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    贛南地區(qū)1452例女性宮頸重度炎癥和TCT陽(yáng)性患者人乳頭瘤病毒(HPV)感染型別分析探討

    2017-10-21 05:46:16王瓏吳霞謝愛(ài)華盧志勇朱良劉敏
    關(guān)鍵詞:危型乳頭宮頸癌

    王瓏 ,吳霞 ,謝愛(ài)華 ,盧志勇 ,朱良 ,劉敏

    (1、瑞金市婦幼保健院檢驗(yàn)科,江西 瑞金 342500;2、浦東新區(qū)曹路鎮(zhèn)社區(qū)醫(yī)院,上海 201209;3、瑞金市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500)

    贛南地區(qū)1452例女性宮頸重度炎癥和TCT陽(yáng)性患者人乳頭瘤病毒(HPV)感染型別分析探討

    王瓏1,吳霞2,謝愛(ài)華3,盧志勇1,朱良1,劉敏1

    (1、瑞金市婦幼保健院檢驗(yàn)科,江西 瑞金 342500;2、浦東新區(qū)曹路鎮(zhèn)社區(qū)醫(yī)院,上海 201209;3、瑞金市中醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西瑞金342500)

    目的 探討核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片分型技術(shù)(HybriMax)在人乳頭瘤病毒HPV感染分型檢測(cè)中的應(yīng)用,了解贛南地區(qū)女性人乳頭瘤病毒(HPV)型別的感染狀況,為HPV高危型疫苗的研制提供參考。方法 挑選重度炎癥和非典型鱗狀細(xì)胞(ASCUS)以上的患者1452例女性作為做HPV基因分型檢測(cè)的研究對(duì)象,同時(shí)做陰道鏡檢查和進(jìn)行宮頸組織病理檢查處理。結(jié)果 在1452例女性中HPV感染646例,感染率為44.5%。HPV陽(yáng)性患者中主要為單一高危型感染261例,占HPV總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率40.4%(261/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率17.98%(261/1452)。HPV陽(yáng)性患者中單獨(dú)低危型感染75例,占HPV總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率11.6%(75/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率5.2%(75/1452)。高危與低危復(fù)合感染70例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率10.84%(70/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率4.82%(70/1452)。HPV高危型陽(yáng)性患者491例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率76.0%(491/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率33.82%(491/1452)。HPV低危型陽(yáng)性患者感染155例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率24.0%(155/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率10.67%(155/1452)。贛南女性HPV感染主要為HPV16、52、58、39、53型。結(jié)論 贛南地區(qū)婦女宮頸感染HPV的主要類型是HPV16、52、58,可為我國(guó)HPV分型疫苗的研制提供參考。

    高危型HPV16、52、58感染;人乳頭瘤病毒HPV;HPV基因分型;贛南地區(qū)女性

    宮頸癌目前仍然是危害全球女性的第二大惡性腫瘤。人乳頭瘤病毒(HPV)感染被認(rèn)為是患宮頸癌的重要因素,99.70%宮頸癌患者曾感染過(guò)1種或多種HPV。在已發(fā)現(xiàn)的150多種HPV中約40種能引起生殖道感染,至少有20種與腫瘤發(fā)生有關(guān)[1]。高危型HPV感染,易導(dǎo)致高度宮頸病變,且從高度宮頸病變到癌變一般需要10年左右的時(shí)間[2]。為了解贛南地區(qū)女性HPV感染情況,本研究用核酸分子快速導(dǎo)流雜交基因芯片分型技術(shù)(Hybri-Max),對(duì)在我院就診的1452例女性HPV分型檢測(cè)資料進(jìn)行回顧分析?,F(xiàn)報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 研究對(duì)象選取ASCUS以上做HPV的1452例女性為研究對(duì)象 (本院全部HPV標(biāo)本送江西華星醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心檢測(cè)報(bào)告結(jié)果),對(duì)其宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查(TCT)和HPV基因檢測(cè),同時(shí)進(jìn)行宮頸組織病理檢查。

    1.2 方法

    1.2.1 標(biāo)本采集暴露宮頸,將采樣刷置于宮頸口順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈,取出宮頸刷,置于加有細(xì)胞保存液的采樣瓶中,折斷刷頭,密閉送檢。

    1.2.2 試劑和儀器DNA提取試劑盒(凱普生物化學(xué)有限公司提供),HybriMax醫(yī)用核酸分子快速雜交儀和HPV擴(kuò)增分型檢測(cè)試劑盒 (凱普生物化學(xué)有限公司提供),ABI7300基因擴(kuò)增儀 (伯樂(lè)公司,美國(guó))。

