大鯢人工繁育技術(shù)研究

楊平凹 張星朗 周小愿

大鯢人工繁育技術(shù)研究

楊平凹1張星朗2周小愿2

以接近大鯢繁殖生物學習性的方式培育親鯢，使得親鯢具有良好的繁殖能力，通過人工助產(chǎn)保證了卵子的受精率和提高了參繁率，參繁率最高達到71.6%；前期自然孵化和后期人工控制下的孵化提高了受精卵的孵化率和成活率，孵化率和成活率最高分別為89%和82.6%，從而使大鯢人工繁育的平均出苗數(shù)得到顯著提高。項目實施期間，采用全人工、仿生態(tài)和仿生態(tài)+人工3種繁育模式繁殖大鯢幼苗，將親鯢的仿生態(tài)培育和人工繁育技術(shù)相結(jié)合，創(chuàng)新出仿生態(tài)+人工繁育的大鯢繁育模式。

1.項目試驗地點

陜西湑水生物有限公司大鯢繁育場，該場址周圍無地質(zhì)災(zāi)害隱患、交通方便、生態(tài)環(huán)境良好，且土壤未經(jīng)“三廢”（農(nóng)業(yè)廢棄物、工礦及醫(yī)院污水廢棄物、城市垃圾和生活污水等）污染，水源為山泉水，水量充足、無污染，曾經(jīng)為野生大鯢生存的區(qū)域。

該場同時具有大鯢仿生態(tài)馴繁場和人工工廠化馴繁池。

2.材料和方法

2.1 試驗親鯢

親鯢全部來自陜西湑水生物有限公司大鯢繁育場,具有繁殖能力的親鯢400余組。

2.1.1 親鯢的選擇

根據(jù)以下條件選擇親鯢：①發(fā)育良好、年齡在8齡以上；②體型優(yōu)美、無畸形；③在生長過程中未使用過任何抗生素或禁用漁藥；④繁殖期第二性征明顯；⑤生長過程中未進行過任何人工控溫養(yǎng)殖，全部采用自然條件養(yǎng)殖。

2.1.2 親鯢培育

親本培育是大鯢人工繁育成敗的關(guān)鍵，只有發(fā)育好的親本，選擇適宜季節(jié)，采用適宜的外源刺激進行人工催產(chǎn)，才能達到理想的催產(chǎn)效果。加強親本培育提高精卵質(zhì)量是提高受精率和孵化率的物質(zhì)基礎(chǔ)，精卵質(zhì)量好受精率和孵化率高，反之則低。

在繁殖前一年的冬季就開始進行親鯢培育，培育時段包括前年的冬季、當年的春季、夏季等。根據(jù)各個時段的特點，分時段進行培育，保持餌料適口、充足，池內(nèi)清潔、環(huán)境安靜，待到繁殖期時及時調(diào)池分組，培育出的雌、雄性腺發(fā)育基本達到同步。

前年冬季培育：從前年11月下旬或12月初開始，將選擇的親鯢移到仿生態(tài)池進行培育，讓其進行冬眠。此階段給大鯢投食時，根據(jù)水溫的變化進行調(diào)整，詳見表1。

當年春季培育：當年的3、4月時，水溫逐漸回升，根據(jù)水溫仿照表1慢慢調(diào)整投喂次數(shù)。當水溫升至12～16℃時，應(yīng)及時調(diào)節(jié)餌料種類，適當增加注水量，促進性腺發(fā)育。

表1 親鯢培育不同水溫投餌參數(shù)

當年夏季培育：此階段是親鯢性腺發(fā)育成熟的重要時期，主要工作是調(diào)節(jié)水流、搭配餌料結(jié)構(gòu)、做好防暑降溫工作等。宜加大水流量并增強水流聲，投喂營養(yǎng)全面的餌料，根據(jù)大鯢發(fā)育情況，將促進親本性腺成熟的中藥制劑，注射到親鯢體內(nèi)，促進和提高性腺發(fā)育成熟。

在親本培育過程中重點要做到以下三點：

（1）建造仿自然生態(tài)功能池，實現(xiàn)雌雄配對養(yǎng)殖

在親本培育過程中，飼養(yǎng)方式很重要，通常采取三種方式飼養(yǎng)，即室內(nèi)單養(yǎng)、混養(yǎng)和室外人工建造仿自然生態(tài)功能池飼養(yǎng)。

