景天三七莖葉的化學成分研究

韓煒　李明曉　呂重寧

[摘要] 目的 對景天三七（Sedum aizoon L.）莖葉的化學成分進行研究。 方法 采用70%乙醇對景天三七干燥莖葉進行提取，乙醇總浸膏用水混懸，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，利用硅膠柱色譜，Sephadex LH-20柱色譜和制備高效液相色譜等手段進行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)對化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定。 結(jié)果 從景天三七莖葉的70%乙醇提取物的正丁醇層萃取物中分離得到9個化合物，分別鑒定為山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、楊梅素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（2）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（3）、草質(zhì)素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（4）、woodorien（5）、vanilloloside（6）、benzy-1-O-β-D-glucopyranoside（7）、苯乙醇-O-β-D-葡萄糖苷（8）、benzylethyl-O-β-D-xylopyranosyl-（1→2）-β-D-glucopyranoside（9）。 結(jié)論 化合物4為未見文獻報道的新化合物，化合物6～9均為首次從景天屬植物中分離得到。

[關(guān)鍵詞] 景天三七；莖葉；化學成分；草質(zhì)素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷；楊梅素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷

[中圖分類號] R284.1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）09（c）-0033-04

[Abstract] Objective To study the chemical constituents in the stems and leaves of Sedum aizoon L. Methods The stems and leaves of Sedum aizoon L. was extracted with 70% ethyl alcohol to give ethanol extracts， which was further diluted by H2O and extracted with petroleum ether， chloroform， EtOAc and n-BuOH， respectively. They were isolated and purified by silica gel column chromatography， Sephadex LH-20 gel column chromatography and high performance liquid chromatography methods. The structures were elucidated based on the physic-chemical characters and spectral analysis. Results Nine compounds were obtained from n-BuOH extracts of 70% ethyl alcohol extracts from stems and leaves of Sedum aizoon L.， which was kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside （1）， myricetin-3-O-α-L-arabinopyranoside （2）， quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside （3）， herbacetin-3-O-α-L-arabinopyranoside （4）， woodorien （5）， vanilloloside （6）， benzy-1-O-β-D-glucopyranoside （7）， benzylethyl-O-β-D-glucopyranoside （8）， benzylethyl-O-β-D-xylopyranosyl-（1→2）-O-β-D-glucopyranoside （9）， respectively. Conclusion Compound 4 is a new compound， which has not yet been reported. Compounds 6-9 are isolated from genus Sedum for the first time.

[Key words] Sedum aizoon L.； Stems and leaves； Chemical constituents； Herbacetin-3-O-α-L-arabinopyranoside； Myricetin-3-O-α-L-arabinopyranoside

景天三七（Sedum aizoon L.）為景天屬（Sedum）植物，多分布于我國東部沿海地區(qū)，常以全草入藥，有散瘀止血、寧心安神的功效[1]?，F(xiàn)代研究表明，景天三七含有大量的黃酮類和酚酸類成分，具有顯著的降血壓和降血脂作用，被廣泛應用于心血管疾病的防治[2-3]。目前景天三七的化學成分國內(nèi)外研究報道較少[4-7]，為明確景天三七中的化學成分，探討景天三七的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實驗對其莖葉的化學成分進行研究，分離并鑒定了9個化合物，分別鑒定為：山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside）（1）、楊梅素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（myricetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）（2）、槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）（3）、草質(zhì)素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（her？鄄bacetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）（4）、woodorien（5）、vanilloloside（6）、benzy-1-O-β-D-glucopyranoside（7）、苯乙醇-O-β-D-葡萄糖苷（benzylethyl-O-β-D-glucopyranoside）（8）、benzylethyl-O-β-D-xylopyranosyl-（1→2）-O-β-D-glucopyranoside（9）?；衔?為未見文獻報道的新化合物，化合物6～9均為首次從景天屬植物中分離得到。endprint

1 儀器與材料

Bruker ARX核磁共振波譜儀（瑞士Bruker公司）；Acquity UPLC-Synapt G2 Q-TOF質(zhì)譜儀（美國Waters公司）；Yanaco MP-S3顯微熔點測定儀（日本島津公司）；Agilent 1260高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；Shimadzu LC-10A制備型高效液相色譜儀（日本島津公司）；DZTW型調(diào)溫電熱套（北京市光明醫(yī)療儀器廠）；EYELA N-1300旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化器械株式會社）；SHZ-D循環(huán)水式多用真空泵（鞏義市科瑞儀器有限公司）；Sephadex LH-20（美國Sigma公司）；薄層色譜和柱色譜用硅膠（100～200目，200～300目，青島海洋化工有限公司）；其他試劑（分析純和色譜純，市售）。

景天三七于2015年7月采于遼寧省鞍山市臺安縣，自然風干，由沈陽藥科大學中藥學院路金才教授鑒定為景天三七（Sedum aizoon L.），標本保存在沈陽藥科大學標本館。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取與分離

