微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應(yīng)用

劉金榮

【摘要】 目的：探討微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應(yīng)用效果。方法：回顧性分析選取的40例ABO-HDN患兒的臨床資料，隨機(jī)取10份ABO同型紅細(xì)胞制劑的血樣，分別采用凝聚胺技術(shù)以及微柱凝膠技術(shù)開展主側(cè)交叉配血，對兩種配血方法的效果進(jìn)行評估，同時對兩種配血方法同直抗試驗的相關(guān)性進(jìn)行評估。結(jié)果：交叉配血共200次，微柱凝膠技術(shù)血清、放散液分別出現(xiàn)不和148、124次，凝聚胺技術(shù)血清、放散液分別出現(xiàn)不和6、10次。除凝聚胺交叉配血外，直抗陽性的血清和放散液交叉配血不合率高于直抗陰性（P<0.05）。兩種檢測技術(shù)在患兒血清和放散液交叉配血結(jié)果中比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（Kappa=0.019，P=0.300；Kappa=0.058，P=0.083），微柱凝膠技術(shù)靈敏度更高。結(jié)論：對新生兒開展輸血前檢查工作時，采用直接抗人球試驗進(jìn)行檢測十分重要，且微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應(yīng)用效果顯著，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 微柱凝膠技術(shù)； ABO； 新生兒溶血癥

【Abstract】 Objective：To investigate the application effect of microcolumn gel technique in pre-transfusion test of neonatal hemolytic disease in children with ABO.Method：40 patients with ABO-HDN were selected，the clinical data of the selected subjects were analyzed retrospectively，10 samples of ABO erythrocyte preparation were randomly selected，using polybrene technique and microcolumn gel technology to carry out the main side of cross matching，the effects of the two methods were evaluated，at the same time，two kinds of matching methods with direct correlation between resistance test were evaluated.Result：Cross matching of blood 200 times，the serum and elution liquid appeared 148 times and 124 times respectively with microcolumn gel technique，polybrene technique in serum and elution liquid respectively with 6，10 times.In addition to the crossed blood of the coagulation amine，direct antibody positive serum and elution liquid crossmatching incompatibility were higher than those of direct negative resistance（P<0.05）.Comparison of two kinds of detection in serum and elution crossmatch results， there were no significant differences（Kappa=0.019，P=0.300；Kappa=0.058，P=0.083）.Microcolumn gel technique in higher sensitivity.Conclusion：To carry out inspection work on neonatal before transfusion，using direct antiglobulin test detection is very important，and the effect of microcolumn gel technique in the pre-transfusion test of neonatal hemolytic children with ABO is significant，it is worthy of clinical application.

【Key words】 Microcolumn gel technique； ABO； Neonatal hemolytic disease

First-authors address：Hanchuan Peoples Hospital，Hanchuan 432300，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.21.018

由于母源性的IgG抗體輸入到胎兒體內(nèi)，同胎兒機(jī)體內(nèi)的溶血性抗體產(chǎn)生針對性，則可能引發(fā)胎兒出現(xiàn)溶血病。從另一角度來看，胎兒在分娩后，其自身的免疫系統(tǒng)尚不完善，其機(jī)體內(nèi)通常情況下不存在抗-A或者是抗-B，因此在對其開展血型鑒定時，對于反定型結(jié)果可不予考慮[1]。同時新生兒機(jī)體內(nèi)的紅細(xì)胞表面所具有的血型抗原相較于成年人，其具有的表達(dá)強(qiáng)度也更低，故對新生兒應(yīng)開展針對性的血型鑒定以及輸血策略，不應(yīng)同成年人一概而論，比如在對新生兒是否患有溶血癥進(jìn)行診斷時，不應(yīng)該以和患兒血型同型的輸血或換血原則，而是應(yīng)該以相容性的原則[2]。IgG抗體可存在于游離血清中，同時也能夠和溶血病患兒體內(nèi)的紅細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，所以在對溶血病進(jìn)行診斷時，需要對患兒體內(nèi)是否存在IgG抗體進(jìn)行檢測，所采用的診斷試驗包括三部分，分別為直接抗人球蛋白試驗、游離血清以及抗體釋放實驗[3]。雖然目前國際輸血指標(biāo)通常將嬰兒按照年齡是否超過4個月劃分為不同的輸血年齡段，采取相應(yīng)的輸血策略，不過在我國卻并未作出明確的規(guī)定，大部分臨床醫(yī)生如診斷出新生兒存在貧血癥狀，在對其制定治療措施時，主要依靠同型輸血原則，同時以此為其開展相應(yīng)的輸血前檢驗，并未對患兒是否存在溶血病進(jìn)行有效的檢驗和診斷[4]。在對新生兒開展輸血操作前，對其進(jìn)行相應(yīng)的檢驗工作，可對其機(jī)體內(nèi)的抗A或是抗B進(jìn)行有效的診斷，但該類診斷主要通過交叉配血檢測來完成，其具備的準(zhǔn)確性很大程度上受到配血方法靈敏度的影響，因此做好輸血前的檢驗工作，對于新生兒的輸血過程的安全保障具有重要作用[5]。本次研究將2015年1月-2016年1月設(shè)定為研究時間段，取該時期內(nèi)本院收治的ABO-HDN患兒40例，探討微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應(yīng)用效果，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。endprint

