免疫組化標(biāo)記Stathmin-1與p16在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級中的作用

姚 晨，丁 嵐，楊永國，梅 霞

（揚州市江都人民醫(yī)院病理科，江蘇 揚州 225200）

免疫組化標(biāo)記Stathmin-1與p16在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級中的作用

姚 晨，丁 嵐，楊永國，梅 霞

（揚州市江都人民醫(yī)院病理科，江蘇 揚州 225200）

目的分析Stathmin-1與p16在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級中的作用，為臨床治療提供幫助。方法采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測Stathmin-1與p16在正常宮頸組織及上皮內(nèi)瘤變（CIN）中的表達(dá)，使CIN分級更加精確。結(jié)果Stathmin-1在正常宮頸組織、CINI、CINII、CINIII中的陽性表達(dá)率分別為6.7%、25%、42.2%、91.7%。P16在正常宮頸組織、CINI、CINII、CINIII中的陽性表達(dá)率分別為13.3%、70%、95.6%、100%。兩者表達(dá)結(jié)果表明Stathmin-1在宮頸的鱗狀上皮低度病變分類鑒別中，比p16具有更高的特異性。結(jié)論Stathmin-1在CINIII中呈過度表達(dá)，而在低級別病變中不表達(dá)或部分表達(dá)，有助于鑒別高級別、低級別CIN和良性反應(yīng)性改變，進(jìn)而為臨床診治采取哪種治療手段提供幫助。

宮頸上皮內(nèi)瘤變；Stathmin-1；p16

在各種惡性腫瘤中，宮頸癌的發(fā)生是可以預(yù)防及阻止的，在世界范圍內(nèi)，是女性好發(fā)的第三種惡性腫瘤[1]。采用免疫組化標(biāo)記物鑒別宮頸的癌前病變，特別是高級別與低級別病變的特異性一直備受病理醫(yī)生和婦科醫(yī)生的關(guān)注。本文通過檢測CIN中Stathmin-1和p16的表達(dá)，對宮頸癌前病變的低級別和高級別的分級更加明確，為婦科醫(yī)生對病人的診治提供幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年1月至2016年12月于本院確診的正常宮頸組織30例為研究對象，年齡25～60歲；CINⅠ級60例，年齡27～65歲；CINⅡ級45例，平均54歲；CINⅢ級48例，年齡28～75歲，所有子宮頸組織均為子宮頸活組織檢查。

1.2 方法

應(yīng)用免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法（SP法）檢測Stathmin-1與p16在宮頸上皮內(nèi)瘤變分級中的作用。免疫組化所用抗體Stathmin-1與p16即用型抗體，購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。用PBS代替一抗作陰性對照，用已知陽性組織作為陽性對照。

1.3 結(jié)果判定

Stathmin-1以胞質(zhì)棕黃色為陽性表達(dá)；p16以胞核著色或胞核和胞漿同時著色為陽性，棕黃色為陽性表達(dá)。根據(jù)腫瘤細(xì)胞陽性數(shù)進(jìn)行判斷，將陽性細(xì)胞按數(shù)量和染色強度分為4級。染色強度與背景無明顯差別為陰性（-）；弱表達(dá)（+）；中等表達(dá)（++）；強表達(dá)（+++）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗，以P＜0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 stathmin-1蛋白表達(dá)情況

stathmin-1的表達(dá)定位在細(xì)胞質(zhì)，stathmin-1在正常的宮頸組織中的陽性表達(dá)率為6.7%（2/30），在CINⅠ級中為25%（15/60），在CINⅡ級中為42.2%（19/45），在CINⅢ級中為91.7%（44/48）（圖1A）。Stathmin-1在正常的宮頸組織中、CINⅠ級、CINⅡ級和CINⅢ級中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=75.55，P＜0.05）。在CINⅢ級中的陽性表達(dá)較正常的宮頸組織、CINⅠ級、CINⅡ級是逐漸增高的。

2.2 p16蛋白表達(dá)情況

p16蛋白的表達(dá)定位在細(xì)胞核和（或）細(xì)胞質(zhì)，其陽性表達(dá)率隨CIN級別增加而增高。p16在正常的宮頸組織中的陽性表達(dá)率為13.3%（4/30），在CINⅠ級中為70%（42/60），在CINⅡ級中為95.6%（43/45），在CINⅢ級中為100%（48/48）（圖1B）。在正常的宮頸組織中、CINⅠ級、CINⅡ級和CINⅢ級中的其表達(dá)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（x2=87.47，P＜0.05）。

