臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測探析

河南省濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院（455000）李艷紅

在臨床疾病的治療當(dāng)中，抗生素藥物發(fā)揮著十分重要的作用，能夠有效殺滅致病菌株，進而治愈疾病。但是在長期的應(yīng)用過程中，部分致病細菌對于藥物產(chǎn)生一定的耐藥性，藥物的作用效果被極大削弱，導(dǎo)致治療效果不佳[1]?？股厮幬锏牟缓侠響?yīng)用，往往會誘發(fā)耐藥菌株的大量繁殖，增加疾病的治療難度。為了提升抗生素藥物使用的合理性和有效性，需要加強對細菌耐藥性的監(jiān)測和分析。本研究通過臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測，分析其檢測結(jié)果，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究以我院各科室2014年7月～2015年12月期間采集的1308份檢測標本作為樣本。標本類型：血液405份，尿液363份，痰液327例及各種分泌物213例?？剖遥和饪?67份：內(nèi)科507份、ICU243份以及兒科291份。以上檢測標本取樣方式、送檢時間、檢測方式基本一致，檢測人員的操作水平接近，其一般資料對照相仿（P＞0.05），可進行對比分析。

1.2 方法 對以上檢測標本進行臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測，首先進行菌株鑒定。通過細菌和微生物培養(yǎng)，獲得其純種培養(yǎng)物，在顯微鏡下觀察其個體形態(tài)，分析其營養(yǎng)要求，觀察其生理和生化反應(yīng)，分析其代謝產(chǎn)物。然后鑒定其生長溫度、氧需及宿主種類，綜合分析，進而鑒定其菌種。根據(jù)細菌的形態(tài)特征和理化特性仍無法準確鑒定其菌種時，則需要提取該細菌基因組DNA，經(jīng)PCR擴增16s rDNA片段，使用DNAMAN序列分析軟件，進而確定菌種[2]。由梅里埃公司生產(chǎn)的藥物敏感度紙片（革蘭陰性桿菌藥敏板條GN13、GN09、陽性球菌藥敏板條P535），對于血、尿以及痰液中培養(yǎng)的細菌和微生物進行藥敏試驗。

然后使用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（滬食藥監(jiān)械(準)字2012第1400203號 梅里埃(上海)生物制品有限公司），采用肉湯稀釋法和E-test法，接著檢測抗生素藥物的MIC值。應(yīng)用青霉素G、頭孢唑啉、氧氟沙星、環(huán)丙沙星以及頭孢他啶等抗生素藥物。根據(jù)CLSI標準，鑒定細菌的耐藥性。同時行瓊脂稀釋法和紙片擴散法，進一步測定其測定藥物抑菌或殺菌能力，觀察耐藥菌株的檢出結(jié)果。

附表 檢出菌株的耐藥情況

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 以SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)的處理和分析，計數(shù)資料以n或 %表示，采用χ2檢驗，計量資料以（±s）表示，采用t 檢驗，統(tǒng)計結(jié)果P ＜0.05代表差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢出結(jié)果 在1308份檢測標本當(dāng)中，檢出多重耐藥菌株（M D R）2 9 7 份，檢出率為2 2.7%，其中外科5 4 例，檢出率為20.2%；內(nèi)科117例，檢出率為23.1%；ICU科室81份，檢出率為33.3%；兒科45份，檢出率為15.5%。在297份耐藥菌株當(dāng)中，其中凝固酶陰性葡萄球菌117例（39.4%）、金黃色葡萄球菌81例（27.3%），銅綠假單胞菌45例（15.2%），大腸埃希菌27例（9.1%）以及腸球菌27例（9.1%）。

2.2 檢出菌株的耐藥情況 通過藥敏試驗，凝固酶陰性葡萄球菌對于青霉素G的耐藥性最高，頭孢他啶其次，對于其他三種抗生素藥物的耐藥性相對不高；金黃色葡萄球菌對于青霉素G的耐藥性較高；銅綠假單胞菌對于頭孢唑啉和青霉素G的耐藥性較高；大腸埃希菌對于青霉素G的耐藥性較高；而腸球菌對于頭孢他啶的耐藥性較高。不同菌株的耐藥性存在著顯著的差異（P＜0.05）。與其他菌株相比，凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥性最為顯著，其對于多種抗生素藥物均具有較高的耐藥性。而青霉素G在凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌以及大腸埃希菌均存在較高的耐藥性。在27株腸球菌中，耐青霉素腸球菌9株，其中糞腸球菌1株，屎腸球菌8株，其對于青霉素G的耐藥性分別為11.4%和72.1%，對比差異顯著（P ＜0.05）詳見附表。

3 討論

細菌的耐藥性在很大程度上影響著抗生素藥物的療效，這與抗生素藥物的長期使用或不合理用藥有關(guān)。目前，廣譜抗生素藥物得到廣泛的開發(fā)和應(yīng)用，但是隨之而來的是對藥物的濫用。在細菌性疾病治療中，過分依賴抗生素藥物，導(dǎo)致耐藥性菌株種類明顯增加，給臨床疾病的治療帶來了一定的困擾。經(jīng)研究表明，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）對于β-內(nèi)酰胺類和頭孢類抗生素具有較強的耐藥作用，其具有廣譜耐藥性。而大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌中易生產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs），ESBLs菌株對于青霉素類、第三代頭孢菌素具有水解滅活的作用，其耐藥性較強。即使在同類型菌株當(dāng)中，不同細菌對于相同藥物的耐藥性也存在著較大的差異，糞腸球菌對于青霉素G的耐藥性明顯低于屎腸球菌，耐青霉素腸球菌株以屎腸球菌為主。

鑒于細菌耐藥性的普遍存在，為了保證合理、安全的應(yīng)用抗生素藥物，需要通過嚴格的監(jiān)測與鑒定，判斷不同類型抗生素藥物是否適用于臨床治療當(dāng)中。不同菌株對于抗生素藥物的耐藥性不同，需要根據(jù)臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測結(jié)果，準確予以篩查和鑒別，為臨床治療提供可靠的參考依據(jù)，提高臨床用藥的合理性，降低用藥風(fēng)險。

綜上所述，通過臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測，了解菌株對于抗生素藥物的耐藥性，以此為參考，合理使用藥物，以提高藥物治療效果，具有重要的臨床意義和價值。