EV71、COX16、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和C-反應(yīng)蛋白聯(lián)合檢測(cè)在手足口病早期診斷中的應(yīng)用

廣東省云浮市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心（527300）張微惠 徐建民 周麗銀

本研究通過(guò)對(duì)我院兒科和兒科門診就診的1170例疑似手足口病患兒同時(shí)檢測(cè)EV71、COX16、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和C-反應(yīng)蛋白，探討上述檢測(cè)指標(biāo)對(duì)于手足口病患兒早期診療中的意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月～2016年7月云浮市婦幼保健院內(nèi)兒科和兒科門診就診的1170例疑似手足口病患兒作為研究對(duì)象，所有患兒均存在有手足口病接觸史，大多數(shù)患兒出現(xiàn)發(fā)熱癥，手足口處有圓形或橢圓形皰疹，疑似為手足口病，年齡均在9個(gè)月～5歲，平均（2.1±1.7）歲。

1.2 方法

1.2.1 全部病例均于門診當(dāng)日或入院當(dāng)日抽取靜脈血2ml于EDTA-K2抗凝試管用于檢測(cè)血常規(guī)中的WBC，另一支3ml于干燥管中分別檢測(cè)EV71、COX16、hs-CRP。

1.2.2 WBC計(jì)數(shù)應(yīng)用SysmexXT-4000I血液分析儀以及配套試劑及質(zhì)控品檢測(cè)，嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程，將WBC計(jì)數(shù)＞12×109記為陽(yáng)性。

1.2.3 EV71、COX16 兩者均采用膠體金法（北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司）進(jìn)行檢測(cè)；檢測(cè)前按照操作要求將檢測(cè)卡、稀釋液及待測(cè)樣本平衡至室溫（30分鐘）后，吸取15μl樣本血清加入樣本稀釋管中充分混勻，在檢測(cè)卡加樣孔處加入80μl稀釋樣本，室溫放置15分鐘觀察結(jié)果。

1.2.4 CRP檢測(cè)應(yīng)用免疫熒光干式定量法，韓國(guó)Boditech MED Inc.公司生產(chǎn)i-CHROMA 特種蛋白分析儀及配套試劑檢測(cè)hs-CRP濃度，hs-CRP＞5.0mg/L記為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次研究實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料采用“±S”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例(n)表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用X2檢驗(yàn)，以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

附表 各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)的陽(yáng)性率[例數(shù)(%)]

2 結(jié)果

2.1 本次研究在1170例患兒用血清學(xué)檢測(cè)中，柯薩奇病毒A16型（COX16）檢測(cè)陽(yáng)性為115例，陽(yáng)性率為9.8%，腸道病毒71型（EV71）檢測(cè)陽(yáng)性為139例，陽(yáng)性率為11.9%；柯薩奇病毒A16型聯(lián)合腸道病毒71型檢測(cè)同時(shí)陽(yáng)性的患兒為93例，陽(yáng)性率為7.9%；柯薩奇病毒A16型聯(lián)合腸道病毒71型檢測(cè)任意一項(xiàng)陽(yáng)性為347例，陽(yáng)性率為29.7%；柯薩奇病毒A16型聯(lián)合腸道病毒71型檢測(cè)陽(yáng)性檢出率高于單一項(xiàng)目檢出率，三者陽(yáng)性率進(jìn)行比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(X2檢驗(yàn)，P＜0.01）。見(jiàn)附表。

2.2 柯薩奇病毒A16型聯(lián)合腸道病毒71型檢測(cè)陽(yáng)性組與薩奇病毒A16型（COX）陽(yáng)性組、腸道病毒71型（EV71）陽(yáng)性組三者的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、hs-CRP的陽(yáng)性率都有升高，但三者進(jìn)行比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05)。