據(jù)觀察，混養(yǎng)攝食略好于單養(yǎng)，但相互打架，咬傷、咬死現(xiàn)象時有發(fā)生，疾病傳染機率大，且不利于觀察；單養(yǎng)克服了混養(yǎng)缺點，也因雌雄長期不能得到信息交流不利于性腺發(fā)育；仿自然生態(tài)池飼養(yǎng)，克服了混養(yǎng)、單養(yǎng)的缺點，做到雌雄在飼養(yǎng)過程中，既能互通消息，又不相互殘殺，還基本上滿足了性腺發(fā)育所需條件，一般可提高“三率”（催產(chǎn)率、受精率、孵化率）8%。

（2）堅持科學喂養(yǎng)

飼料及投喂技術(shù)直接影響到親鯢的性腺發(fā)育程度，進而決定親鯢繁殖效果的好壞。所以飼料及投喂必須講究科學。

飼料主要以新鮮的泥鰍、鯽魚為主，輔以投喂動物肝臟，如豬肝、牛肝等?；钅圉q、活鯽魚體內(nèi)的血液、肝臟、腦垂體等活性物質(zhì)有利于大鯢的性腺發(fā)育；動物肝臟富含卵磷脂，是組成動物神經(jīng)細胞的重要物質(zhì)。投喂動物肝臟，可增強大鯢神經(jīng)細胞的活性，促進大鯢精卵細胞的形成。

（3）適量添加VE、VC

VE、VC為天然生物抗氧化劑，具有調(diào)節(jié)動物新陳代謝的功能，能使機體保持旺盛的代謝，有利促進動物體的性腺發(fā)育：VE、VC能調(diào)節(jié)動物體內(nèi)內(nèi)臟和性腺中類固醇類激素的生物合成，從而促進親本性腺成熟和調(diào)控胚胎發(fā)育，改善親本生殖性能。此外，VE、VC在體內(nèi)具有雙向協(xié)同作用，VC在水相、VE在脂相協(xié)同發(fā)揮抗氧化和抗應(yīng)激作用以提高動物的免疫功能等。

2.2 繁殖

大鯢的繁殖季節(jié)一般為夏末至初秋，具體在北方為8月上旬至10月上旬。本項目選擇繁殖試驗的時間為8月下旬至9月初。具體的時間點判斷標準為：當觀察到親鯢有打斗、夜間活動頻繁、沖水、推沙、求偶等行為特征時，即開始雌雄鑒別和性成熟度鑒定及后續(xù)繁殖作業(yè)。

2.2.1 性腺發(fā)育成熟度鑒定

選擇性腺發(fā)育成熟度好的親鯢進行催產(chǎn)和配對。

雄性親鯢的第二性征特別明顯，而且輕輕擠壓生殖孔，有乳白色的精液流出，說明雄鯢的性腺發(fā)育已成熟，可以進行催產(chǎn)和配對。

雌性親鯢腹部膨大、松軟，用手觸摸有黃豆顆粒般凹凸感，生殖孔紅潤，則表明雌鯢的性腺發(fā)育已經(jīng)成熟。

而缺乏以上特征的雌雄親鯢則需要再經(jīng)過7～25d左右的培育才能進行催產(chǎn)繁殖。

2.2.2 分組

分組時，在仿生態(tài)繁育模式下，盡量以大鯢原居洞穴為依據(jù)，再根據(jù)其體重、發(fā)育情況進行適當?shù)恼{(diào)整進行分組，組間用鐵網(wǎng)隔開，網(wǎng)眼要稍大些，大鯢鉆不出來就行，仿生態(tài)和仿生態(tài)+人工兩種繁育模式選擇的親鯢雌雄比為1：1。

全人工繁育模式下，雌雄分組比例為5～6∶1。

2.2.3 人工催產(chǎn)

對于性腺發(fā)育成熟的親鯢，LRH-A、HCG、PG等幾種常規(guī)漁用催產(chǎn)激素制品，無論是單一使用還是混合配置使用，達到一定藥物劑量后，均可成功地誘導大鯢產(chǎn)卵、排精。在池養(yǎng)條件下，性成熟個體沒有受到外源激素作用時，將不會發(fā)生自然排卵現(xiàn)象，雄鯢不能擠出精液，隨時間的推移，其性腺將逐漸自然退化吸收。藥物催化后，雌性大鯢可在養(yǎng)殖池內(nèi)自行排卵（流卵），未見雌雄鯢在池內(nèi)有發(fā)情行為和自然交配。這與野生狀態(tài)下大鯢的繁殖行為有明顯的不同。

于2015年8月中旬和2016年8月底，對全人工和仿生態(tài)+人工兩種繁育模式選擇的親鯢均進行了人工催產(chǎn)，其目的是為使雌雄親鯢的產(chǎn)卵和排精盡量同步，以利于受精和孵化。

