針刺背俞穴對CAG模型大鼠胃泌素、胃動素、表皮生長因子的影響*

左 甲，楊改琴，秦彩娟，畢宇峰

陜西省中醫(yī)醫(yī)院( 西安 710003)

針刺背俞穴對CAG模型大鼠胃泌素、胃動素、表皮生長因子的影響*

左 甲，楊改琴，秦彩娟，畢宇峰△

陜西省中醫(yī)醫(yī)院( 西安 710003)

目的：觀察針刺背俞穴對慢性萎縮性胃炎(CAG)模型大鼠胃泌素(GAS)、胃動素(MOT)及表皮生長因子(EGF)的影響。方法：將60只SD大鼠分為空白組、模型組、西藥組、針刺組?？瞻捉M、模型組以生理鹽水灌胃；西藥組以西藥灌胃；針刺組針刺背俞穴，檢測GAS、MOT、EGF的含量。結果： 模型組GAS、EGF均低于空白組(P<0.05)，西藥組、針刺組GAS、EGF均高于模型組(P<0.05)； 模型組MOT高于空白組(P<0.05)，西藥組、針刺組MOT均低于模型組(P<0.05)。結論：針刺背俞穴可使CAG模型大鼠GAS、EGF含量增加，降低MOT含量，表明其可能是通過調節(jié)GAS、MOT、EGF的水平達到保護胃黏膜的目的。

胃作為人體的消化器官，也是內分泌器官，其分泌的胃腸激素在調節(jié)胃腸功能中，也起到重要作用[1]。而針刺背俞穴作為治療慢性萎縮性胃炎(Chrounic atrophic gastritis，CAG)的一種中醫(yī)特色療法，該療法是怎樣影響胃腸激素分泌的同時，改善受損胃黏膜的血流供應，對受損的胃黏膜進行保護與修復，從而發(fā)揮其臨床作用的呢？本課題組選用SD大鼠進行CAG模型建立，觀察針刺背俞穴后，大鼠血清胃泌素(Gastrin，GAS)、胃動素(Motilin，MOT)及表皮生長因子(Epidermal growth Factor，EGF)的表達情況，探索其作用機制。

材料與方法

1 動物選擇 SD大鼠：SPF級，12周齡，280±20g。

2 主要試劑 Rat GAS ELISA Kit、Rat MOT ELISA Kit、Rat EGF ELISA Kit(南京建成生物工程研究所)。克拉霉素(國藥準字H2005149);甲硝唑(國藥準字H42021947);奧美拉唑(國藥準字H20064032)。

3 實驗方法

3.1 實驗動物分組:將60只SD大鼠分為空白組、模型組、西藥組、針刺組。

3.2 CAG大鼠造模方法:以0.1%氨水、MNNG溶液(200 μg/ml)灌胃6周，再將50%酒精和0.5%氨水混合，與MNNG溶液(200 μg/ml)交替灌胃6周，造模完畢[2]。

3.3 干預方法:空白組：以生理鹽水灌胃(2 ml/次)。模型組：造模后，以生理鹽水灌胃(2 ml/次)。西藥組：造模后，以奧美拉唑(0.44 mg/kg)、克拉霉素(6.92 mg/kg)、甲硝唑(7.6 mg/kg)灌胃。針刺組：造模后，采用實驗大鼠固定器將實驗動物進行常規(guī)固定，待實驗動物呈安靜狀態(tài)時，于“脾俞”、“胃俞”、“腎俞”、“肝俞”、“膈俞”等穴[3]進行針刺，深度約5 mm，留針15 min。療程：以上各組干預均為1次/d，共30次。

3.4 樣本采集與指標檢測:干預結束后，將實驗動物用水合氯醛進行麻醉，然后對麻醉狀態(tài)良好的實驗動物進行心臟采血，將采集的血樣進行常溫放置15 min后，以3500轉/min的轉速進行離心，將分離完成的血清樣本分別按照GAS、MOT、EGF等檢測指標ELISA Kit的使用說明進行操作，完成檢測指標測定。

