各種凋亡途徑誘導(dǎo)和破壞黑素細胞并抑制黑素細胞干細胞的分化，提示抗TNF劑（如英夫利昔一類藥物）可能對白癜風(fēng)的治療有效[14]。

白癜風(fēng)患者血清可溶性IL-2 受體表達比正常人群高，病程越短增高越明顯，提示IL-2 的敏感性在早期診斷白癜風(fēng)有重要指示作用[15]。相反，白細胞介素-2 可溶性受體在白癜風(fēng)患者中降低，泛發(fā)型及活動期的白癜風(fēng)患者降低更明顯，可能預(yù)示白癜風(fēng)患者 IL-2 SR 水平與疾病活動的嚴重程度相關(guān)[16]。

3 白癜風(fēng)與 Th17細胞

Th17細胞是CD4+T細胞亞群的一種，可以表達特征性轉(zhuǎn)錄因子ROR-γT并分化成產(chǎn)生IL-17等細胞因子而參與殺傷黑素細胞炎癥反應(yīng)，在白癜風(fēng)的發(fā)病中發(fā)揮作用[17]。有研究證明， 白癜風(fēng)患者血清IL-17水平顯著增高，并且其升高水平與白癜風(fēng)累及面積成正相關(guān)[18]，解釋了皮損區(qū)黑素細胞破壞并伴隨生成減少的現(xiàn)象。

免疫組化發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者皮損邊緣組織中IL-17A mRNA水平表達增強，結(jié)合免疫熒光發(fā)現(xiàn)同時存在IL-17A陽性T細胞的增多，提示白癜風(fēng)患者皮損處黑素細胞缺失與Th17活化相關(guān)，為兩者的聯(lián)系提供了直接的組織學(xué)證據(jù)[19]。

4 白癜風(fēng)與調(diào)節(jié)性 T 細胞

調(diào)節(jié)性T細胞（Treg 細胞）是一類具有負性調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)的T細胞亞群，其免疫調(diào)節(jié)功能與FoxP3的持續(xù)表達密切相關(guān)。 FoxP3是Treg 細胞的一個特殊標記，作為特異性標記物和關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)oxP3通過與染色體結(jié)合調(diào)節(jié)Treg細胞的發(fā)育和功能表達[20]。 RORγt是調(diào)控Th17細胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄激活因子，與FoxP3共同決定了T細胞受抗原刺激后是細胞分化方向，兩者的平衡關(guān)系決定了機體的免疫狀態(tài)。

有研究表明白癜風(fēng)患者FoxP3水平明顯下降 ，提示患者Treg 細胞功能可能發(fā)生損傷。同時有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxP3在白癜風(fēng)患者皮損內(nèi)免疫染色陽性的平均面積百分比和外周血中FoxP3的細胞水平與對照組相比都明顯降低。表明FoxP3表達缺陷可以降低Treg 細胞的功能。

Treg 細胞的免疫負性調(diào)節(jié)作用和通過抑制 CD4+T 細胞和 CD8+T 細胞的活化與增殖實現(xiàn)。Treg 可以分泌具有抑制作用的細胞因子 TGF-β、 IL-10 等，可以抑制多種免疫細胞，達到免疫負調(diào)節(jié)作用。Treg 及其分泌的細胞因子的減少，可增加自身反應(yīng)性 T 細胞的應(yīng)答。

白癜風(fēng)患者皮損區(qū)Treg 細胞的數(shù)量和（或）功能降低下降，對白癜風(fēng)的疾病進展起著重要的作用。其具體作用機制以及表達的相關(guān)產(chǎn)物尚不清楚。

5 總結(jié)

T細胞亞群參與白癜風(fēng)發(fā)病的細胞免疫機制可能包括：多種黑素細胞表面特異性抗原刺激CD8+T等的增殖及活化，使其分泌殺細胞因子，直接導(dǎo)致黑素細胞的凋亡，或可刺激其他免疫細增殖活化進而殺傷黑素細胞。異常增加的Th17和異常減少或功能減退的Treg 細胞，直接削弱了黑素細胞的自身耐受性，并促進了T淋巴細胞對黑素細胞的破壞及誘導(dǎo)其凋亡。近些年，關(guān)于如何確定T淋巴細胞對某一類抗原應(yīng)答時哪一些V基因被取用來研究免疫應(yīng)答，成為一個新的研究領(lǐng)域，有學(xué)者提出可通過免疫組庫方法分析。白癜風(fēng)免疫發(fā)病機制非常復(fù)雜，針對T細胞亞群的進一步研究，對白癜風(fēng)的治療、病情評估等有重要意義。

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