    1.2.3 實(shí)驗(yàn)方法采用HybriMax技術(shù)檢測(cè)21種HPV亞型,基本原理是先將標(biāo)本中HPV病毒基因的DNA進(jìn)行基因擴(kuò)增,然后利用核酸分子快速導(dǎo)流雜交技術(shù),使目的分子導(dǎo)流穿過(guò)固定有DNA探針的低密度基因芯片薄膜上,而發(fā)生快速雜交。HPV基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟:樣本HPV DNA提取,PCR擴(kuò)增,核酸分子快速導(dǎo)流雜交,結(jié)果判斷,按芯片上HPV亞型分布的相應(yīng)著色點(diǎn)判斷。21種HPV分為高危型和低危型兩類[3],高危型(high-risk types,HR-HPV)15 種,包括 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68, 低危型 (lowrisktypes,LR-HPV)6種HPV6、11、42、43、44、CP8304,患者兩型為雙重感染,患者3型以上屬多型感染。

    1.2.4 宮頸細(xì)胞學(xué)TCT檢測(cè)采用湖北泰康醫(yī)療設(shè)備有限公司提供設(shè)備:微電腦控制的TKY-B6B液基薄層細(xì)胞自動(dòng)片機(jī),使用帶攝像的顯微鏡(OLYMPUS,CX31)觀察標(biāo)本染片,液基細(xì)胞學(xué)的診斷采用TBS(theBethesdasystem,TBS)診斷標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告檢測(cè)結(jié)果。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對(duì)HPV陽(yáng)性率及各高危型別陽(yáng)性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì),采用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù),卡方檢驗(yàn)χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 HPV感染情況及年齡分布1452例女性中HPV感染646例,感染率為44.5%。HPV陽(yáng)性患者中主要為單一高危型感染261例,占HPV總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率40.4%(261/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率17.98%(261/1452)。HPV陽(yáng)性患者中單獨(dú)低危型感染75例,占HPV總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率11.6%(75/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率 5.2%(75/1452)。高危與低危復(fù)合感染70例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率 (%)10.84%(70/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率(%)4.82%(70/1452)。HPV高危型陽(yáng)性患者感染491例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率76.0%(491/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率33.82%(491/1452)。HPV低危型陽(yáng)性患者感染155例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率24.0%(155/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率10.67%(155/1452)。見(jiàn)表1。

    表1 1452例標(biāo)本HPV總陽(yáng)性率及高危、低危、復(fù)合型HPV的陽(yáng)性率

    2.2 HPV感染型別分布 1452例女性中HPV感染646例,感染率為44.5%。其中:HPV高危型別感染總計(jì)491例(76%):?jiǎn)我桓呶P透腥?61例40.4%,雙重高危型感染117例(18.11%),多重高危型感染114例 (17.65%),HPV檢出率在前面5位的是16、52、58、39、33型。 HPV 低危型別感染總計(jì) 155例(24%):?jiǎn)我坏臀P透腥?5例(11.61%),雙重低危型感染36例(5.6%),多重低危型感染44例(6.8%);HPV檢出率在前面3位的是CP8304、6、11型。43型未檢測(cè)出單一感染型,42型未檢測(cè)出雙重感染型。其中檢測(cè)出一例HPV多重感染最多型包括8型之多罕見(jiàn)特例: 高危型有 4 種(52、56、58、59),低危型有(11、42、44、cp8304)4 種,現(xiàn)已治愈。 見(jiàn)表2。

    表2 1452例女性21種HPV感染情況[n(%)]

    3 討論

    目前研究發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒的感染(HPV),尤其是高危型HPV的感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)[4]。絕大部分的CIN和宮頸癌中均可檢測(cè)出HPV高危型別,高危型HPV與癌前病變相關(guān)已成共識(shí)。流行病學(xué)調(diào)查[4]顯示,世界范圍內(nèi)女性HPV感染主要型為16、18、31、58和52, 而在不同地區(qū)主要型別比例存在一定的差異,在歐美地區(qū)HPV16、18與宮頸癌發(fā)生最為密切,也是疫苗研制的主要目標(biāo)型別,但在亞洲某些地區(qū)[5]宮頸癌患者中卻以HPV52、58最為流行,提示在該地區(qū)HPV疫苗應(yīng)包括這些型別。HPV在我國(guó)普通女性中的感染率為15.71%,全國(guó)范圍內(nèi)前6位常見(jiàn)高危型HPV分布依次為:HPV-16、52、58、33、18、31 型。 HPV-16型是我國(guó)最常見(jiàn)的感染型別,HPV的感染率及高危型別分布在我國(guó)不同地區(qū)及不同人群中有一定差異,HPV-16、52、58型是中國(guó)特有的優(yōu)勢(shì)感染型別[1]。本研究中 21種 HPV檢出率最高的是HPV16,其次是 HPV52、58 和 39、33。 但在歐美人群分布的HPV型別第二位是HPV18。值得注意的是,本研究檢測(cè)出1例HPV多重感染最多型包括8型之多的罕見(jiàn)特例:高危型有4種(52、56、58、59),低危型有(11、42、44、cp8304)4 種,楊曉華[5]等認(rèn)為多重感危險(xiǎn)更大,更易導(dǎo)致宮頸病變。南部地區(qū)HPV型別最多有18種,也是少數(shù)民族最多的省份地區(qū)。由此推測(cè)我國(guó)女性人群中HPV型別與歐美女性人群不同,HPV型別具有地域特性。