4 統(tǒng)計學方法 使用SPSS 16.0統(tǒng)計學軟件。其中，所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，多組比較用單因素方差分析，組間比較用LSD法進行分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

結 果

1 大鼠血清GAS含量 見表1。由表1可知，模型組較空白組明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。西藥組、針刺背俞穴組均高于模型組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表1 大鼠血清GAS含量(pg/ml)

注：與空白組比較，★P<0.05；與模型組比較，☆P<0.05

2 大鼠血清MOT含量 見表2。由表2可知，模型組較空白組明顯增高，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。西藥組、針刺背俞穴組均低于模型組，均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 大鼠血清MOT含量 (pg/ml)

注：與空白組比較，★P<0.05；與模型組比較，☆P<0.05

3 大鼠血清EGF含量 見表3。由表3可知，模型組較空白組明顯下降，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。西藥組、針刺背俞穴組均高于模型組，均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表3 大鼠血清EGF含量(pg/ml)

注：與空白組比較，★P<0.05；與模型組比較，☆P<0.05

討 論

目前，治療慢性萎縮性胃炎的胃三聯(lián)療法有其局限性，體現(xiàn)為胃三聯(lián)療法中應用的抗生素，可能會對胃部產生不適，且易形成耐藥性，使得根治失敗。因此，尋求綠色有效并可靠的替代療法，是現(xiàn)階段共同努力的方向。

根據(jù)古代經典和現(xiàn)代報道可知，祖國醫(yī)藥和針灸療法均能有效改善本病的癥狀。其中，針刺背俞穴療法是我科名老中醫(yī)付永民主任醫(yī)師治療慢性萎縮性胃炎的臨床經驗[4]?！端貑枴らL刺節(jié)論》載：“迫藏刺背，背俞也”。指出背俞穴的所在，不僅是位于背部，還接近于內臟，對背俞穴進行針刺后，不僅能夠直接的反應疾病的情況，還可以調整臟腑經氣的盛衰，起到防治疾病的目的。

通過對背俞穴的解剖發(fā)現(xiàn)，背俞穴附近有相應節(jié)段的植物神經穿行，且其定位幾乎重疊于或接近于脊旁節(jié)段神經節(jié)等組織。已有研究顯示，對背俞穴進行針刺后，可以通過針刺的良性刺激，提高針刺背俞穴的相應脊髓節(jié)段控制區(qū)域的神經興奮性。

研究表明，GAS、MOT是在調節(jié)胃腸功能的調節(jié)中，起著重要作用的胃腸激素[1]。GAS不僅能促使分泌胃酸和胃蛋白酶[5]，還可使胃黏膜進行再生，改善胃腸道蠕動機能，加速胃排空。而MOT作為胃竇和小腸上皮細胞分泌的一種肽類激素，其分泌周期具有波動的特性，其分泌周期的波動可以影響胃蛋白酶的分泌，從而調節(jié)胃黏膜蛋白質的合成，造成胃腸道功能紊亂，使得CAG伴發(fā)潰瘍的可能性增大，且常規(guī)藥物治療，難以有效控制這一情況的發(fā)生[6]。

本研究結果顯示，對CAG模型大鼠背俞穴進行針刺，不僅可以提高血清GAS含量，同時，還降低了血清MOT的水平。說明，對慢性萎縮性胃炎機體的背俞穴進行針刺，可以總體調節(jié)脾、胃、大腸等臟腑經氣，改善實驗動物的癥狀，并通過調節(jié)神經興奮性影響胃腸激素的釋放，以升高GAS、降低MOT的形式，改善胃竇黏膜的營養(yǎng)狀態(tài)和血流供應情況，改善G細胞分泌功能，增加胃蛋白酶的合成，修復受損胃黏膜。同時，針刺通過調節(jié)GAS、MOT的分泌，改善胃腸道的蠕動功能，加速胃排空，縮短致炎因子在胃腸道內的滯留時間，減輕胃腸道負擔。