景天三七干燥莖葉（8.2 kg）剪刀剪成2 cm左右細段，用體積分數(shù)為70%的乙醇加熱回流提取3次（100 L×3，每次2 h）后，合并提取液，減壓回收溶劑得總浸膏600 g?？偨嘤盟鞈?，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃?。? L×3次），得石油醚萃取物1.4 g、氯仿萃取物5 g、乙酸乙酯萃取物130 g、正丁醇萃取物220 g。正丁醇部位經(jīng)硅膠柱色譜分離，乙酸乙酯-甲醇（50∶1→1∶1）梯度洗脫，分成5個流分Fr. 1～5。其中Fr. 1（54 g）經(jīng)硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（100∶1→5∶1）梯度洗脫，分成4個流分Fr. 1-1～1-4。Fr. 1-2經(jīng)硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（15∶1）等度洗脫，得到化合物1（12 mg）和2（17 mg）。Fr. 1-3經(jīng)硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（20∶1→5∶1）梯度洗脫，Sephadex LH-20柱色譜（甲醇-水）和制備型高效液相色譜（甲醇-水）分離，得到化合物8（7 mg）、6（15 mg）、9（11 mg）和7（23 mg）。Fr. 2（13 g）經(jīng)反復硅膠柱色譜分離，二氯甲烷-甲醇（30∶1→5∶1）梯度洗脫和Sephadex LH-20柱（二氯甲烷-甲醇-水）分離得到的化合物5（6 mg）、3（4 mg）和4（13 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1 新化合物結(jié)構(gòu)鑒定

化合物4結(jié)構(gòu)解析：黃色無定型粉末，mp：221.2～223.8 ℃。Molish和鹽酸鎂粉反應呈陽性，提示為黃酮苷類化合物。HR-ESI-MS給出m/z：[M+H]+：435.0921（C20H19O11，計算值435.0927）。UV（MeOH）λmax 269（0.21）。IR中給出3410 cm-1的羥基信號，1649 cm-1的γ-吡喃酮信號，1609 cm-1的碳碳雙鍵信號。鹽酸水解檢出阿拉伯糖，提示化合物存在阿拉伯糖片段。

1H-NMR（300 MHz，DMSO-d6）譜中，δ 12.37（1H，s）為與羰基形成分子內(nèi)氫鍵的活潑質(zhì)子信號，可知黃酮的5位有羥基取代；δ 8.27～6.25為芳香環(huán)上的質(zhì)子信號，δ 8.22（2H，d，J = 8.7 Hz），6.84（2H，d，J = 8.7 Hz）提示為B環(huán)上AA′ BB′偶合系統(tǒng)的H-2′，H-6′及H-3′，H-5′苯環(huán)質(zhì)子信號；δ 6.21（1H，s），推測這個質(zhì)子位于黃酮的A環(huán)6、8位或C環(huán)3位上，而13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）譜中，δ 99.1常為A環(huán)6位碳信號，故H譜中δ 6.21（1H，s）歸屬可能為A環(huán)6位質(zhì)子信號，在HSQC中可見δ 6.21（1H，s）和δ 99.1存在相關(guān)，結(jié)合HMBC，確定此信號為黃酮苷元上6位信號。因未見8位質(zhì)子信號，因此推測此黃酮5、7、8、4′位被取代。另外，1H-NMR譜中，δ 5.30（1H，d，J = 5.4 Hz，H-1′′）推測為阿拉伯糖的端基質(zhì)子信號，δ 3.76～3.19間信號為糖上其他質(zhì)子信號。13C-NMR譜中，δ 177.6的羰基信號進一步證明此化合物為黃酮類化合物。根據(jù)δ 131.3和115.3碳信號的積分高度可知它們分別為2個碳信號，結(jié)合HSQC和HMBC圖譜，將此二者信號歸屬為B環(huán)的C-2′、C-6′和C-3′、C-5′。結(jié)合HMBC和HSQC，確定了阿拉伯糖上的碳和氫信號歸屬，δ 101.5、71.8、70.9、66.3、64.7為一組吡喃阿拉伯糖上的碳信號，根據(jù)氫譜中端基質(zhì)子的偶合常數(shù)可知糖的端基構(gòu)型為α型。通常情況下，5，7-二羥基取代黃酮的C-6，8的化學位移分別在δ 96～98、δ 92～95；而此化合物的譜中，C-8信號由δ 92左右向低場移至δ 123.8，可進一步推測此化合物的C-8位被羥基取代。故推斷，此黃酮為5、7、8和4′位取代的草質(zhì)素類黃酮。在B環(huán)為AA′BB′系統(tǒng)的黃酮醇類化合物中，如果3位被糖苷取代，H譜中H-2′，H-6′將向低場移動至7.9～8.4，在本結(jié)構(gòu)中，H-2′、H-6′位移至8.22，因此推測此黃酮3位與糖單元相連，同時，在HMBC中可見阿拉伯糖端基質(zhì)子信號δ 5.30和苷元3位δ 133.5存在遠程相關(guān)，進一步確定阿拉伯糖和苷元3位相連接。綜上所述，確定化合物4為草質(zhì)素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（Herbacetin-3-O-α-L-arabinopyranoside），該化合物為未見文獻報道的新化合物。結(jié)構(gòu)見圖1，核磁數(shù)據(jù)歸屬見表1。

