炎癥相關(guān)因子IL—1β、TGF—β及MCP—1在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)變化

蔡宗發(fā)+邵孔健

【摘要】 目的：探究炎癥相關(guān)因子白細(xì)胞介素-1β（IL-1β），轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）及單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）在肝細(xì)胞肝癌（HCC）中的表達(dá)變化。方法：選取2014年10月-2016年12月筆者所在醫(yī)院診治的HCC患者96例作為研究對象，另選取同期體檢正常者40例為對照組研究對象，使用實時熒光定量法檢測96例HCC患者腫瘤組織、癌旁組織及40例體檢正常者正常組織中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表達(dá)，用免疫組織化學(xué)方法檢測96例HCC患者腫瘤組織、癌旁組織及40例體檢正常者正常組織甲醛固定石蠟包埋標(biāo)本中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表達(dá)。結(jié)果：實時熒光定量法檢測結(jié)果顯示，IL-1β、TGF-β及MCP-1在癌旁組織中的表達(dá)顯著高于其在腫瘤組織和正常組織中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，IL-1β、TGF-β及MCP-1三種炎癥相關(guān)因子在正常組織中均為陰性；在HCC腫瘤組織中IL-1β陽性率為8.33%，TGF-β陽性率為6.25%，MCP-1陽性率為10.42%；在HCC癌旁組織中IL-1β陽性率為91.67%，TGF-β陽性率為89.58%，MCP-1陽性率為97.92%。IL-1β、TGF-β、MCP-1在癌旁組織中表達(dá)的陽性率顯著高于腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IL-1β與HCC發(fā)生呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.785，P<0.05）。結(jié)論：IL-1β、TGF-β、MCP-1在HCC癌旁組織中表達(dá)水平較高，且與HCC腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，具有臨床指導(dǎo)意義。

【關(guān)鍵詞】 白細(xì)胞介素-1β； 轉(zhuǎn)化生長因子-β； 單核細(xì)胞趨化蛋白-1； 肝細(xì)胞肝癌

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.25.031 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）25-0060-03

肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種最常見的原發(fā)性肝癌，死亡率高，癌細(xì)胞排列形成實性團(tuán)塊狀，周圍富有擴(kuò)張的血竇[1]。多項動物試驗顯示，腫瘤微環(huán)境與HCC的產(chǎn)生和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，但缺乏臨床研究證實[2]。因此，本研究對2014年10月-2016年12月筆者所在醫(yī)院診治96例的HCC患者的腫瘤組織、癌旁組織及體檢正常者正常組織中的炎癥相關(guān)因子白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）及單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）進(jìn)行檢測，探究其與HCC的產(chǎn)生和轉(zhuǎn)移間的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年10月-2016年12月筆者所在醫(yī)院診治的HCC患者96例作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)病理學(xué)確診為HCC；（2）符合中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；（3）本研究前均未經(jīng)任何手術(shù)治療和藥物治療；（4）經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他惡性腫瘤患者；（2）嚴(yán)重精神疾病患者。其中男58例，女38例；年齡28～73歲，平均（47.93±7.22）歲。另選取同期體檢正常者40例為對照組研究對象，男29例，女11例；年齡29～74歲，平均（48.22±7.71）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

（1）使用實時熒光定量法檢測96例HCC患者腫瘤組織、癌旁組織及40例體檢正常者正常組織中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表達(dá)[4]。（2）使用免疫組織化學(xué)方法檢測96例HCC患者腫瘤組織、癌旁組織及40例體檢正常者正常組織甲醛固定石蠟包埋標(biāo)本中IL-1β、TGF-β及MCP-1的表達(dá)，使用二級評分法評價染色強度：無色表示0分，淡黃色表示1分，棕黃色表示2分，棕褐色表示3分[5]。然后根據(jù)陽性細(xì)胞率評價：無染色或陽性細(xì)胞率<10%表示0分，陽性細(xì)胞率10%～25%表示1分，陽性細(xì)胞率25%～50%表示2分，陽性細(xì)胞率50%～75%表示3分，陽性細(xì)胞率≥75%表示4分。兩者得分相加大于3分表示檢測結(jié)果為陽性，不超過3分表示檢測結(jié)果為陰性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以（x±s）表示，計數(shù)資料以率（%）表示，使用單因素方差比較分析各基因的表達(dá)差異，使用Spearman相關(guān)性分析炎癥相關(guān)因子與HCC發(fā)生的關(guān)系，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腫瘤組織、癌旁組織及正常組織中IL-1β、TGF-β及MCP-1表達(dá)水平比較

實時熒光定量法檢測結(jié)果顯示，IL-1β、TGF-β及MCP-1在癌旁組織中的表達(dá)水平顯著高于其在腫瘤組織和正常組織中的表達(dá)水平，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 腫瘤組織、癌旁組織及正常組織中IL-1β、TGF-β及MCP-1陽性率比較

免疫組織化學(xué)方法分析結(jié)果顯示，IL-1β、TGF-β及MCP-1三種炎癥相關(guān)因子在正常組織中均為陰性；在HCC腫瘤組織中IL-1β陽性8例，陽性率為8.33%，TGF-β陽性6例，陽性率為6.25%，MCP-1陽性10例，陽性率為10.42%；在HCC癌旁組織中IL-1β陽性88例，陽性率為91.67%，TGF-β陽性86例，陽性率為89.58%，MCP-1陽性94例，陽性率為97.92%。癌旁組織IL-1β，TGF-β、MCP-1陽性率顯著高于腫瘤組織，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.3 Spearman相關(guān)性分析IL-1β與HCC發(fā)生的關(guān)系

Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示，IL-1β在肝組織中表達(dá)較高時，其相應(yīng)組織中表達(dá)陽性率也顯著提高，IL-1β與HCC發(fā)生呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.785，P<0.05）。endprint

3 討論

多項臨床研究顯示，慢性炎癥是誘發(fā)肝臟腫瘤的重要因素，而病毒性肝炎和酒精性肝炎導(dǎo)致的肝臟慢性炎癥是肝臟損傷修復(fù)的重要機制，HCC腫瘤微環(huán)境中纖維母細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞等基質(zhì)細(xì)胞在修復(fù)肝臟的同時也可導(dǎo)致一些副作用產(chǎn)生（如肝硬化等）[6-8]。臨床研究證實肝臟中基質(zhì)細(xì)胞可以通過分泌IL-1β、TGF-β、MCP-1等炎癥相關(guān)因子導(dǎo)致肝癌發(fā)生和轉(zhuǎn)移[9-10]。

本研究結(jié)果顯示，正常組織中IL-1β、TGF-β、MCP-1的表達(dá)均不能被檢測到，顯示正常情況下基因轉(zhuǎn)錄處于低水平。IL-1β、TGF-β、MCP-1在HCC患者表達(dá)水平較高，實時熒光定量法分別檢測HCC患者腫瘤組織和癌旁組織結(jié)果顯示，癌旁組織中IL-1β、TGF-β及MCP-1中的表達(dá)顯著高于其在腫瘤組織和正常組織中的表達(dá)（P<0.05）。病理分析結(jié)果顯示癌旁組織中包含變形肝細(xì)胞組成的假小葉組織和大量浸潤的炎癥細(xì)胞，說明癌旁組織既可以通過浸潤細(xì)胞為機體提供腫瘤免疫，抵抗腫瘤侵襲，還可以通過基質(zhì)細(xì)胞為腫瘤組織提供豐富的血管保障[11-12]。而IL-1β、TGF-β、MCP-1就是決定癌旁組織這種兩面性的重要細(xì)胞因子，與腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[13]。本研究進(jìn)一步探究發(fā)現(xiàn)IL-1β與HCC患者體內(nèi)肝細(xì)胞的增殖正相關(guān)（r=0.785，P<0.05），IL-1β在肝組織中表達(dá)較高時，其相應(yīng)組織中表達(dá)陽性率也顯著提高。

綜上所述，IL-1β、TGF-β、MCP-1炎癥相關(guān)因子在HCC患者癌旁組織中表達(dá)水平較高，可將其作為預(yù)測HCC和術(shù)后復(fù)發(fā)的參考指標(biāo)。

參考文獻(xiàn)

[1]吳林，宦宏波，吳黎靂，等.炎癥因子與肝癌干細(xì)胞標(biāo)志在肝癌誘導(dǎo)過程中的相關(guān)性研究[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2014，18（7）：1-6.

[2]宋培軍，劉會春，周磊，等.原發(fā)性肝癌患者血清IGF-Ⅱ、TGF-β1及IL-10的檢測及意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（24）：4040-4042.

[3]張志強，賀杰峰，張瑜，等.大鼠實驗性肝癌組織中Treg細(xì)胞與TGF-β1、IL-10水平的相關(guān)性分析[J].中華普通外科雜志，2014，29（5）：382-384.

[4]張偉德，李光學(xué)，馬銳，等.肝癌患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg與IL-2IL-10TGF-β表達(dá)的動態(tài)觀察及臨床意義[J].重慶醫(yī)學(xué)，2015，12（16）：2264-2266.

[5]商景榮，余勇豪，占必興，等.外周血IL-6、TGF-β1在肝癌患者無水酒精治療前后的變化[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，18（12）：1711-1714.

[6]曹瑞琪，盧新蘭，任牡丹，等.鹽酸青藤堿誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞凋亡及其對IL-1β，TNF及C/EBPβ水平的影響[J].西安交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2017，38（2）：290-294.

[7]劉芃芃，陳永孜，任秀寶，等.肝細(xì)胞肝癌NTS的表達(dá)與炎癥微環(huán)境形成和腫瘤上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及預(yù)后的相關(guān)性研究[J].中國腫瘤臨床，2013，40（19）：1150-1154.

[8]曹令平，涂利寬，吳小翎.西奧骨化醇抑制TGF-β1誘導(dǎo)的肝癌細(xì)胞SMMC-7721上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2017，39（1）：42-47.

[9]鄧歡，周珍珍，黃煥軍，等.AEG1促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2分泌細(xì)胞因子IL-6、IL-1β的實驗研究[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2013，22（7）：620-623.

[10]石波云，周新科，何璐，等.TGF-β受體1在肝癌組織中的表達(dá)及意義[J].廣東醫(yī)學(xué)，2015，36（15）：2397-2399.

[11]田葉，林志娟，孫萍，等.分泌型小鼠IL-1β表達(dá)載體促進(jìn)Hepa1-6肝癌細(xì)胞的增殖和遷移[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2012，28（5）：488-491.

[12]宮琳.炎癥相關(guān)重要分子與肝細(xì)胞癌預(yù)后的相關(guān)性研究[D].北京：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院，2014.

[13]朱玉峰，祁明，于曉東，等.肝細(xì)胞癌中轉(zhuǎn)化生長因子β激酶1、核因子-κB和P53的表達(dá)[J].中國老年學(xué)，2016，36（17）：4246-4247.

（收稿日期：2017-05-07）endprint