1 資料與方法

1.1 一般資料 本次研究將2015年1月-2016年1月設(shè)定為研究時間段，取該時期內(nèi)本院收治的ABO-HDN患兒40例，均開展溶血病3項試驗，最終病情得以明確診斷。其中男20例，女20例，出生時間最短為1 d，最長為4 d，平均（2.3±0.5）d。

1.2 方法 回顧性分析本次研究入選患兒的臨床資料，包括其一般資料以及3項診斷試驗（直接抗人球蛋白試驗、游離血清以及抗體釋放實驗）資料，并隨機(jī)取10份ABO同型紅細(xì)胞制劑的血樣以及其血清和紅細(xì)胞放散液，進(jìn)行主側(cè)交叉配血，血樣納入標(biāo)準(zhǔn)為：通過對血型開展復(fù)查，結(jié)果顯示正反定保持一致，正定所具有的凝集強(qiáng)度在3+及以上，反定所具備的凝集強(qiáng)度在2+及以上。采用微柱凝膠法（美國Gceoped Lokka fromcsico 抗人球蛋白卡）和凝聚胺介質(zhì)（上海閣侖美有限責(zé)任公司）兩種交叉配血方法開展檢測，在進(jìn)行檢測操作時，操作步驟按照試劑說明書嚴(yán)格進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 四個表計數(shù)資料采取Pearson卡方檢驗或Fisher精確檢驗；交叉配血結(jié)果采用Kappa一致性檢驗，如K<0，則一致性極差，0～0.20為微弱，0.21～0.40為弱，0.41～0.60為中度，0.61～0.80為高度，0.81～1.00為極強(qiáng)。

2 結(jié)果

2.1 配血結(jié)果 交叉配血共200次，微柱凝膠技術(shù)血清、放散液分別出現(xiàn)不和148、124次，凝聚胺技術(shù)血清、放散液分別出現(xiàn)不和6、10次，見表1。

2.2 直抗類型與交叉配血結(jié)果 除凝聚胺交叉配血外，直抗陽性的血清和放散液交叉配血不合率高于直抗陰性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），見表2。

2.3 血清交叉配血結(jié)果比較 兩種檢測技術(shù)的血清交叉配血結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Kappa=0.019，P=0.300），見表3。

2.4 放散液交叉配血結(jié)果比較 兩種檢測技術(shù)的放散液交叉配血結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Kappa=0.058，P=0.083），見表4。