此外，根據(jù)本研究結果可知，進行CAG模型建立后，大鼠的血清EGF的含量有所下降，說明大鼠胃黏膜在造模過程中受損。在前期的研究中，我們也證實了這一結果。而EGF不僅對受損的組織細胞有很強的刺激分裂作用，從而促使黏膜修復以及促進受損表皮進行再生，還有消炎鎮(zhèn)痛的作用。秦蔚等人研究表明[7]，對CAG患者的足三里穴進行針刺治療后，患者血清中的EGF含量隨之發(fā)生變化，并呈時間-劑量效應，使受損表皮及胃黏膜達到修復與再生功能的目的[8-9]。本研究結果顯示，經過針刺背俞穴及西藥常規(guī)治療后，CAG模型大鼠的血清EGF含量均較模型組有所升高，這與相關研究的結果基本一致。提示，對背俞穴進行針刺之后，可能是通過調節(jié)EGF的含量，抑制了胃酸的分泌的同時，改善了胃黏膜局部的血流供應，增加了胃黏膜黏液保護層的分泌，使得受損胃黏膜細胞修復與再生，最終達到保護胃黏膜的目的。

由此可知，針刺背俞穴調節(jié)脊髓相應節(jié)段控制區(qū)域的神經興奮性的同時，影響胃腸激素GAS、MOT釋放，來實現(xiàn)治療目的。此外，針刺調節(jié)EGF的含量，也發(fā)揮了一定的作用。最終，從神經-體液層面，調節(jié)植物神經功能，改善胃黏膜供血，修復受損胃黏膜，促進胃腸蠕動等，以多途徑的方式，達到保護胃黏膜，改善癥狀，取得臨床療效。

[1] 孟云霞，楊 華，余愛玲，等.胃泌素及T淋巴細胞在不同程度老年慢性萎縮性胃竇炎中的表達[J].包頭醫(yī)學院學報，2010，26(2)：46-47.

[2] 陳小野，鄒世潔.大鼠CAG證病結合模型的造模方法和思路[J].實驗動物科學與管理，2002，19(3)：35-36.

[3] 李忠仁.實驗針灸學[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003，1：327-329.

[4] 劉 敏.付永民深刺背俞穴治療慢性萎縮性胃炎的經驗[J].陜西中醫(yī)，2010，31(10)：1377-1378.

[5] 楊改琴，賈成文，左 甲，等.針刺背俞穴對CAG模型大鼠血清PGⅠ、PGⅡ的影響[J].中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，2014，7(41)：962-963.

[6] Sakaguchi M，Takao M，Ohyama Y，etal.Comparison of PPIs and H2-receptor antagonists plus prokinetics for dysmotility-like dyspepsia[J].World J Gastroenterol，2012，18(13)：1517-1524.

[7] 秦 蔚，顧炳全.針刺慢性萎縮性胃炎患者足三里穴后血漿ET、NO、CGRP和EGF水平的檢測[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2015，17(26)：2512-2513.

[8] 李俊青，李 純，劉 希，等.參七消痞顆粒對慢性萎縮性胃炎大鼠血清GH，EGF，GAS的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2013，12(51)：172-175.

[9] 蘇鳳哲，于文濤，楊牧祥，等.胃炎飲方對胃潰瘍大鼠表皮生長因子和轉化生長因子β1表達的影響[J].中醫(yī)雜志，2015，5(20)：418-422.

*陜西省科技廳課題(2013JM4011、S2014SF3371、2014JQ2-8050、 2011K140502)

△通訊作者

胃炎, 萎縮性/針灸療法 @背俞穴 胃泌素類 表皮生長因子 動物實驗 大鼠

R737.3

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.11.059

(收稿：2017-06-02)