    高危型HPV持續(xù)感染與宮頸病變及宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān),且是否合并感染對(duì)宮頸疾病治療的預(yù)后及評(píng)估有重要意義[6]。在宮頸疾病治療前有必要了解HPV感染狀況及基因型別,這有利于宮頸癌的預(yù)防、疫苗的研制和接種,以及宮頸疾病患者術(shù)后管理[7]。HPV感染普遍存在,只有少部分感染者會(huì)發(fā)生CIN,而CIN中也只有部分患者將進(jìn)展為宮頸癌。利用宮頸細(xì)胞TCT檢測(cè)、HPV型別檢測(cè)、細(xì)胞DNA分析系統(tǒng),可早期發(fā)現(xiàn)婦女宮頸細(xì)胞核DNA的變化,有條件的醫(yī)院可盡快應(yīng)用于婦科和保健門診,以便早期篩查宮頸病變高風(fēng)險(xiǎn)人群。本研究選取ASCUS以上做HPV的1452例女性中HPV高危型陽(yáng)性患者感染491例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率76.0%(491/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率33.82%(491/1452)。HPV低危型陽(yáng)性患者感染155例,占總陽(yáng)性標(biāo)本陽(yáng)性率24.0%(155/646),占總標(biāo)本數(shù)陽(yáng)性率10.67%(155/1452);HPV檢出率在前面3位的是CP8304、6、11型;43型未檢測(cè)出單一感染型,42型未檢測(cè)出雙重感染型。在多重感染構(gòu)成比中,女性由HPV16、58、52高危亞型組成的雙重感染或形成混合型感染為主要形式[8]。HPV多重感染對(duì)宮頸病變及宮頸癌的發(fā)生發(fā)展起促進(jìn)作用,結(jié)果與Fife KH[9]等的研究結(jié)果一致。持續(xù)高危型HPV感染是CIN進(jìn)一步進(jìn)展為宮頸癌的必須過(guò)程[10]。當(dāng)多種型別的HPV感染同時(shí)存在時(shí),致癌危險(xiǎn)增高,當(dāng) HPV6,11,16,18 均呈陽(yáng)性時(shí),其相對(duì)危險(xiǎn)最高[11]。

    本研究顯示,贛南地區(qū)1452例女性宮頸重度炎癥和TCT陽(yáng)性患者人乳頭瘤病毒(HPV)感染型別分析,具有結(jié)果直觀、判斷準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn),與組織病理學(xué)診斷有較高的符合率。我們認(rèn)為,單獨(dú)低危型的人群可以按照婦科一般炎癥治療對(duì)待,而有多重感染特別是其中有一個(gè)是高危型HPV感染的患者,應(yīng)注意治療時(shí)間和定期復(fù)查,防止向早期宮頸病變和宮頸癌的方向發(fā)展。贛南地區(qū)所處是客家人居住地,HPV16、52、58型為高發(fā)型,可能有地域、環(huán)境溫度、民族生活習(xí)慣有一定關(guān)系。研發(fā)機(jī)構(gòu)應(yīng)聯(lián)合衛(wèi)生相關(guān)機(jī)構(gòu),組織全國(guó)各省份婦女保健醫(yī)療部門針對(duì)婦女HPV檢測(cè)成立:二級(jí)防疫,三級(jí)治療的防疫治療機(jī)構(gòu),面對(duì)婦女HPV感染實(shí)際情況,積極收集相關(guān)臨床資料提高宮頸癌和宮頸癌前病變篩查的工作效能;特別是針對(duì)高危型別HPV陽(yáng)性者應(yīng)做好定期檢測(cè)和隨訪工作,掌握人群中HPV感染狀況及基因型別分布特點(diǎn),為宮頸疾病和宮頸癌的篩查防治及HPV疫苗研制,以便為決策者和研發(fā)機(jī)構(gòu)提供科學(xué)依據(jù)。

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    R446.62,R737.33

    A

    1674-1129(2017)05-0791-03

    10.3969/j.issn.1674-1129.2017.05.056

    2016-12-06;

    2017-06-16)

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