3 討論

IgG抗體可存在于游離血清中，同時也能夠和溶血病患兒體內(nèi)的紅細(xì)胞進(jìn)行結(jié)合，所以在對溶血病進(jìn)行診斷時，需要對患兒體內(nèi)是否存在IgG抗體進(jìn)行檢測，所采用的診斷試驗包括三部分，分別為直接抗人球蛋白試驗、游離血清以及抗體釋放實驗[6]。在對溶血病患兒開展輸血前，對其開展的交叉配血檢查內(nèi)容需包含其游離血清以及紅細(xì)胞放散液，這是由于對患兒的游離血清開展交叉配血，可對其血液中所具有的溶血性抗體，同進(jìn)行輸注的紅細(xì)胞之間的不相容性進(jìn)行有效的反映，對患兒的放散液開展交叉配血試驗，能夠?qū)純簷C(jī)體內(nèi)的結(jié)合于細(xì)胞上的溶血性抗體，同進(jìn)行輸注的紅細(xì)胞之間的不相容性進(jìn)行有效的反映[7-9]。通過本次研究結(jié)果中的表1可以發(fā)現(xiàn)，僅開展血清交叉配血試驗，可對74%的患兒中存在的配合不合進(jìn)行有效檢測，通過開展血清聯(lián)合放散液進(jìn)行交叉配血試驗，可對79%的患兒中存在的配合不合進(jìn)行有效檢測，也說明了在對ABO-HDN患兒開展輸血前檢測時，將患兒的血清以及其放散液進(jìn)行聯(lián)合檢測是有必要的，可使得患兒的交叉配血的安全性得以有效提高[10]。從另一方面來看，每個患兒由于自身機(jī)體存在的差異，導(dǎo)致其機(jī)體具有的紅細(xì)胞血型抗原表達(dá)強(qiáng)度存在著差異，同時其機(jī)體內(nèi)由于被動輸入而存在的溶血性抗體的數(shù)量以及溶血性抗體的性質(zhì)也存在著不同程度的差異，所以在對患兒開展交叉配血檢測時，其檢測的準(zhǔn)確性會明顯的受到所采用的配血方法所具有的靈敏度的影響[11-12]。雖然目前臨床上主要推薦應(yīng)用抗球蛋白技術(shù)，但在我國實際的臨床應(yīng)用過程中，采用的凝聚胺技術(shù)可取得何種效果，仍舊有著較大的爭議[13]。通過本次研究結(jié)果顯示，在對ABO-HDN陽性患兒血清開展檢測時，相較于凝聚胺技術(shù)，微柱凝膠技術(shù)所具備的準(zhǔn)確率明顯更高（74% vs 3%），在對ABO-HDN陽性患兒放散液開展檢測時，相較于凝聚胺技術(shù)，微柱凝膠技術(shù)所具備的準(zhǔn)確率明顯更高（62% vs 5%），同時在對患兒的血清以及放散液開展檢測時，兩種檢測方法并未出現(xiàn)陰性或陽性檢測結(jié)果不一致的情況，由此可知，微柱凝膠技術(shù)所具備的檢測靈敏度明顯更高，因此在對存在溶血病的患兒開展輸血前檢測時，微柱凝膠技術(shù)明顯優(yōu)于凝聚胺技術(shù)[14]。不過需要注意一點(diǎn)，即便應(yīng)用了微柱凝膠技術(shù)，也不能確保檢測的準(zhǔn)確率達(dá)到100%，提示在對可能存在溶血病的患兒開展檢測時，如果采用了和患兒具有同型的紅細(xì)胞制劑，則還是仍有可能發(fā)生交叉配血不合漏檢，所以臨床檢驗中不能將交叉配血試驗結(jié)果呈陰性作為檢測的金標(biāo)準(zhǔn)[15-17]。所以筆者認(rèn)為，在對新生兒進(jìn)行輸血時應(yīng)遵循的策略為：當(dāng)新生兒存在血液疾病或相關(guān)疾病時，如果需要對患兒開展輸血治療，則首先為患兒開展HDN 3項試驗，以此來對患兒是否存在ABO-HDN進(jìn)行有效的檢測，并根據(jù)檢測的結(jié)果，來對患兒的輸血類型，包括同型輸血以及相容性輸血進(jìn)行確定，從而使患兒的輸血安全得到有效的保障。如果并未對患兒開展ABO-HDN檢測，不過由于ABO血型抗原會在成人的紅細(xì)胞上發(fā)生較強(qiáng)的表達(dá)，同時對于年齡小于4個月的新生兒而言，其發(fā)生母源性抗A以及抗B的機(jī)率仍舊存在，所以對于該類患兒，可采用O型洗滌紅細(xì)胞以及AB型血漿作為首選，開展相容性輸血。

本研究結(jié)果顯示，ABO-HDN患兒所具有的DAT陽性率為40.0%（16/40），不過通過表2可發(fā)現(xiàn)，DAT陽性的溶血病患兒以及DAT陰性的溶血病患兒，對其血清以及放散液采用微柱凝膠技術(shù)開展交叉配血的結(jié)果同放散液采用凝聚胺技術(shù)開展交叉配血的結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。即開展同型血交叉配血的不合率上，DAT陽性患兒高于DAT陰性患兒，提示在對新生兒開展輸血前檢查工作時，采用直接抗人球試驗進(jìn)行檢測是十分重要的，其可對新生兒體內(nèi)的結(jié)合于細(xì)胞的溶血性抗體進(jìn)行有效的檢測[18-20]。endprint

綜上所述，對新生兒開展輸血前檢查工作時，采用直接抗人球試驗進(jìn)行檢測十分重要，且微柱凝膠技術(shù)在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應(yīng)用效果顯著，值得在臨床上推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-04-24） （本文編輯：張爽）endprint