2.2.2 已知化合物的鑒定

2.2.2.1 化合物1 黃色針晶（MeOH-H2O），鹽酸鎂粉反應呈陽性，三氯化鐵氰化鉀反應呈陽性，Molish反應呈陽性。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：177.6（C-4），164.2（C-7），161.3（C-5），160.0（C-4′），156.4（C-2），156.3（C-9），133.3（C-3），130.9（C-2′），130.9（C-6′），120.9（C-1′），115.2（C-3′），115.2（C-5′），104.1（C-10），98.8（C-6），93.7（C-8），100.9（C-1″），77.6（C-3″），76.5（C-5″），74.3（C-2″），70.0（C-4″），60.9（C-6″）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物1為山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside）[8-9]。endprint

2.2.2.2 化合物2 棕黃色粉末。鹽酸-鎂粉反應呈陽性，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應呈陽性，Molish反應呈陽性。13C-NMR（75 MHz，DMSO-d6）δ：178.0（C-4），164.7（C-7），161.7（C-5），157.1（C-9），156.9（C-2），146.0（C-3′，5′），137.4（C-4′），134.4（C-3），120.3（C-1′），109.0（C-2′，6′），104.5（C-10），99.3（C-6），94.2（C-8），102.3（C-1″），72.4（C-2″），71.3（C-3″），67.1（C-4″），65.4（C-5″）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物2為楊梅素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（myricetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）[10]。

2.2.2.3 化合物3 黃色無定型粉末，鹽酸鎂粉反應呈陽性，13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：178.0（C-4），164.6（C-7），161.7（C-5），156.7（C-2），156.7（C-9），149.1（C-4′），145.5（C-3′），134.2（C-3），122.5（C-6′），121.4（C-1′），116.2（C-5′），115.8（C-2′），104.4（C-10），101.9（C-1′′），99.1（C-6），94.0（C-8），72.1（C-3′′），71.2（C-2′′），66.5（C-4′′），64.7（C-5′′）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物3為槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖苷（quercetin-3-O-α-L-arabinopyranoside）[11-12]。

2.2.2.4 化合物5 白色無定型粉末，13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：130.2（C-1），δ 131.7（C-2），160.5（C-3），159.2（C-4），108.3（C-5），101.3（C-6），164.3（C=O），56.0（OCH3），102.1（C-1′）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物5為woodorien[13]。

2.2.2.5 化合物6 白色粉末，13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：136.7（C-1），111.4（C-2），149.1（C-3），145.6（C-4），115.5（C-5），118.9（C-6），63.1（C-7），100.6（C-1′），73.6（C-2′），77.3（C-3′），70.0（C-4′），77.2（C-5′），61.0（C-6′），55.9（OMe）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物6為vanilloloside[14-15]。

2.2.2.6 化合物7 白色粉末，13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：138.1（C-1），128.1（C-2、6），127.6（C-3、5），127.3（C-4），102.1（C-1′），77.0（C-3′），76.8（C-5′），73.5（C-2′），70.1（C-4′），69.5（C-7），61.1（C-6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物7為benzy-1-O-β-D-glucopyranoside[16]。

2.2.2.7 化合物8 白色粉末，13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：139.1（C-1），129.3（C-3，5），128.6（C-2，6），126.4（C-4），103.2（C-1′），77.3（C-3′），77.1（C-5′），73.8（C-2′），70.5（C-4′），69.9（C-8），61.5（C-1′），36.0（C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物8為苯乙醇-O-β-D-葡萄糖苷（benzylethyl-O-β-D-glucopyranoside）[17-19]。

2.2.2.8 化合物9 無色針晶（甲醇），13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：139.1（C-1），129.3（C-3，5），128.6（C-2，6），126.4（C-4），104.4（C-1′′），103.2（C-1′），79.6（C-2′），77.0（C-3′），76.9（C-5′），76.1（C-3′′），73.7（C-2′′），70.3（C-4′），69.6（C-4′′），69.9（C-8），66.0（C-5′′），63.4（C-6′），36.0（C-7）。以上數(shù)據(jù)與文獻報道基本一致，故鑒定化合物9為benzylethyl-O-β-D-xylopyranosyl-（1→2）-O-β-D-glucopyranoside[20]。

3 討論

本研究從景天三七莖葉的70%乙醇提取液的正丁醇萃取部分中分離得到了8個化合物，涉及黃酮苷類、酚酸類、苯乙醇類和苯甲醇類化合物，其中化合物6～9為首次從景天屬植物中分離得到，化合物4為新化合物。此次實驗結(jié)果豐富了景天三七的化學成分類型，為景天三七的藥用價值研究及開發(fā)提供參考依據(jù)。

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（收稿日期：2017-06-11 本文編輯：張瑜杰）endprint