3 討論

WBC作為免疫炎性細(xì)胞，是機(jī)體防御系統(tǒng)的重要組成部分，當(dāng)機(jī)體感染手足口病后，白細(xì)胞中的淋巴細(xì)胞升高，機(jī)體會(huì)發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)而使兒茶酚胺升高，促進(jìn)中性粒細(xì)胞從儲(chǔ)備池中釋放進(jìn)入血循環(huán)，發(fā)生炎性反應(yīng)，導(dǎo)致白細(xì)胞增高[1]。

相關(guān)研究表明，hs-CRP是由肝臟合成，屬于分泌型蛋白，是機(jī)體應(yīng)激狀態(tài)下所產(chǎn)生的急性時(shí)相蛋白，hs-CRP水平升高的程度可對(duì)機(jī)體的感染程度進(jìn)行評(píng)價(jià)，比白細(xì)胞更加快速敏感。在正常人血液中hs-CRP的濃度較低，而當(dāng)機(jī)構(gòu)感染細(xì)菌、術(shù)后或者組織損傷發(fā)生急性炎癥過(guò)程中，hs-CRP濃度會(huì)在6～8h開始升高，24～48h達(dá)到峰值。患兒感染了手足口病，hs-CRP能與腸道病毒等體內(nèi)的多糖結(jié)合，其聚合物能激活補(bǔ)體系統(tǒng)，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。本研究結(jié)果顯示手足口病患兒WBC、hs-CRP水平均有升高，柯薩奇病毒A16型聯(lián)合腸道病毒71型檢測(cè)陽(yáng)性組中WBC陽(yáng)性率為36.0%，hs-CRP陽(yáng)性率為38.3%；薩奇病毒A16型（COX）陽(yáng)性組中WBC陽(yáng)性率為43.5%，hs-CRP陽(yáng)性率為45.2%；腸道病毒71型（EV71）陽(yáng)性組中WBC陽(yáng)性率為36.9%，hs-CRP陽(yáng)性率為42.4%。本組數(shù)據(jù)表明hs-CRP的陽(yáng)性率高于白細(xì)胞計(jì)數(shù)的陽(yáng)性率，說(shuō)明hs-CRP在兒科感染疾病中比白細(xì)胞更敏感，是一種敏感而非特異的指標(biāo)[2]。

對(duì)于WBC，hs-CRP陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果顯示，hs-CRP陽(yáng)性率高于WBC，進(jìn)一步說(shuō)明hs-CRP是手足口病感染早期更為敏感的一項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)。目前普遍認(rèn)為手足口病是病毒直接侵犯組織、以及病毒感染后激發(fā)全身免疫炎癥反應(yīng)所引起的機(jī)理一致。將WBC、hs-CRP同時(shí)檢測(cè)能起到彌補(bǔ)WBC計(jì)數(shù)不敏感的不足，如果臨床疑是為感染病例，同時(shí)監(jiān)測(cè)到hs-CRP升高，則診斷感染的準(zhǔn)確性加大，達(dá)到早期診治的目的。

綜上所述，EV71、COX16聯(lián)合檢測(cè)手足口病陽(yáng)性病例，應(yīng)結(jié)合臨床對(duì)其作出診斷與治療。然而對(duì)于初診懷疑為手足口病的患兒，hs-CRP檢測(cè)能夠靈敏地反映患兒有無(wú)炎性反應(yīng)的程度，作為疾病急性指標(biāo)優(yōu)于其他急性期的反應(yīng)物質(zhì)，但其僅能作為炎性初步判斷，必須與其他指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用才能提高臨床診斷價(jià)值。雖然WBC作為臨床診斷感染的常規(guī)指標(biāo)，快速簡(jiǎn)單，但個(gè)體差異，影響因素多，單一診斷具有局限性。因此在小兒手足口病早期診斷與治療方面，應(yīng)緊密結(jié)合臨床，將EV71、COX16、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和C-反應(yīng)蛋白聯(lián)合檢測(cè)，彌補(bǔ)各單項(xiàng)檢測(cè)的不足之處，為小兒手足口病的早期診治、降低危重病例的死亡率提供科學(xué)依據(jù)。