催產(chǎn)藥物為寧波激素制品二廠生產(chǎn)的促黃體素釋放激素類似物（LRH-A2）、絨毛膜促性腺激素（HCG）和地歐酮（DOM）。催產(chǎn)劑量為每千克大鯢10μg LRH-A2+800IUHCG+1.5mgDOM。注射劑量為：每千克0.5mL。注射方式和部位：精確配制好藥液后從親鯢背后部肋間進針，位置距離后肢3～5cm，按劑量注射入腹腔。進針深度以剛穿過肌肉層進入腹腔為宜，要注意避免直接注射到性腺上，導致兩邊產(chǎn)卵或排精不同步。參繁率的評判以雌鯢產(chǎn)卵為依據(jù)，效應(yīng)時間指從注射催產(chǎn)藥物后到雌鯢產(chǎn)出第一粒卵所間隔的時間，水溫20～22℃，效應(yīng)時間在96h左右。

2.2.4 產(chǎn)卵和授精

全人工模式繁育時，將催產(chǎn)的雌雄大鯢按催產(chǎn)時間分池放入待產(chǎn)池，并做好記錄，加大流水和水聲刺激。根據(jù)效應(yīng)時間檢查種鯢發(fā)情情況，當發(fā)現(xiàn)種鯢躁動不安時，先將雄鯢撈出，用毛巾裹住全身尤其是頭部和眼睛，肚皮向上，輕輕按摩安撫，待其安靜不掙扎時，輕輕側(cè)放魚體，從前至后輕輕擠壓腹側(cè)，等排凈尿液，擦干水，再用干凈燒杯或量杯收集乳白色精液。收集好的精液要存放在0～4℃的冰箱，并用顯微鏡檢查其活力，做好采集魚、時間、質(zhì)量等標記，以備授精時用。當發(fā)現(xiàn)雌魚卵袋出來時，及時將雌魚撈出，用同樣的方法和手法，用毛巾裹住全身尤其是頭部和眼睛，肚皮向上，輕輕按摩安撫，待其安靜不掙扎時，一人不停地按摩，一人輕輕地將卵袋慢慢抽出，拉出的卵袋順勢放進一個無水光滑干凈的盆中，每尾雌魚有兩條卵袋，操作一定要輕柔，盡量減輕對親鯢和卵的傷害。整個操作過程要避強光，不見水。采卵結(jié)束后，將卵用另一干凈的盆或沙布蓋起，等待授精。

人工授精：將采集好的卵及時加入提前采集的質(zhì)量好活力強的精液，根據(jù)卵的多少加入精液，一般1mL/1000粒。輕輕搖動盛卵容器，使精卵充分混合，5min后，再慢慢加入與親魚池水溫相同的清水，水量淹沒過魚卵，靜置20min后用同溫度清水沖洗干凈，放進孵化池孵化。

仿生態(tài)和仿生態(tài)+人工模式繁育時，采用自然受精。但當發(fā)現(xiàn)多條雌鯢產(chǎn)卵但沒有雄鯢跟隨時，則需要把卵即時撈起并進行人工授精，精液來源為工廠化養(yǎng)殖池中的雄鯢，然后將受精后的卵放入洞穴中。此外，若發(fā)現(xiàn)溪流中有卵時，也需要對其進行人工授精后將其移入池中。

雌鯢所產(chǎn)卵經(jīng)授精后會出現(xiàn)明顯的特征，即有胚溝出現(xiàn)，隨時間推移，胚溝會愈來愈深。因此，以胚溝是否出現(xiàn)作為受精的標志。

2.2.5 孵化

全人工繁育模式采用人工孵化：將受精卵放入室內(nèi)人工孵化池孵化，人工孵化池水源一般為人工養(yǎng)殖場源頭優(yōu)質(zhì)水，孵化池大小為1m2左右，池深40cm，受精卵放入池中的篩網(wǎng)中，魚卵下不貼池底，上不露水面，噴淋流水孵化，每池放魚卵1500粒左右，水深20～30cm、水溫19℃±2℃、溶氧6mg/L以上。孵化進程中，要及時清理死卵，防水霉病，經(jīng)過35天左右大鯢苗破膜出苗。

仿生態(tài)繁育模式采用自然孵化；仿生態(tài)+人工繁育模式下，孵化采取“前期自然孵化+后期人工孵化”的模式進行，即：將受精卵移入仿生態(tài)池中進行胚胎發(fā)育，直至大鯢苗出膜前1個星期左右再將其撈出，放入室內(nèi)人工孵化池中孵化出苗，孵化過程與全人工一致。