圖1 宮頸CINIII中Stathmin-1與p16的表達(dá)狀況

3 討 論

子宮頸癌是全世界婦女中最常見的癌癥之一[2]，宮頸的癌前病變發(fā)展到宮頸癌需要10-20年的時間，如果發(fā)現(xiàn)并有效治療這些病變，宮頸癌可以預(yù)防。由于所采取的治療手段不同，明確鑒別CIN級別有助于減少因CIN分級過高而導(dǎo)致的過度治療。聯(lián)合運用高特異性的生物標(biāo)記物對臨床采取哪種治療方式提供幫助，同時加強了檢測和隨訪強度。

p16基因為多腫瘤抑癌基因。Polman等[3]提出聯(lián)合高危型HPV，p16、Ki-67檢測可能為高級別CIN患者的治療及隨訪提供一個很有效的辦法。本研究發(fā)現(xiàn)p16的陽性表達(dá)率在在CINⅢ級中為100%，CINII中為95.6%，其表達(dá)與Kolben等研究相符合。而p16在正常的宮頸組織中陽性表達(dá)率為13.3%，在CINⅠ級中為70%，差異統(tǒng)計學(xué)意義（x2=87.47，P＜0.05），可以看出運用P16可以很好的區(qū)分出良性病變。stathmin-1是微管不穩(wěn)定蛋白，在細(xì)胞運動和遷移過程中的發(fā)揮著調(diào)節(jié)器的作用。本研究中，由于p16的表達(dá)在CINI中的表達(dá)高達(dá)70%，因此很難與CINII和CINIII區(qū)分出來。而stathmin-1對于宮頸低級別的病變敏感性比較弱，可以先運用p16篩查出有病變的宮頸低級別病變，再聯(lián)合運用stathmin-1，可以較為精確的區(qū)分出宮頸低級別和高級別病變，為臨床診治提供幫助。

總之，聯(lián)合檢測stathmin-1及p16的表達(dá)，可以明確區(qū)分子宮頸病變中高級別與低級別病變和良性反應(yīng)性改變，使CIN分級更加精確，減少過度治療，為臨床治療提供確實有效的病理診斷依據(jù)。

[1] Possati-Resende JC, Fregnani JH, Kerr LM,et al.The Accuracy of p16/Ki-67 and HPV Test in the Detection of CIN2/3 in Women Diagnosed with ASC-US or LSIL[J].PLoS One,2015,10(7):445.

[2] 余 燕.子宮頸癌的防治與護理進(jìn)展研究[J].家庭醫(yī)藥,2016, 34(7):169.

[3] Polman NJ, Uijterwaal MH, Witte BI, et al. Good performance of p16/ki-67 dual-stained cytology for survillance of women treated for high-grade CIN[J].Int J Cancer,2017,140(2):423-430.

Immunohistochemical labeling of Stathmin-1 and p16 in grading of cervical intraepithelial neoplasia

YAO Chen, DING Lan, YANG Yong-guo, MEI Xia
(Department of Pathology; Jiangdu people's Hospital of Yangzhou,Jiangsu Yangzhou 225200,China)

ObjectiveTo analyze the role of Stathmin-1 and p16 in grading of cervical intraepithelial neoplasia, and to provide information for clinical treatment.MethodsImmunohistochemistry was used to detect the expression of Stathmin-1 and p16 in normal cervical tissues and intraepithelial neoplasia (CIN), which made CIN grading more accurate.ResultsThe positive expression rates of Stathmin-1 in normal cervical tissues, CINI, CINII and CINIII were 6.7%, 25%, 42.2% and 91.7%, respectively. The positive expression rates of p16 in normal cervical tissues, CINI, CINII and CINIII were 13.3%, 70%, 100% and 93.8%, respectively. The results indicated that Stathmin-1 is more specific than p16 in classification and identification of squamous lesions of squamous epithelium of the cervix.ConclusionStathmin-1 was overexpressed in CINIII, and in the low grade lesions did not express or partial expression, is helpful in the differential diagnosis of high level and low level of CIN and benign changes, and for clinical diagnosis and treatment of what kind of treatment to help.

Cervical intraepithelial neoplasia;Stathmin-1;p16

R969.3

A

ISSN.2095-8242.2017.47.9111.02

本文編輯：劉帥帥