2.2.6 幼苗培育

稚鯢池水深以5～10cm為宜，剛孵出的稚鯢形似蝌蚪，以吸收本身的卵黃物質(zhì)為生，40d后開始攝食外界餌料，如紅蟲等。三種繁育模式幼苗培育技術(shù)基本相同。

幼鯢池水深10～20cm，幼苗入池前用碘制劑浸洗5～10min，放養(yǎng)密度一般為30～50尾/m2，可投喂紅蟲、水生昆蟲和魚蝦蟹類，餌料要新鮮，每日18-19時投喂一次，每日均需清污，保持常流水、池水透明、清澈見底。一月左右用碘制劑浸洗10～20min，用量：10%的聚維酮碘10mL/m3。

3.結(jié)果與分析

3.1 人工催產(chǎn)

從催產(chǎn)結(jié)果（表2）可以看出，3種繁育模式的參繁率都較高，這主要是由于選擇的親鯢均處于繁殖盛期。但是全人工和仿生態(tài)+人工兩種繁育模式較仿生態(tài)自然繁育模式，參繁率相比要高，兩年均在60%以上；而仿生態(tài)的參繁率均在40%左右。結(jié)果表明：人工催產(chǎn)可有效提高參繁率20%；全人工和仿生態(tài)+人工兩種繁育模式相比，全人工模式親鯢的培育，尤其是雌鯢的培育還不夠，也說明仿生態(tài)條件下生態(tài)環(huán)境因素有利于親鯢的培育。

3.2 效應(yīng)時間

大鯢在進行藥物催產(chǎn)后，行為表現(xiàn)為厭食，單獨活動。雌鯢可見后腹部膨大，生殖孔區(qū)域潤滑，紅色加深，雄鯢生殖孔周邊的隆起明顯，呈吸盤狀。

親鯢催產(chǎn)后，多數(shù)在2～7d內(nèi)產(chǎn)卵，但是以3～4d產(chǎn)卵質(zhì)量為最好。效應(yīng)時間太長，說明親鯢性腺的發(fā)育成熟度不好，所產(chǎn)卵的質(zhì)量欠佳。

效應(yīng)時間與水溫有較明顯的變化關(guān)系，盡管存在個體差異，總體上看，在一定溫度條件下，大鯢的效應(yīng)時間為4～5d。

催產(chǎn)時，繁育池中的水溫基本在20℃±0.5℃，為催產(chǎn)的最適溫度。催產(chǎn)藥物為一次性足量注射，沒有采取催熟或分多次給藥。

表2 3種繁育模式的催產(chǎn)結(jié)果

表3 3種繁育模式的雌鯢產(chǎn)卵量

表4 3種繁育模式的孵化率和成活率統(tǒng)計結(jié)果

3.3 產(chǎn)卵量和受精率

由于全人工繁育模式是人工助產(chǎn)排卵，產(chǎn)卵量和受精率較容易統(tǒng)計；而仿生態(tài)和仿生態(tài)+人工繁育模式下雌鯢為自然產(chǎn)卵，為了不驚擾種鯢孵化，沒有對產(chǎn)卵洞穴進行產(chǎn)卵量和受精率的統(tǒng)計。表3的結(jié)果表明，全人工繁育模式下，受精卵的受精率均較高，基本在90%左右，說明我們的人工授精技術(shù)已趨于成熟。

3.4 孵化率和成活率

全人工繁育模式仍然以全部試驗樣本進行統(tǒng)計分析，仿生態(tài)+人工繁育模式在出苗7～10d前將其撈出，進行人工孵化并追蹤統(tǒng)計分析。通過表4的結(jié)果分析可以看出，在仿生態(tài)+人工繁育模式下，受精卵的孵化率有了較大幅度的提高，均在85%以上，而全人工繁育模式下受精卵的孵化率較低，為70%左右。另外，在3種繁育模式下，幼苗的成活率均較高，基本在80%左右?？傮w來看，仿生態(tài)+人工繁育模式的成活率最高，2016年的統(tǒng)計結(jié)果為82.6%，而另外2種繁育模式的成活率也在75%以上。

表5 3種繁育模式總體出苗狀況分析

4.結(jié)論

通過試驗研究分析，在3種繁殖模式中，“人工+仿生態(tài)”相結(jié)合的繁殖模式的參繁率、成活率都比另外2種繁殖模式高。而且對親鯢傷害少，勞動強度小，實用性強，易開展規(guī)?；a(chǎn)，試驗表明“人工+仿生態(tài)”繁育模式是大鯢繁育的高效模式。

（通聯(lián)：1.742300，甘肅省天水市徽縣水產(chǎn)站 甘肅 徽縣；2.710086，陜西省水產(chǎn)研究所 陜西 西安）